益生菌和酸奶对乳糖不耐受者结肠菌群作用研究

目的研究补充益生菌和酸奶对乳糖不耐者结肠菌群的影响。方法以经25g乳糖负荷试验筛选的乳糖不耐受者11名为对象,让受试者持续摄入益生菌(含B.longum)和酸奶(含B.animalis,L.bulgaricus,S.thermophilus)14天进行补充研究。试验分3阶段:即补充前阶段7天,补充阶段14天,补充后阶段7天。在补充阶段开始前1天和结束后1天分别进行乳糖不耐受负荷试验,记录受试者不耐受症状并评分。在试验阶段收集受试者的新鲜粪便样本共5次,采用荧光原位杂交技术(FISH)和变性梯度凝胶电泳技术(DGGE)检测补充前、补充期间和补充后粪便样本细菌总数和各主要菌群的数量构成,以及外源性和内源性双歧杆菌菌种分布。结果在补充益生菌胶囊和酸奶后受试者乳糖不耐受症状评分均显著降低(P<0·05)。补充期间细菌总数和主要细菌组(Bifidobacteria,Bacteroides-Prevotella,Eubacteria,Ruminccocc等)的数量均显著高于补充前(P<0·05),双歧杆菌的数量在补充结束后7天仍显著高于补充前(P<0·05),其他几组细菌数量在补充结束后下降;DGGE结果显示来自益生菌胶囊和酸奶的双歧杆菌菌种在补充期间能够在受试者肠道内检出,但个体间存在较大差异。结论益生菌胶囊和酸奶中的双歧杆菌能够耐受胃肠的酸碱环境在结肠内存活和繁殖,并影响内源性双歧杆菌和其他细菌组的数量,改变结肠菌群的构成,尤其以双歧杆菌更为明显,这对减轻乳糖不耐受症状起到重要作用。

应用荧光原位杂交技术分析乳糖不耐受者结肠菌群

目的 : 探讨结肠菌群构成与乳糖不耐受 (lactose intolerance,LI)症状之间的关系 ,以及饮奶对结肠双歧杆菌数量的影响。方法 : 根据乳糖负荷试验 ,结合问卷调查筛选成人乳糖吸收不良者、轻度及重度乳糖不耐受者作为试验对象。收集受试者一次新鲜全便 ,选用 5种特异性的 1 6S r RNA寡核苷酸探针 ,应用荧光原位杂交技术检测结肠细菌总数以及几种主要菌属 (种 )的构成。结果 : 乳糖不耐受组与吸收不良组相比 ,细菌总数和双歧杆菌数有显著性差异 (P<0 .0 5) ,细菌总数与乳糖不耐受症状评分之间呈负相关 (P<0 .0 5) ;每次饮奶以平均 2 0 0 ml计 5～ 7次 / w饮奶组与 0～ 2次 / w饮奶组或 0次 / w饮奶组相比 ,双歧杆菌数量显著增高 (P<0 .0 5)。结论 : 结肠细菌总数和双歧杆菌数可能与 LI症状的产生有关 ,同时饮奶习惯可能对双歧杆菌数量有潜在影响。

荧光原位杂交技术分析人结肠菌群方法研究

建立荧光原位杂交技术分析人体内结肠菌群的方法。取受试者新鲜粪便 ,选用 5种特异性的 16SrRNA寡核苷酸探针 ,检测粪便样本收集后的保存时间、温度 ,离心条件及样本固定液存放时间对杂交计数结果的影响。结果建立最佳实验条件为 :粪便样本收集后应尽快在 4℃下保存 ,放置时间不要超过 12小时即作处理 ;样本的适宜离心条件为 70 0g 2分钟 ;样本用多聚甲醛固定后在 - 80℃下存放时间不要超过 5个月。该方法具有较好的稳定性 ,可以有效地检出个体之间结肠菌群的差异。