基于UHPLC-QTRAP-MS/MS结合网络药理学探讨不同厂家龟甲胶中氨基酸含量差异及其抗骨质疏松的潜在机制

比较市面上龟甲胶的质量差异,探索龟甲胶治疗骨质疏松症的潜在活性成分及靶点。我们选取市面上4个厂家共15批次的龟甲胶样品,采用UHPLC-QTRAP-MS/MS检测各龟甲胶中水解氨基酸的含量,多元统计分析各批次中水解氨基酸含量的差异性。采用网络药理学预测龟甲胶的活性成分及治疗骨质疏松症的核心靶点,通过GO与KEGG富集分析预测分子机制,并运用分子对接预测各氨基酸与Hub靶点的结合模式。结果显示,厂家A和D的样品聚类良好,其中A厂家的龟甲胶综合得分最高。17种水解氨基酸中谷氨酸、天冬氨酸、丝氨酸、L-羟脯氨酸、赖氨酸、精氨酸、苏氨酸、蛋氨酸的含量差异对龟甲胶质量影响较大。筛选出17个水解氨基酸的175个潜在靶点,68个骨质疏松症核心靶点,其中甘氨酸、丙氨酸为关键成分。GO/KEGG分析核心靶点主要涉及α-氨基酸代谢过程、细胞氨基酸代谢过程、小分子分解代谢过程等生物进程,以及氨基酸合成、精氨酸和脯氨酸代谢、碳代谢等212条信号通路。分子对接则显示2个关键成分甘氨酸、丙氨酸与11个Hub靶点的活性口袋结合较好。综上,市面上不同厂家及批次间的龟甲胶水解氨基酸含量存在一定差异。龟甲胶抗骨质疏松的关键活性成分可能是甘氨酸、丙氨酸,其作用机理可能与CAT、NOS1、GATM等靶点相关,通过影响氨基酸生物合成、精氨酸和脯氨酸代谢、碳代谢等途径而起作用。

雄蚕益肾方对LOH大鼠Leydig细胞胆固醇转运蛋白、睾酮合成酶和SF-1表达的影响

目的:探讨雄蚕益肾方对LOH大鼠Leydig细胞胆固醇转运蛋白、睾酮合成酶和SF-1表达的影响。方法:25只18月龄雄性SD大鼠随机均分为模型组、丙酸睾酮组、雄蚕益肾方-低、中、高剂量组,2月龄雄性SD大鼠5只设为正常组。雄蚕益肾方-低、中、高剂量组分别给予10.4、20.8、41.6 g/(kg·d)体重剂量的雄蚕益肾方配方颗粒剂灌胃;丙酸睾酮组大鼠肌注5.21 mg/(kg·d).体重剂量的丙酸睾酮,每周3次;正常组和模型组给予相同体积的蒸馏水灌胃,均连续28 d。实验结束后取睾丸组织进行Western印迹检测StAR、TSPO、CYP11A1、HSD3B7、HSD17B4和SF-1蛋白表达。结果:模型组大鼠睾丸组织StAR、TSPO、CYP11A1、HSD3B7、HSD17B4蛋白和SF-1表达均显著低于正常组(P<0.05);与模型组相比,雄蚕益肾方-低、中、高各剂量组大鼠睾丸组织StAR、TSPO、CYP11A1、HSD3B7、HSD17B4蛋白和SF-1显著增高(P<0.05)。结论:雄蚕益肾方能上调LOH大鼠睾丸组织胆固醇转运蛋白(StAR、TSPO)、睾酮合成酶(CYP11A1、HSD3B7、HSD17B4)以及上游转录因子SF-1表达水平,可能是其干预LOH的机制之一。

解脲支原体感染对大鼠生精细胞线粒体核糖体蛋白S22的影响及知柏地黄汤的干预作用

目的:观察解脲支原体(UU)感染对大鼠睾丸生精细胞线粒体核糖体蛋白S22(MRPS22)表达的影响及知柏地黄汤的干预作用。方法:UU感染SD雄性大鼠模型45只,随机分成模型组、知柏地黄汤组、西药组,并以健康大鼠为对照组,每组15只。造模成功后第10天起知柏地黄汤组予以知柏地黄汤灌胃[1 g/(k·d)],西药组予以阿奇霉素灌胃[0.105 g/(k·d)],对照组、模型组予以同体积生理盐水灌胃,连续灌胃21 d。采用TUNEL法检测生精细胞凋亡,电镜观察生精细胞线粒体结构,流式细胞仪检测线粒体膜电位(MMP),RT-PCR检测大鼠睾丸生精细胞MRPS22 m RNA表达,Western印迹检测大鼠睾丸生精细胞MRPS22蛋白表达。观察各组大鼠睾丸生精细胞凋亡指数(AI)、生精细胞线粒体结构、MMP、生精细胞MRPS22 m RNA和蛋白表达情况。结果:模型组大鼠睾丸生精细胞AI[(11.23±1.65)%]显著高于知柏地黄汤组[(6.62±0.49)%]和西药组[(7.82±0.81)%](P <0. 01),知柏地黄汤组显著低于西药组(P <0.05)。知柏地黄汤组及西药组大鼠睾丸线粒体结构较模型组显著改善。模型组大鼠睾丸生精细胞MMP水平[(8. 77±1. 73)%]显著低于对照组[(22. 33±1. 66)%](P <0. 01),知柏地黄汤组[(18. 26±1. 32)%]显著高于模型组(P <0.01)和西药组[(15.91±1.69)%],西药组MMP水平显著高于模型组(P <0. 01)。模型组MRPS22 m RNA表达(8.02±3.21)与对照组(15.43±2.54)、知柏地黄汤组(11. 26±3. 82)相比均具有显著性差异(P <0. 01),知柏地黄汤组MRPS22 m RNA表达显著高于西药组(8. 79±2. 03)(P <0. 01)。模型组(22. 65±5. 31) MRPS22蛋白表达与对照组(33.31±7.09)、知柏地黄汤组(33.35±3.96)和西药组(28.11±4.13)相比均具有显著性差异(P <0. 01),知柏地黄汤组显著高于西药组(P <0.01)。大鼠睾丸生精细胞MRPS22蛋白表达量与MMP呈显著正相关(r=0.639,P <0.01)。结论:UU感染可能通过抑制大鼠睾丸生精细胞MRPS 22 m RNA及蛋白表达,降低MMP,引起生精细胞的凋亡。知柏地黄汤通过改善UU感染大鼠睾丸生精细胞MRPS22 m RNA及蛋白表达,提高MMP,减轻大鼠睾丸生精细胞凋亡。

非疾病老年阳虚体质人群的红外热图特征分析

目的:获得不同性别及不同季节的非疾病老年阳虚体质人群的红外热图特征。方法:在各中医院体检科或治未病中心、门诊部等筛选出阳虚体质的非疾病老年人群,获取其红外热图,并获得脏腑区域、经络、腧穴等热差值数据;分析总结非疾病老年阳虚体质人群的红外热图特点。结果:非疾病阳虚质老年人群皆有:大腹凉偏离;春季左胸△T<右胸△T;任脉△T<督脉△T;心俞穴△T春季最低,肾俞穴△T冬季最高。老年女性:右胸、小腹凉偏离。上焦△T春季最低;中焦△T冬季最低;下焦△T冬季最低。胃脘△T秋季最低;大腹△T冬季最低;小腹△T秋季最低;脾俞穴△T冬季最高;神阙△T夏季最低;督脉△T夏季最低。老年男性:上焦、中焦、左右胸、胃脘、任脉凉偏离。上焦△T冬季最低;中焦△T秋季最低;下焦△T春季最低。胃脘△T夏季最低;大腹△T秋季最低;小腹△T冬季最低;脾俞穴△T秋季最低;神阙△T秋季最低;督脉△T秋季最低。结论:不同性别及不同季节的非疾病老年阳虚体质人群的红外热图各有特点,也基本符合中医学理论。因此,通过红外热成像技术对阳虚体质进行客观的判定分析,具有较高的临床参考意义。

平乐正骨辨证论治学术渊源探析

平乐正骨内治法以八纲、经络、脏腑、卫气营血、三焦等辨证方法为依据,以卫气营血辨证为纲,采用辨病与辨证相结合,根据骨伤的轻重、缓急,素体强弱,伤病新久,选用不同方法进行治疗。从辨证论治"理、法、方、药"之源,探析平乐正骨的辨证论治学术渊源,有助于进一步构建平乐正骨的学术体系。

中医经典精品在线开放课程在成人教育中医学专业教学中的实践研究

《内经》《伤寒论》《金匮要略》《温病学》在中医药发展中具有举足轻重的地位,对其学习和传承也备受关注,在高等成人教育中对于四大经典的学习有其特殊性,普通教授的方式不能完全适应高等成人教育的教育模式,由此而衍生出诸多问题。在“互联网+”的大环境下,精品在线开放课程的出现为中医经典成人教育提供了新的契机,文章通过介绍传统成人教育模式的问题,精品在线开放课程的优势,探讨将两者结合的益处。

湖南中医药大学在线教学教务管理实践与探讨

在新型冠状病毒肺炎疫情期间,湖南中医药大学开展了在线教学,通过开展在线教学情况调查,从在线教学内容、教学组织和教学过程等方面进行在线教学教务管理实践探讨。调查发现开展在线教学专业主要为中医学和针灸推拿学,集中在大一、大二、大三年级,教学内容主要为基础课程,部分学生网络存在问题;开展在线教学的教师大多数为中级以上职称且有较长教龄的中青年专职教师,信息技术娴熟。在线教学需要结合疫情环境特点重构课程教学内容,与课程思政无缝对接,要求一线教师上好在线教学第一堂课;结合各教学单位实际,有针对性制定不同策略疫情防控期间教学组织方案,组织教学单位梳理开展在线教学课程,主要利用智慧树网、超星、中国大学慕课(MOOC)3个平台及平台的课程资源,采用平台,平台+社交软件QQ群、微信群,平台+腾讯会议,社交软件QQ群、微信群,钉钉,腾讯课堂,雨课堂等方式进行混合式在线教学,并畅通电子教材获取渠道;教务管理联合教学督导进入在线课堂,及时收集亮点及经验推广,开展在线教学质量监控,促进在线教学与线下课堂教学同质等效。

朋辈教育在中医经典教学中的应用探讨

《黄帝内经》《伤寒论》《金匮要略》《温病学》为中医四大经典,在中医药发展和教育中发挥着举足轻重的作用。但现行中医经典教育存在一些问题,使中医经典在中医院校教学中逐渐弱化,中医的生命力来源于继承创新,因此传承学习经典必不可缺,为此提出朋辈教育与中医经典教学结合的模式,以期探讨朋辈教育与中医经典教学两者结合的益处,最终体现其应用在中医经典教学中的价值和可行性。

“互联网+中医教育”网络平台在成人教育教学的探析

近年来,国家陆续出台的中医药政策彰显出我国政府对中医药事业发展的重视与支持,而人才培养是关系中医药发展的根本,对于中医成人教育,因其在教学内容、形式、方法上与普通高等教育有所区别,且存在一些问题,为此找到适合中医成人教育发展的道路尤为重要,结合现代科技,“互联网+”为我们提供了新的启迪。

论“和”之源考

"和"是中华文化源远流长的核心与关键,在古代文献中出现了与之相近的"禾""咊""龢""盉"4字,且这4个字不同程度的存在着与"和"通用的情况。通过对《说文解字诂林》中"禾""咊""龢""盉"4字以及《康熙字典》《辞海》中"和"字的分析,得出"和"之意来源于"禾""咊""龢""盉",正是这4字的不同含义造就了"和"的丰富内涵。

平乐正骨传承教育及其思想理念探讨

平乐郭氏正骨医术有二百余年的传承历史,通过口传心授,其后的几代传人都秉承祖训,致力于中医骨伤医学的传承、教育、发展、创新,尤其是1958年河南省平乐正骨学院的建立,打破了中医教育家传、跟师学徒传统传承模式的局限性,为国家培养了大批优秀中医骨科人才,被誉为我国中医骨伤学教育的“黄埔军校”,通过对平乐正骨传承教育的文献研究,基于儒、释、道教育思想对平乐正骨教育理念形成的影响,对其教育模式及思想理念进行探讨,可为中医骨伤学科人才传承提供有利参考。

全国中医亚健康医师专业相关数据分析与思考

目的:了解中医亚健康医师专业的人员规模以及本专业从业人员的职业定位与职业发展情况等,以期为卫生专业技术资格考试中增添中医亚健康医师进行论证提供可参考的数据。方法:采用横断面调查的方式,对全国256家医疗机构、42家高校、181家非医疗养生机构进行问卷调查。结果:医疗机构中大部分开设了与亚健康相关的科室,对亚健康专业医师的需求量巨大,且参与中医亚健康医师职称考试的人群庞大;高校中已开设和支持开设亚健康专业的比例越来越高,中医亚健康学已成为热门专业;非医疗养生保健机构专业人员水平参差不齐,整体水平较低仍然存在,中医亚健康医师对其进行专业指导的需求量巨大。结论:中医亚健康医师的职称考试亟需推进,对医疗机构来说,满足了本专业技术人员职称晋升的需求,有利于医师的个人发展及科室建设;使中医亚健康专业的毕业生有了明确的执业方向;有效提高非医疗养生保健机构人员的整体素质和服务水平。

古汉养生精的研究进展

古汉养生精传承了马王堆养生文化的精华和湖湘名医的智慧结晶。对其三十余年的发展中开展的临床疗效研究、动物实验研究、文化内涵研究、产品工艺研究现状进行系统的总结,并指出目前古汉养生精的研究还存在着临床研究方案有待完善、后续研究乏力、文化研究薄弱的问题,并提出解决问题的建议,以期为古汉养生精未来研究的重点方向提供参考。

雄蚕益肾方对肝郁肾虚ED大鼠阴茎eNOS、cGMP表达的影响

目的:探讨雄蚕益肾方对肝郁肾虚ED大鼠阴茎eNOS、cGMP表达的影响. 方法:50只8周龄SPF级雄性SD大鼠随机分为空白组,模型组,西药对照组,中成药对照组和雄蚕益肾方低、中、高剂量组,从50只雄性SD大鼠中随机抽取10只为空白组大鼠,其余大鼠均采用氢化可的松注射液肌注加束缚四肢复合造模方法连续14 d诱发肝郁肾虚ED模型.造模成功后,每组5只,西药对照组给予他达拉非片溶液0.52 mg,/(kg·d),中成药对照组给予疏肝益阳胶囊溶液0.3 125 g/(kg·d),雄蚕益肾方低、中、高剂量为10.4、20.8、41.6 g/(kg·d),空白组、模型组给予等体积蒸馏水,各组每日均早、晚各灌胃一次,连续28 d.造模前、造模完成后、给药28 d后均进行大鼠悬尾试验和交配实验.给药后第29天,以10%水合氯醛(3 ml/kg)麻醉大鼠,摘取大鼠阴茎组织,用免疫组化平均光密度值分析方法测定阴茎组织中eNOS、cGMP表达含量. 结果:模型组,雄蚕益肾方高、中、低剂量组和疏肝益阳组悬尾不动时间分别为(3.17±0.11)、(2.58 ±0.25)、(2.52 ±0.31)、(2.51±0.3)、(2.57±0.29) min,与模型组相比较,雄蚕益肾方高、中、低剂量组和疏肝益阳组显著降低(P<0.05).模型组,雄蚕益肾方高、中、低剂量组,疏肝益阳组,他达拉非组骑跨潜伏期(ML)分别为(9.23±0.11)、(1.21±0.12)、(2.17±0.16)、(2.26±0.13)、(1.23±0.15)、(2.48 ±0.18) min,骑跨次数(MF)分别为(0.48±0.18)、(3.29±0.11)、(3.18±0.11)、(3.05±0.05)、(3.23±0.12)、(3.2±0.28)次,插入次数(IF)分别(0.8±0.84)、(11.8±0.84)、(11.2±1.48)、(9.4±1.14)、(11.4±1.14)、(10±1.22)次,与模型组相比较,雄蚕益肾方高、中、低剂量组,疏肝益阳组,他达拉非组ML显著减少,MF、IF显著增加(P<0.05).eNOS、cGMP主要表达于阴茎海绵体动、静脉内皮细胞及海绵体窦状隙内皮细胞的细胞核和细胞质内,呈棕黄色颗粒,散在、局灶性表达;与模型组相比较,雄蚕益肾方高、中、低剂量组和疏肝益阳组阴茎组织eNOS、cGMP表达显著升高(P<0.05),他达拉非组与模型组相比无显著差异(P>0.05). 结论:雄蚕益肾方可减轻大鼠的抑郁症状,增加肝郁肾虚ED大鼠的交配次数,活化NO/cGMP通路,上调阴茎组织中eNOS、cGMP表达.

中医亚健康状态分类指南

《中医亚健康状态分类指南》研究课题组在前期研究成果基础上,按照世界中医药学会联合会《标准制定和发布工作规范》和《世界中联各专业委员会专业技术标准制定实施办法》规定要求,结合临床实践应用反馈情况,开展《中医亚健康状态分类指南》课题研究。创新性地通过“型态-证-体质”三位一体的方法来对中医亚健康状态进行分类,将亚健康状态具体分为活动-休息型态亚健康、营养-代谢型态亚健康、排泄型态亚健康、感知型态亚健康、性-生殖型态亚健康和认知-应对-关系型态亚健康六种型态,并经过反复论证,于2019年10月12日审议通过了《中医亚健康状态分类指南》(SCM-C0038-2020),并于2020年1月正式对外公开发布。

国医大师孙光荣论中医治病四大特点

国医大师孙光荣认为中医治病有4大特点,即未病早知,已病早觉;辨证论治,奥妙无穷;同病异治,异病同治;三因制宜,安全有效。通过整理和阐发,以期进一步把握中医药治疗的特点和优势。

形神统一观及其运用分析

中医形神关系体现了形为神之物质基础、神为形之功能主帅、形神统一的观点。形神统一观集中体现了生命特征的整体性,是中医形神关系的最高境界,在诊断、治则治法、处方用药、养生、新型医患关系中应用广泛,对医者在临证中有重要参考价值。

论国医大师孙光荣临证10种一般辨证元素的临床意义

国医大师孙光荣将一般辨证元素归纳为10种,即时令、男女、长幼、干湿、劳逸、鳏寡、生育、新旧、裕涩、旺晦。具体而言,时令为节气气候情况,是大背景;男女为性别情况,是前提;长幼为年龄情况,是方向;干湿为居住环境,是小背景;劳逸为个人生活状态,是内部原因;鳏寡为婚配情况,是外在原因;生育为孕育情况,是内在因素;新旧为患病情况,是程度因素;裕涩为生活经济情况,是外部条件;旺晦为生活处境情况,是外部诱因。一般辨证元素是中医辨证的前提和基础,分析10种一般辨证元素的关系及临床意义,对于中医诊治疾病有较大参考价值。

论国医大师孙光荣临证10种重要辨证元素的临床意义

孙光荣教授将临证重要辨证元素归纳为10种,即神形、盛衰、阴阳、表里、寒热、虚实、主从、标本、逆顺、生死。重要辨证元素是中医辨证的关键,分析10种重要辨证元素的关系及临床意义,对于中医诊治疾病有极大帮助。

国医大师孙光荣论继承师尊独有的学术经验

孙光荣教授对于如何继承师尊独有的学术经验,有其独到见解,认为中医历来重师承,受其衣钵求其真;侍诊抄方入门径,整理提炼最为珍;探明导师成才路,找准差距阙中寻;德学才识皆须学,非求一方一药灵;临床重在思辨法,从何入手辨诸证;组方用药何特点,习用何典最用心;搜集案例详阐释,形成专著高徒成。