血管平滑肌细胞快速牵张损伤后细胞缝隙连接功能的变化

目的:探讨牵张损伤时血管平滑肌细胞(A7r5)缝隙连接功能的改变及其影响因素。方法:采用细胞牵张损伤装置建立A7r5细胞损伤模型,通过细胞培养、荧光显微镜、共聚焦激光扫描显微镜荧光漂白后恢复技术检测对照组,轻度、中度和重度牵张损伤组细胞活性(Hoechst 33342和propidium iodide染色)、细胞内钙(Fluo_4/AM染色)、细胞内氧自由基(H2D-CFDA染色)和细胞间通讯功能(5_CFDA染色)的变化。结果:随着细胞牵张损伤的加重,细胞活性降低、细胞内钙及细胞内氧自由基升高、细胞间通讯功能下调。含钙缓冲液和细胞间通道阻断剂甘珀酸可使细胞通讯功能进一步下调,而Ca2+鳌合剂———乙二醇四乙酸、氧自由基清除剂———超氧化物歧化酶可使细胞通讯功能上调。结论:牵张损伤可通过细胞内钙超载和活性氧的增多来降低平滑肌细胞缝隙连接的细胞通讯功能。