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不同能量平衡状态下瘦素及瘦素受体在小鼠肝细胞损伤中的作用机制 被引量:1
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作者 李婷 霍泉 +2 位作者 孙东君 路志国 杜勇 《肝胆胰外科杂志》 CAS 2021年第5期298-303,共6页
目的探讨在不同能量平衡状态下瘦素(leptin)及瘦素受体(leptin receptor,LEPR)参与肝细胞损伤的作用机制研究。方法选取4周龄FVB/N雌性小鼠18只,分为3组:Mex3c^(+/-)突变组(文中简称Mex3c^(+/-)组,n=6),HFD组(给予高脂饮食,n=6)和Contro... 目的探讨在不同能量平衡状态下瘦素(leptin)及瘦素受体(leptin receptor,LEPR)参与肝细胞损伤的作用机制研究。方法选取4周龄FVB/N雌性小鼠18只,分为3组:Mex3c^(+/-)突变组(文中简称Mex3c^(+/-)组,n=6),HFD组(给予高脂饮食,n=6)和Control组(给予普通饲料,n=6),全部饲养至14周龄。苏木素-伊红染色观察肝脏组织;RT-PCR检测肝脏组织LEPR的mRNA相对量;Western blotting、免疫组化染色检测肝脏组织leptin、LEPR蛋白表达;ELISA检测三组小鼠血清中可溶性LEPR、ALT、AST、TBIL和DBIL浓度。结果(1)小鼠14周龄体质量:与Control组[(18.20±1.04)g]相比,Mex3c^(+/-)组体质量降低[(15.23±0.57)g,P<0.01],HFD组体质量增加[(21.56±2.56)g,P<0.01]。(2)病理学染色结果:与Control组相比,HFD组肝细胞存在大脂滴,胞质减少;Mex3c^(+/-)组肝细胞内有脂滴。(3)肝脏组织LEPR mRNA表达水平:与Control组(1.01±0.02)比较,Mex3c^(+/-)组LEPR mRNA(1.44±0.30)略升高,但无统计学差异(P>0.05);HFD组LEPR mRNA(1.90±0.37)升高,差异有统计学意义(P<0.05)。(4)肝脏组织leptin、LEPR蛋白表达水平:免疫组化显示,3组肝脏组织leptin蛋白表达水平无统计学差异(P>0.05);与Control组相比,Mex3c^(+/-)组、HFD组均高表达LEPR蛋白(P<0.01)。Western blotting结果显示,3组肝脏leptin蛋白表达水平亦无统计学差异(P>0.05);与Control组[(2011.60±589.07)pg/mL]相比,Mex3c^(+/-)组血清中可溶性LEPR浓度[(1873.62±643.49)pg/mL]略下降,但差异无统计学意义(P>0.05),HFD组明显升高[(7264.33±1640.83)pg/mL,P<0.01]。(5)肝功能:与Control组比,Mex3c^(+/-)组血清ALT、AST水平降低(P<0.05),但TBIL、DBIL水平升高(P<0.05);HFD组血清ALT、AST、TBIL和DBIL水平均升高(P<0.05)。结论在不同能量平衡调节下通过诱导leptin-LEPR信号通路参与肝细胞损伤的过程,在正负能量状态下肝脏组织中LEPR都会有所升高,表明Mex3c^(+/-)诱导的负能量状态和HFD诱导的正能量状态都会对肝细胞产生损伤作用。 展开更多
关键词 Mex3c^(+/-) 高脂饮食 瘦素 瘦素受体 肝细胞损伤
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利用CRISPR/Cas9技术构建Mex3c基因缺陷小鼠模型 被引量:3
2
作者 霍泉 杨玲玲 +2 位作者 孙东君 李婷 杜勇 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期420-424,共5页
目的利用CRISPR/Cas9技术敲除FVB小鼠Mex3c基因,为进行相关研究提供Mex3c基因缺陷小鼠模型。方法利用CRISPR/Cas9基因编辑技术,针对性设计Mex3c基因1~2外显子sgRNA,将小鼠mex3c基因的sgRNA和Cas9 mRNA共注射到受精卵中,产生目标基因敲... 目的利用CRISPR/Cas9技术敲除FVB小鼠Mex3c基因,为进行相关研究提供Mex3c基因缺陷小鼠模型。方法利用CRISPR/Cas9基因编辑技术,针对性设计Mex3c基因1~2外显子sgRNA,将小鼠mex3c基因的sgRNA和Cas9 mRNA共注射到受精卵中,产生目标基因敲除子代,待小鼠出生3周后剪鼠尾提取DNA并进行PCR鉴定,所获F0代杂合小鼠继续与野生型小鼠合笼繁殖获取F1、F2代小鼠,剪取组织提取DNA鉴定分离杂合体小鼠。结果获得了6只Mex3c基因杂合突变的F0代小鼠,F1代共20只雌性杂合小鼠,F2代24只雌性杂合小鼠,能够稳定遗传Mex3c缺陷基因。基因组测序结果显示获得正确敲除的杂合子。结论成功获得Mex3c基因缺陷的FVB小鼠,为研究不同能量代谢条件下的子代鼠胚神经管发生发育提供了重要工具。 展开更多
关键词 CRISPR/Cas9 Mex3c 基因缺陷 FVB小鼠
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Mex3c参与调控小鼠下丘脑Arc、VMH神经核团C-FOS表达的作用 被引量:5
3
作者 霍泉 孙东君 +2 位作者 李婷 孙婷 杜勇 《宁夏医科大学学报》 2020年第6期547-553,共7页
目的探索秀丽隐杆线虫肌肉表达物3(Mex3c)诱导下丘脑神经核团C-FOS蛋白(原癌基因表达产物)表达的作用。方法 8周龄正常和Mex3c-/+小鼠各15只,随机分为正常对照组、正常瘦素组、正常饥饿激素组、Mex3c-/+对照组、Mex3c-/+瘦素组、Mex3c-/... 目的探索秀丽隐杆线虫肌肉表达物3(Mex3c)诱导下丘脑神经核团C-FOS蛋白(原癌基因表达产物)表达的作用。方法 8周龄正常和Mex3c-/+小鼠各15只,随机分为正常对照组、正常瘦素组、正常饥饿激素组、Mex3c-/+对照组、Mex3c-/+瘦素组、Mex3c-/+饥饿激素组,每组5只,Mex3c-/+各组小鼠注射干预及数量同正常一样且均采取腹腔注射。注射2 h后麻醉灌注后取小鼠脑组织,免疫组织化学染色分析下丘脑弓状核(Arc)、腹内侧核(VMH)核团C-FOS蛋白的表达量。结果病理学染色正常小鼠和Mex3c-/+小鼠未见明显差异。免疫组化结果显示,正常对照组小鼠下丘脑Arc、VMH核团中C-FOS蛋白表达量较低,在注射瘦素和饥饿激素2 h后C-FOS的表达量均增加(P<0.05);Mex3c-/+对照小鼠相比正常正常对照小鼠,C-FOS为高表达(P<0.05),与正常瘦素组小鼠差异无统计学意义(P>0.05);给予Mex3c-/+小鼠饥饿激素干预后,C-FOS的表达量下调(P<0.05),正常瘦素组和饥饿激素组与Mex3c-/+对照组和瘦素组之间C-FOS表达量差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论Mex3c可以诱导小鼠下丘脑Arc、VMH核团C-FOS的表达进而参与神经信号转导。 展开更多
关键词 秀丽隐杆线虫肌肉表达物3 C-FOS蛋白 下丘脑 能量平衡
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一体化联合作战卫星地面站支援保障效能指标分析 被引量:2
4
作者 何玉晶 张杰 +1 位作者 霍权 厉剑 《指挥控制与仿真》 2020年第2期70-75,共6页
空间已成为战争新的制高点,一体化联合作战是未来战争基本的作战形式。随着空间信息技术的不断发展,卫星地面站作为一体化联合作战的重要战略支撑,具有更加重要的地位。其支援保障效能是实现一体化联合作战指挥控制的前提,也是提高一体... 空间已成为战争新的制高点,一体化联合作战是未来战争基本的作战形式。随着空间信息技术的不断发展,卫星地面站作为一体化联合作战的重要战略支撑,具有更加重要的地位。其支援保障效能是实现一体化联合作战指挥控制的前提,也是提高一体化联合作战效能的基础。通过研究分析卫星地面站效能指标选取原则,确立了其效能指标为设备可靠性能、数据可用性能、数据传输性能、安全防护性能、系统保障能力五个指标,并对相关指标进行了描述,为卫星地面站的功能研究奠定了基础。 展开更多
关键词 一体化联合作战 卫星地面站 效能分析 可靠性 可用性
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母体肥胖对胚胎神经管发育及线粒体结构和功能的影响
5
作者 路志国 吴晓婷 +5 位作者 霍泉 李婷 鲁瑶 尹荷晴 王凯 杜勇 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期87-95,共9页
目的:研究母体肥胖对胚胎神经管发育及线粒体结构和功能的影响。方法:将16只C57BL/6J雌性小鼠随机分为正常饮食(normal diet,ND)组和高脂饮食(high-fat diet,HFD)组,连续喂食12周后,使雌鼠受孕,于孕14.5 d时进行后续实验。检测小鼠体重... 目的:研究母体肥胖对胚胎神经管发育及线粒体结构和功能的影响。方法:将16只C57BL/6J雌性小鼠随机分为正常饮食(normal diet,ND)组和高脂饮食(high-fat diet,HFD)组,连续喂食12周后,使雌鼠受孕,于孕14.5 d时进行后续实验。检测小鼠体重、血脂,行肝脏HE和油红O染色以判断肥胖模型是否构建成功。HE染色及免疫组化法检测胚胎神经管中nestin的表达来观察其发育情况。Western blot检测nestin、Bax和Bcl-2的蛋白表达水平,透射电镜下观察线粒体超微结构,JC-1荧光探针法检测胚胎神经管线粒体膜电位,萤光素酶法检测ATP含量。结果:HFD组小鼠的体重增量及血清总胆固醇(total cholesterol,TC)、甘油三酯(triglyceride,TG)、高密度脂蛋白胆固醇(high-density lipoprotein cholesterol,HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)均较ND组小鼠显著升高(P<0.01);肝脏HE及油红O染色显示HFD组肝细胞内出现大量脂肪堆积,以上结果表明成功构建肥胖小鼠模型。ND组及HFD组小鼠胚胎神经管HE染色未见明显差异,免疫组化染色及Western blot检测均显示HFD组胚胎神经管nestin蛋白表达水平较ND组显著升高(P<0.01)。透射电镜结果显示,与ND组相比,HFD组小鼠胚胎神经管线粒体水肿、线粒体嵴断裂。此外,HFD组胚胎神经管线粒体膜电位及ATP含量均显著降低(P<0.05)。HFD组Bax/Bcl-2比值显著高于ND组(P<0.01)。结论:高脂饮食诱导的母体肥胖可导致胚胎神经管发育不良,其机制可能与神经管线粒体的结构和功能改变及神经细胞的凋亡增加有关。 展开更多
关键词 母体肥胖 神经管 线粒体 细胞凋亡
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Synthesis of La-Modified Ultra Stable Zeolite L and Its Application to Catalytic Cracking Catalyst 被引量:2
6
作者 Pan Huifang Liu Xingyu +4 位作者 Wei Guoyou Yuan Hailiang Pan Xinghong huo quan Yan Pingxiang 《Petroleum Science》 SCIE CAS CSCD 2007年第2期75-81,共7页
A new type of zeolite La-USL (ultra stable zeolite L (zeolite USL) modified by La), which has superior activity, stability and selectivity in catalytic cracking of hydrocarbons and thus can be used as an active ca... A new type of zeolite La-USL (ultra stable zeolite L (zeolite USL) modified by La), which has superior activity, stability and selectivity in catalytic cracking of hydrocarbons and thus can be used as an active catalyst component, is reported in this paper. The zeolite L with relative crystallinity of above 90% was synthesized by the hydrothermal crystallization method under optimum conditions and characterized by means of XRD, NH3-TPD and isotherm adsorption techniques. The in-situ synthesized zeolite L with a SiO2/Al2O3 mole ratio of 5-6 was modified by cation ion exchange, hydrothermal dealumination and chemical modifications with La in order to prepare La-containing USL with a higher framework SiO2/Al2O3 mole ratio of 15-30. The modified zeolite La-USL was used as an active additive component of fluid catalytic cracking (FCC) catalyst and the resulting catalysts were evaluated by microactivity test (MAT) and fixed-fluidized bed (FFB) experiments using heavy oil as feedstock. The influence of La content in La- USL on cracking product distribution, gasoline group composition and research octane number (RON) was investigated. The results showed that when La content in La-USL was 0.8 wt%, the addition of the corresponding La-USL could result in a FCC catalyst that produced significant improvement in product distribution and gasoline quality. 展开更多
关键词 Zeolite L catalytic cracking catalyst GASOLINE YIELD research octane number heavy oil
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体外神经细胞过表达Mex3C-1对诱导性Fos表达的影响
7
作者 孙东君 霍泉 +3 位作者 李婷 翟思凡 孙婷 杜勇 《宁夏医科大学学报》 2019年第6期551-555,共5页
目的探讨Mex3C-1对卡巴胆碱诱导的Fos表达的影响。方法将具有可持续表达人Mex3C-1序列的质粒pLV-CMV-Mex3C(OE)在HEK293T细胞中包装成慢病毒载体,同时制备非特异性对照(NC)CmiR0001-MR03的慢病毒载体,分别感染人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y... 目的探讨Mex3C-1对卡巴胆碱诱导的Fos表达的影响。方法将具有可持续表达人Mex3C-1序列的质粒pLV-CMV-Mex3C(OE)在HEK293T细胞中包装成慢病毒载体,同时制备非特异性对照(NC)CmiR0001-MR03的慢病毒载体,分别感染人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y,经嘌呤霉素筛选后得到稳定高表达Mex3C-1和阴性对照细胞系,用Real time PCR和Western blot方法检测Mex3C-1的基因和蛋白表达效果。之后用卡巴胆碱诱导Fos表达,在诱导0、30、60、90和120min后分别提取mRNA,采用Real time PCR方法检测Fos mRNA的相对表达量。结果Real time PCR检测结果显示,OE组的Mex3C-1 mRNA的相对表达量(21.11±0.60)高于NC组(1.03±0.13)(t=32.63,P=0.000)。Western blot结果显示,在82kDa处OE组的Mex3C-1蛋白表达量高于NC组(P<0.001)。Real time PCR检测不同干预时间两组Fos mRNA,除0min外各个时间点OE组均高于NC组,表明Mex3C-1的过表达可以明显上调Fos mRNA的表达;NC组于120min时已基本恢复至基础值,而OE组120min时Fos mRNA表达量仍然较高,Mex3C-1过表达可以延长Fos mRNA的半衰期,增强其稳定性,OE组与阴性对照NC组比较,Fos mRNA表达量差异有统计学意义(F=287.069,P=0.000)。结论持续过表达Mex3C-1的人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞系建立成功,且Mex3C-1过表达能够明显增强卡巴胆碱诱导的Fos表达程度并增强其稳定性。 展开更多
关键词 人Mex3C-1 FOS 慢病毒载体 过表达细胞系
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Mex3c参与调控小鼠胚胎神经管发育PAX3、Nestin表达的作用 被引量:1
8
作者 李婷 邢欣然 +3 位作者 路志国 高燕 霍泉 杜勇 《中华小儿外科杂志》 CSCD 北大核心 2021年第6期549-555,共7页
目的探讨秀丽隐杆线虫肌肉表达物3(caenorhabditis elegans muscle excess,Mex3c)参与调控小鼠胚胎神经管发育中的配对盒基因(paired box 3,PAX3)、巢蛋白(Nestin)的表达及其对于神经管发育的影响。方法选取Mex3c+/-和正常野生型小鼠各1... 目的探讨秀丽隐杆线虫肌肉表达物3(caenorhabditis elegans muscle excess,Mex3c)参与调控小鼠胚胎神经管发育中的配对盒基因(paired box 3,PAX3)、巢蛋白(Nestin)的表达及其对于神经管发育的影响。方法选取Mex3c+/-和正常野生型小鼠各18只和正常野生型雄鼠6只(用于繁殖)。在母鼠孕10.5 d、12.5 d、14.5 d时,两组各取6只母鼠获取小鼠胚胎并记录总胚胎数、吸收胎数、存活胎数。免疫组织化学染色及蛋白质印迹法检测小鼠胚胎Nestin、PAX3表达,免疫荧光染色检测PAX3,Tunel染色检测细胞凋亡,HE染色观察形态学变化。总胚胎数、吸收胎数、存活胎数为计数资料采用卡方检测;测定的Nestin蛋白、PAX3蛋白、Mex3c蛋白、细胞凋亡数据检测符合正态分布,进行单因素方差分析及S-N-K两两比较。结果免疫组织化学染色检测母鼠下丘脑Mex3c蛋白表达,Mex3c组(16.52±1.60)较对照组(26.05±2.00)低,且差异有统计学意义(P<0.0001)。各组不同时期吸收胎及总胚胎数差异无统计学意义(P>0.05),表明缺陷Mex3c基因不会导致子代胚胎发育畸形。HE染色结果显示,与对照组相比,Mex3c组神经细胞较小、密度较低。Tunel染色结果显示,Mex3c组孕10.5 d、12.5 d、14.5 d小鼠胚胎神经管内凋亡细胞表达阳性率分别为(12.20±1.30)%、(11.20±0.84)%和(10.00±0.71)%,与对照组的(4.83±1.17)%、(5.17±0.75)%和(7.17±0.75)%比较,差异均有统计学意义(P均<0.01)。免疫组织化学染色结果显示,Nestin蛋白表达在神经纤维,PAX3蛋白表达在细胞核。免疫荧光实验检测PAX3蛋白结果显示,Mex3c组孕12.5 d和孕14.5 d小鼠胚胎PAX3蛋白表达阳性率分别为(9.20±1.30)%和(8.80±1.30)%,与对照组(5.83±0.98)%和(3.67±0.82)%比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。蛋白质印迹法结果显示,Mex3c组孕10.5 d、12.5 d、14.5 d时小鼠胚胎Nestin蛋白表达水平分别为0.06±0.02、0.57±0.09和0.69±0.04,与对照组0.79±0.07、0.39±0.14和0.27±0.07比较,Mex3c组表达呈上升趋势而对照组呈下降趋势,组间不同时间点比较,差异均有统计学意义(P均<0.05或0.001)。Mex3c组孕10.5 d、12.5 d、14.5 d时小鼠胚胎PAX3蛋白表达水平分别为0.17±0.02、0.63±0.09和0.72±0.03,与对照组0.03±0.01、0.46±0.08和0.45±0.06比较,Mex3c组表达呈上升趋势而对照组呈下降趋势,组间不同时间点比较,差异均有统计学意义(P均<0.01或0.001)。结论Mex3c参与调控小鼠胚胎神经管发育中PAX3、Nestin蛋白表达并抑制神经管中神经细胞发育及成熟和促使神经管内细胞凋亡。 展开更多
关键词 神经管 秀丽隐杆线虫肌肉表达物3 配对盒基因家族3 巢蛋白
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能量平衡调节下胎盘瘦素及瘦素受体对脑发育的影响
9
作者 李婷 尹荷晴 +4 位作者 路志国 霍泉 柳琪 苏泽礼 杜勇 《中华实验外科杂志》 CAS 北大核心 2022年第12期2400-2403,共4页
目的:探讨不同能量平衡对胎盘瘦素(leptin)及瘦素受体(leptin receptor,LEPR)表达和脑发育中巢蛋白(nestin)、胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)表达的影响。方法:选取FVB/N(宁夏医科大学动物中心)雌性小鼠54只... 目的:探讨不同能量平衡对胎盘瘦素(leptin)及瘦素受体(leptin receptor,LEPR)表达和脑发育中巢蛋白(nestin)、胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)表达的影响。方法:选取FVB/N(宁夏医科大学动物中心)雌性小鼠54只利用随机数字表分为3组:秀丽隐杆线虫肌肉表达物3组(Mex3c),高脂饮食组(HFD)和对照组(给予普通饲料)全部饲养至14周龄,各18只。在母鼠孕10.5、12.5、14.5 d时获取实验标本。苏木精-伊红(HE)染色观察孕12.5 d、孕14.5 d的胚胎脑部形态学变化,免疫组织化学实验(IH)检测孕14.5 d胚胎前脑、中脑、小脑内nestin表达,蛋白质印迹法(Western blot)检测孕14.5 d胚胎脑部nestin、GFAP表达和孕10.5 d、孕12.5 d、孕14.5 d的胎盘组织内leptin、LEPR表达。组间比较单因素方差分析。结果:HE结果12.5 d及14.5 d的对照组、Mex3c组、HFD组鼠胚胎形态学染色未见明显不同但对照组左右脑比Mex3c组、HFD组发育完全。Western blot结果,胎盘孕10.5 d、孕12.5 d、孕14.5 d时对照组leptin蛋白(0.43±0.13)、(0.64±0.23)、(0.67±0.18)高于Mex3c组(0.04±0.02,t=7.91,P<0.01)、(0.07±0.01,t=8.49,P<0.01)、(0.18±0.07,t=9.03,P<0.01)和HFD组(0.06±0.02,t=7.05,P<0.01)、(0.09±0.03,t=8.10,P<0.01)、(0.30±0.14,t=5.83,P<0.01)。胎盘孕10.5 d、孕12.5 d、孕14.5 d时对照组LEPR蛋白高于(0.36±0.03)、(0.60±0.13)、(0.34±0.12)Mex3c组(0.10±0.02,t=17.72,P<0.01)、(0.15±0.03,t=13.17,P<0.01)、(0.21±0.05,t=4.98,P<0.01)和HFD组(0.09±0.04,t=12.35,P<0.01)、(0.20±0.06,t=11.01,P<0.01)、(0.18±0.04,t=5.94,P<0.01)。IH结果nestin表达在神经纤维上;Western blot结果对照组孕14.5 d的nestin蛋白表达(0.15±0.31)低于Mex3c组(0.56±0.09,t=13.96,P<0.01)和HFD组(0.52±0.14,t=8.71,P<0.01)表达;对照组孕14.5 d的GFAP蛋白表达(0.38±0.06)高于Mex3c组(0.13±0.02,t=15.10,P<0.01)和HFD组(0.08±0.03,t=17.99,P<0.01)。结论:正负能量平衡通过抑制小鼠胎盘leptin、LEPR表达进而诱导小鼠脑部高表达nestin抑制GFAP表达可能影响脑发育及成熟。 展开更多
关键词 能量平衡 瘦素 瘦素受体 秀丽隐杆线虫肌肉表达物3 胚胎发育
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Mex3c基因敲除对小鼠胚胎神经管发育及线粒体凋亡的影响
10
作者 路志国 霍泉 +5 位作者 吴晓婷 李婷 鲁瑶 尹荷晴 张卓阳 杜勇 《中华小儿外科杂志》 CSCD 北大核心 2022年第2期164-169,共6页
目的研究秀丽隐杆线虫肌肉表达物3(caenorhabditis elegans muscle excess,Mex3c)基因敲除对胚胎神经管发育及其线粒体凋亡相关蛋白的影响。方法利用聚合酶链式反应(PCR)法鉴定小鼠基因型,根据鉴定结果将雌鼠分为Mex3c+/+(WT组)与Mex3c-... 目的研究秀丽隐杆线虫肌肉表达物3(caenorhabditis elegans muscle excess,Mex3c)基因敲除对胚胎神经管发育及其线粒体凋亡相关蛋白的影响。方法利用聚合酶链式反应(PCR)法鉴定小鼠基因型,根据鉴定结果将雌鼠分为Mex3c+/+(WT组)与Mex3c-/-(KO组),按随机数字表法每组选取10只,另选鉴定好的Mex3c+/+雄鼠10只用于繁殖,获取第14.5 d胚胎。HE染色观察胚胎神经管的形态变化,免疫组织化学及蛋白质印迹法检测nestin蛋白表达水平;透射电镜观察胚胎神经管及其线粒体的超微结构,JC-1检测线粒体膜电位的变化,荧光素酶法测定线粒体ATP含量;Tunel染色检测胚胎神经细胞的凋亡情况,蛋白质印迹法检测Bax、Bcl-2蛋白表达。测定的线粒体膜电位、ATP含量、nestin蛋白、Bax蛋白、Bcl-2蛋白、tunel阳性细胞数均符合正态分布,进行两样本t检验。结果HE染色结果显示与WT组相比,KO组胚胎神经管的神经细胞密度较低。免疫组织化学结果显示,WT组及KO组nestin蛋白的相对表达量分别为16.40±0.61和11.84±0.61,组间差异有统计学意义(P<0.001);蛋白质印迹法检测结果显示,WT组及KO组nestin蛋白的相对表达量分别为0.84±0.35和0.65±0.20,组间差异有统计学意义(P<0.01)。透射电镜下可见两组神经管中神经元细胞突触前、后膜均清晰,但KO组突触间隙消失有一定程度融合,神经管发育具有明显的缺陷;而KO组胚胎神经管线粒体水肿,线粒体嵴断裂、模糊甚至消失。JC-1荧光探针检测结果显示,KO组线粒体膜电位为32939.00±1173.35较WT组的45133.67±3799.31下降,组间差异有统计学意义(P<0.01)。ATP含量检测显示,KO组(0.48±0.35)μmol/L较WT组(0.65±0.36)μmol/L下降,组间差异有统计学意义(P<0.01)。Tunel染色结果显示,KO组tunel阳性细胞数(88.33±14.57)个比WT组(46.67±6.80)个明显增多,组间差异有统计学意义(P<0.05)。蛋白质印迹法检测Bax/Bcl-2比值结果显示,KO组1.44±0.12高于WT组0.90±0.42,组间差异有统计学意义(P<0.01)。结论Mex3c基因敲除会引起小鼠胚胎神经管发育障碍及线粒体凋亡增加。 展开更多
关键词 小鼠 Mex3c基因 神经管 胚胎 线粒体 凋亡
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