黄芪多糖对HD11鸡巨噬细胞转录组和代谢组的影响

旨在通过分析黄芪多糖对鸡巨噬细胞HD11转录组和代谢组的作用,探讨黄芪多糖(Astragalus polysaccharide, APS)对鸡巨噬细胞HD11的免疫调节机制。设置空白对照组(CONT组)和APS处理组(A50组),其中,A50组用含50μg·mL^(-1)APS的完全培养液培养HD11细胞12 h;CONT组用完全培养液培养HD11细胞12 h。采用代谢组学与转录组学技术分析CONT组与A50处理组细胞中差异基因和差异代谢物,并进行2个组学的联合分析。结果显示:在A50处理组与CONT组的转录组分析比较中,共检测到差异基因845个,其中上调基因415个,下调基因430个;差异表达基因主要富集在细胞因子-细胞因子受体相互作用、Toll样受体信号通路、吞噬体、AGE-RAGE等信号通路,其中,细胞因子-细胞因子受体相互作用、Toll样受体信号2条通路最为显著性;在A50处理组与CONT组的代谢组分析比较中,共筛选出差异代谢物89个,其中,下调差异代谢物为70个,上调的差异代谢物为19个。在A50处理组与CONT组的转录与代谢组联合分析中共同富集到可信度排名前十的通路有嘌呤代谢、碳代谢、磷酸戊糖途径、谷胱甘肽代谢、组氨酸代谢、氨基糖和核苷酸糖代谢、α同亚麻酸代谢、ABC转运体、铁死亡和酪氨酸代谢。APS可能是通过TLR2受体信号通路、糖酵解和磷酸戊糖途径的代谢重编程,进而发挥对HD11细胞的免疫调节作用。

黄芪多糖对鸡巨噬细胞HD11的免疫调节作用研究

调节巨噬细胞的活化是增强畜禽免疫力的有效方法。黄芪多糖(APS)作为免疫增强剂,在临床被广泛应用,但有关其对家禽巨噬细胞的调节作用机制鲜有报道。本研究用APS诱导鸡巨噬细胞HD1112 h,评价其对HD11细胞的免疫调节作用。通过CCK-8法检测细胞增殖活力;用台盼蓝检测细胞的活率;采用Griess试剂法检测细胞中NO含量;采用RT-PCR法检测细胞中细胞因子、TLRs和NF-κB p65的mRNA表达水平。结果表明,25~400μg/mL APS对鸡巨噬细胞HD11无毒性作用,能显著促进细胞增殖(P<0.05),且APS组(除400μg/mL)与LPS组无显著性差异(P>0.05)。CCK-8检测显示,50~200μg/mL APS能显著提高细胞中NO含量(P<0.05)及炎性因子IL-8和IL-10转录水平(P<0.05),且呈一定的剂量依赖性,200μg/mL APS还能显著提高炎性因子IL-1β和IL-6转录水平(P<0.05),但均对TNF-α无显著性影响(P>0.05)。此外,50~200μg/mL APS对TLR2基因表达有显著的抑制作用(P<0.05),100~200μg/mL APS对TLR4基因表达有显著的抑制作用(P<0.05),表明TLR2对APS更敏感,但200μg/mL APS能提高NF-κB p65的转录水平(P<0.05)。这些结果表明黄芪多糖作为一种免疫调节剂对鸡巨噬细胞有免疫增强作用,并表现出不同的剂量依赖效应。