高效Bt抗虫基因表达结构的构建及其在转基因烟草中表达行为的研究

构建了高效植物表达载体ｐ Ｂｉｎ Ｍｏ Ｂｃ ，其携带有超强表达复合启动子 Ｏ Ｍ 及Ω因子控制下的 Ｃｒｙ Ｉ Ａ（ｃ） 基因，作为对照，本实验构建了含有 Ｃａ Ｍ Ｖ３５ Ｓ 启动子控制下的 Ｃｒｙ Ｉ Ａ（ｃ）基因的植物表达载体ｐ Ｂｉｎｏ Ｂｃ 。分别使用两个植物表达载体转化烟草， Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ 检测表明，在ｐ Ｂｉｎ Ｍｏ Ｂｃ 转基因烟草中 Ｃｒｙ Ｉ Ａ（ｃ） 基因的平均表达水平是ｐ Ｂｉｎｏ Ｂｃ 的２４４ 倍，最高可达可溶蛋白的０２５５ ％ 。抗虫检测结果表明，ｐ Ｂｉｎ Ｍｏ Ｂｃ 转基因烟草与ｐ Ｂｉｎｏ Ｂｃ 转基因烟草相比，具有更强的抗棉铃虫效果。上述结果表明， Ｏ Ｍ 启动子比 Ｃａ Ｍ Ｖ ３５ Ｓ 启动子更具有实际应用价值，此结果在植物抗虫基因工程研究中具有重要意义。

5-氮胞苷介导的转基因cry1Ab的阶段复活及其对水稻的生物学效应

用不同浓度的 5 -氮胞苷溶液配合不同时间处理了发生在转录水平的转基因 cry1Ab沉默水稻。结果表明 ,5 -氮胞苷处理能使 8%～ 30 %转基因水稻植株的转基因 cry1Ab恢复表达活性 ,复活转基因表达的 Cry1Ab蛋白含量最高可达0 .147% ,45 mg/L 5 -氮胞苷处理 1d可使转基因 cry1Ab的复活率及 Cry1Ab蛋白含量达最高。同时 ,5 -氮胞苷处理使转基因水稻植株出现矮化 ,分蘖数、单株粒重下降 ,穗长减小及开花期延迟等发育异常现象。 5