Roscovitine对C型尼曼-皮克病小鼠球状神经轴突形成的影响

目的探讨细胞周期依赖性蛋白激酶抑制剂roscovitine对C型尼曼-皮克病(NPC)小鼠(npc-/-)球状神经轴突形成的影响。方法采用不同浓度的roscovitine(72,144,300 and 600nmoles/day)对5.5周龄的npc-/-小鼠进行两周侧脑室灌注,以DMSO灌注的同龄npc-/-小鼠为对照。抗非磷酸化神经细丝蛋白抗体SMI32和抗有丝分裂期磷酸化表位抗体MPM-2免疫染色检测小鼠脑内球状神经轴突的数量,Western blot检测细胞骨架蛋白磷酸化程度的变化。结果Roscovitine组球状神经轴突数量较DMSO组显著减少,神经细丝和tau蛋白的过度磷酸化程度较对照组明显下降(P<0.05)。结论细胞周期依赖性蛋白激酶抑制剂能明显改善NPC的神经元细胞骨架损害。

14-3-3蛋白与阿尔茨海默病tau蛋白异常磷酸化的关系

目的研究阿尔茨海默病(Alzheimerdisease,AD)患者海马组织1433蛋白家族与神经原纤维缠结(NFT)形成及tau蛋白异常磷酸化之间的关系。方法以4例临床及病理确诊的AD患者及4名对照者海马组织为材料,用免疫组织化学、免疫印迹及免疫共沉淀技术来研究1433蛋白在AD患者海马的表达情况及其与异常磷酸化tau蛋白之间的关系。结果1433蛋白ζ及γ亚型能使AD患者海马的NFT显色,β亚型主要使海马的颗粒神经元着色,同时也使少许NFT染色。免疫印迹显示β和ζ亚型在AD中明显上调,其像素值(分别为4570±92和5630±40)比对照组(分别为1849±65和956±140)高2～3倍(P<0.01,t检验)。免疫共沉淀分析发现单抗双螺旋细丝(PHF1)从AD患者脑中沉淀的1433蛋白像素值(3859±78)显著多于对照组(1540±138,AD组像素值比对照组高1倍,P<0.05,t检验),这3种亚型均与异常磷酸化tau蛋白在AD患者脑部形成复合物。σ亚型在AD患者和对照组脑中均无表达。上述发现在4名对照者脑组织中并未观察到。结论β、ζ及γ亚型1433蛋白参与NFT形成,它们均可能参与tau蛋白的磷酸化调节,具体机制有待阐明。

C型Niemann-Pick病神经原纤维缠结的形成与特征

目的探讨C型尼曼-皮克病（NPC）脑部神经原纤维缠结（NFT）形成的时相特征。方法以17例年龄7个月至55岁的NPC患者为研究对象，采用tau蛋白和有丝分裂期相关抗体进行免疫组织化学染色和银染，分析患者脑内NFT形成的特点。结果最早可在4岁的患者海马旁回发现典型的NFT形成，随年龄增长数量逐渐增多。在形态上与阿尔茨海默病（AD）所见高度相似，但未发现老年斑。在NPC中，有丝分裂期磷酸化表位早于tau蛋白过度磷酸化及NFT形成。结论NFT形成并非老龄化过程的结果，且与老年斑的存在与否并无关联。cdc2／cyclinB1可能是NFT形成的关键性早期事件，针对其活性的抑制剂对于早期干预NPC NFT的形成有重要意义。

Roscovitine对C型尼曼-皮克病小鼠的神经保护作用

目的观察细胞周期依赖性蛋白激酶特异性抑制剂Roscovitine对C型尼曼-皮克病(NPC)小鼠(npc-/-)的治疗作用.方法采用72、144、300和600 nmol/d的Roscovitine对5周龄的npc-/-小鼠(n=6～10)进行2周侧脑室灌注,以DMSO灌注的同龄npc-/-小鼠(n=6～10)为对照;采用免疫组织化学染色、H & E染色和小鼠衣架悬挂试验来进行检测.结果Roscovitine能显著减少球状轴突的数量,延缓浦肯野细胞的死亡并改善npc-/-小鼠的运动功能.结论Roscovitine对NPC的神经系统变性有一定的保护作用.