趋化因子LD78β和MCP-3的抗肿瘤效果和诱导的免疫反应

[目的]比较趋化因子LD78β和MCP-3的抗肿瘤效果和诱导的免疫反应。[方法]共转染法制备含趋化因子LD78β和MCP-3的重组细小病毒。用重组细小病毒体外感染鼠胶质瘤GL261细胞,接种于免疫功能健全的C57BL/6小鼠和免疫缺陷的裸鼠皮下,观察肿瘤生长情况。RT-PCR方法检测感染后3天细胞外源基因表达情况。[结果]感染了重组病毒的GL261细胞扩增出了病毒特异性的NS基因。转导了MCP-3和LD78β的细胞还扩增出特异性趋化因子基因片段。间接体内实验结果表明LD78β转导可明显抑制GL261肿瘤在C57BL/6小鼠体内的生长,但对裸鼠体内的生长没有作用。而MCP-3转导既可抑制肿瘤在C57BL/6小鼠体内的生长,也可抑制肿瘤在裸鼠体内的生长。[结论]LD78β和MCP-3均可降低GL261细胞在C57BL/6小鼠体内的致瘤性,MCP-3还可以抑制GL261细胞在裸鼠体内的生长。提示两者诱导的免疫反应机制不同,LD78β对GL261肿瘤生长的抑制作用可能是由特异性免疫反应介导的,而MCP-3诱导的是由非特异性免疫。

重组细小病毒对胶质瘤细胞的生长抑制作用

[目的]研究表达趋化因子MIP-1α/LD78β的重组细小病毒对胶质瘤细胞的生长抑制作用。[方法]共转染法制备重组病毒。用重组病毒感染人胶质瘤细胞系U87MG以及鼠胶质瘤细胞系GL261,监测细胞生长并用ELISA方法测定细胞培养上清中MIP-1α蛋白每日和累积表达量。克隆形成实验测定病毒的细胞毒性。[结果]与未处理的细胞相比,MOI=3RU/cell的重组病毒感染使GL261细胞克隆形成减少。U87MG和GL261细胞感染重组病毒后均可产生大量MIP-1α蛋白。日表达量的高峰分别出现在感染后第3d和第4d。2×105的GL261和U87MG细胞在感染(MOI=3)5d后累积蛋白表达量分别为780ng/ml和250ng/ml。和对照相比,重组病毒感染的GL261细胞生长减慢,但表达MIP-1α或LD78β的重组病毒与不含外源基因的重组病毒感染GL261后,活细胞数目没有明显差异。U87MG对病毒的敏感性低于GL261,感染重组病毒的各组细胞生长比对照略缓慢。[结论]重组细小病毒在体外对U87MG和GL261胶质瘤细胞的生长有抑制作用,但转导外源基因MIP-1α/LD78β在体外对细胞生长无明显影响,抑制作用主要是由于病毒的细胞毒性引起。