应用CelliGen细胞罐高密度培养抗人B血型杂交瘤细胞条件的研究

应用CelliGen细胞培养罐,培养抗人B血型杂交瘤细胞,获得了细胞密度超过10~7/ml,产物IgM 2g/L以上,特异性血凝效价达到2^(13)～2^(15)。培养条件50～80r/min、pH7.2、溶解氧(DO)30％～50％,高密度时维持DO2％～10％是必要的,4种气体混合流量为0.2LPM,高密度时要增加氧气供应,细胞密度达到1.6×10~6/ml时开始灌注,随细胞密度增加,灌注量亦增加,每天补充新培养液由800ml逐渐增加到3000ml。13B1杂交瘤细胞生长代谢与葡萄糖、乳酸有关,与氨代谢无关。

抗人A血型杂交瘤细胞高密度培养条件的研究

抗人 A 血型杂交瘤15B_4细胞在 CelliGen 细胞培养罐中进行连续灌注培养,细胞密度达1.6×10~7/ml。每天灌注新培养液量由1000ml 增到2300ml,第14天后又逐日减少至1000ml,死细胞数随着转速的增加和灌注量的减少而增多。血凝效价呈梯度上升,滴度达到2^(14),相当于腹水效价。培养6天 IgM 产量为0.2克/升/天,10～18天波动在1.45～1.8克/升/天。15B_4细胞代谢与葡萄糖、乳酸有关,与氨无关。CelliGen 自控效果较好,适用于杂交瘤细胞的高密度培养。搅拌速度在120～150r/min 对细胞产生的剪切力有明显地破坏作用。溶氧控制系统有待改进。