funded by the program supported by the National Key Technologies R&D Program of China during the 11th Five-Year Plan period (2009BADA8B02);the Fundamental Research Funds for the Central Universities, China (KYZ201...funded by the program supported by the National Key Technologies R&D Program of China during the 11th Five-Year Plan period (2009BADA8B02);the Fundamental Research Funds for the Central Universities, China (KYZ201202-3)展开更多
目的胃癌放疗抵抗是绝大多数胃癌患者在治疗过程中所面临的一大难题,探讨其关键基因靶点与潜在机制,对指导临床胃癌患者放射治疗及预后分析有着深远意义。本研究旨在分析丝裂原活化蛋白激酶14(mitogen-activated protein kinase 14,MAPK...目的胃癌放疗抵抗是绝大多数胃癌患者在治疗过程中所面临的一大难题,探讨其关键基因靶点与潜在机制,对指导临床胃癌患者放射治疗及预后分析有着深远意义。本研究旨在分析丝裂原活化蛋白激酶14(mitogen-activated protein kinase 14,MAPK14)在胃癌放疗抵抗患者及胃癌放疗抵抗细胞株中的表达,探究其在胃癌放疗抵抗中的潜在作用。方法采用the Cancer Genome Atlas(TCGA)数据库获得416例胃癌患者MAPK14的mRNA表达水平,Kaplan Meier生存曲线分析MAPK14表达与胃癌患者生存的关联性;建立胃癌放疗抵抗细胞株(放抗株)SGC-7901-R,通过克隆形成实验鉴定其放射线抗性,流式细胞术检测其细胞凋亡、细胞周期改变,蛋白质印迹分析放疗抵抗细胞株(放抗株)SGC-7901-R与亲本胃癌细胞株SGC-7901的MAPK14蛋白表达差异;免疫组化技术验证胃癌放疗抵抗患者与胃癌放疗敏感患者的MAPK14蛋白表达差异。结果 Kaplan-Meier生存曲线分析显示,MAPK14低表达组患者的总生存期优于MAPK14高表达组,中位生存期分别为57.39和19.32个月,两者的预后差异有统计学意义(χ2=14.96,P=0.000 1)。克隆形成实验表明,在4Gy放射线的作用下,放抗株SGC-7901-R的克隆形成能力高于亲本胃癌细胞株SGC-7901,差异有统计学意义,t=41.99,P<0.001。流式检测显示,经4Gy放射线处理后,SGC-7901-R的细胞凋亡率低于SGC-7901细胞,差异有统计学意义,t=8.88,P=0.000 9;与SGC-7901细胞相比,SGC-7901-R的细胞周期阻滞在G2/M期,差异有统计学意义,t=3.011,P=0.039 5。蛋白质印迹结果证实,放抗株SGC-7901-R的MAPK14蛋白表达量高于亲本SGC-7901细胞(1.09±0.07 vs 0.59±0.11),差异有统计学意义,t=3.869,P=0.018。免疫组化结果显示,与胃癌放疗敏感患者相比,胃癌放疗抵抗患者肿瘤组织中MAPK14蛋白表达水平上调,差异有统计学意义,t=26.27,P<0.001。结论 MAPK14异常高表达介导胃癌放疗抵抗且与胃癌患者不良预后相关,其潜在机制与MAPK14影响肿瘤细胞凋亡及细胞周期再分布有关。展开更多
基金funded by the program supported by the National Key Technologies R&D Program of China during the 11th Five-Year Plan period (2009BADA8B02)the Fundamental Research Funds for the Central Universities, China (KYZ201202-3)
文摘funded by the program supported by the National Key Technologies R&D Program of China during the 11th Five-Year Plan period (2009BADA8B02);the Fundamental Research Funds for the Central Universities, China (KYZ201202-3)
文摘目的胃癌放疗抵抗是绝大多数胃癌患者在治疗过程中所面临的一大难题,探讨其关键基因靶点与潜在机制,对指导临床胃癌患者放射治疗及预后分析有着深远意义。本研究旨在分析丝裂原活化蛋白激酶14(mitogen-activated protein kinase 14,MAPK14)在胃癌放疗抵抗患者及胃癌放疗抵抗细胞株中的表达,探究其在胃癌放疗抵抗中的潜在作用。方法采用the Cancer Genome Atlas(TCGA)数据库获得416例胃癌患者MAPK14的mRNA表达水平,Kaplan Meier生存曲线分析MAPK14表达与胃癌患者生存的关联性;建立胃癌放疗抵抗细胞株(放抗株)SGC-7901-R,通过克隆形成实验鉴定其放射线抗性,流式细胞术检测其细胞凋亡、细胞周期改变,蛋白质印迹分析放疗抵抗细胞株(放抗株)SGC-7901-R与亲本胃癌细胞株SGC-7901的MAPK14蛋白表达差异;免疫组化技术验证胃癌放疗抵抗患者与胃癌放疗敏感患者的MAPK14蛋白表达差异。结果 Kaplan-Meier生存曲线分析显示,MAPK14低表达组患者的总生存期优于MAPK14高表达组,中位生存期分别为57.39和19.32个月,两者的预后差异有统计学意义(χ2=14.96,P=0.000 1)。克隆形成实验表明,在4Gy放射线的作用下,放抗株SGC-7901-R的克隆形成能力高于亲本胃癌细胞株SGC-7901,差异有统计学意义,t=41.99,P<0.001。流式检测显示,经4Gy放射线处理后,SGC-7901-R的细胞凋亡率低于SGC-7901细胞,差异有统计学意义,t=8.88,P=0.000 9;与SGC-7901细胞相比,SGC-7901-R的细胞周期阻滞在G2/M期,差异有统计学意义,t=3.011,P=0.039 5。蛋白质印迹结果证实,放抗株SGC-7901-R的MAPK14蛋白表达量高于亲本SGC-7901细胞(1.09±0.07 vs 0.59±0.11),差异有统计学意义,t=3.869,P=0.018。免疫组化结果显示,与胃癌放疗敏感患者相比,胃癌放疗抵抗患者肿瘤组织中MAPK14蛋白表达水平上调,差异有统计学意义,t=26.27,P<0.001。结论 MAPK14异常高表达介导胃癌放疗抵抗且与胃癌患者不良预后相关,其潜在机制与MAPK14影响肿瘤细胞凋亡及细胞周期再分布有关。