HIV-1感染者外周血单个核细胞缺损病毒基因的研究

目的 :研究HIV 1感染者缺损HIV 1DNA的特性。方法 :用长片段PCR法 (LD PCR)研究分析HIV 1感染者外周血单个核细胞 (peripheralbloodmononuclear,PBMCs)和体外培养感染淋巴细胞中HIV 1基因特征 ,使用位于HIV 1DNA链两端的LTR(U5 )、LTR(R)为引物 ,插入有全长HIV 1基因片段的大肠杆菌质粒PNL4 3等为标准对照 ,并对部分标本克隆测序。结果 :经扩增 9.1kb是LD PCR的主要产物 ,但在 10例HIV 1感染者中有 9例PBMCs检测出大小不一、范围较广的缺失HIV 1基因片段 ,经用基因探针杂交 ,发现近HIV 1基因中心部位缺失频率增加 ,缺失结合点常存在 3～ 4个核苷酸短片段直接重复 ,体外培养中HIV 1基因缺损量减少 ,完整和缺失基因的存在与培养中病毒分离的时间密切相关。结论 :HIV 1感染者PBMCs中存在大量HIV

HIV-1感染无进展与进展者HIV DNA存在状态的研究

目的 研究人类免疫缺陷病毒 1型 (HIV 1)感染无进展与进展者HIVDNA存在状态的特点。方法 选用位于HIV 1DNA链两端的LTR(U5 )、LTR(R)等其他部位的不同引物 ,应用国际上新颖的长片段聚合酶链反应 (LD PCR)及逆转录PCR(RT PCR) ,普通PCR(Taq PCR)、免疫转印、分子杂交等技术 ,对HIV 1感染者血清HIVRNA、外周血单个核细胞 (PBMC)HIVDNA进行检测。结果 9.1kb为全长HIVDNA基因片段 ,12例进展者全部存在全长HIV基因片段 ,其中 ,9例存在不完整缺损的HIVDNA ;在 18例无进展者中 ,5例既存在完整又存在不完整的HIVDNA ,其余13例只存在不完整、缺损的HIVDNA。