慢病毒载体大规模生产技术的探究

为改进慢病毒载体生产过程中规模小、生产量不足以及滴度偏低等问题,采用悬浮培养293FT细胞方式,从培养基选择、细胞接种密度、质粒用量等方面对慢病毒包装条件进行优化,通过电击转染并结合生物反应器扩大生产,用离子交换色谱进行纯化以实现慢病毒大规模生产。结果显示以国产培养基M1进行前期细胞扩增培养,用3.75μg/mL质粒电击转染293FT细胞,转染后以2.0×10^(6)/m L的密度接种在优化的2 L生物反应器,用M2培养基培养,最终获得的慢病毒载体滴度达到1.8×10^(12)TU/mL。表明本团队研究的慢病毒载体大规模生产技术可以实现单批次、高滴度、无菌性慢病毒载体的生产,从而为满足临床试验与临床治疗提供基础和保障。

稀土铈基材料在机动车尾气催化消除中的研究进展

机动车尾气污染物造成了严重的生态环境问题,而催化净化是控制尾气排放、减少污染最有效的手段.铈基材料具有优良的储释氧性能和氧化还原能力,是机动车尾气催化消除领域必不可少的组分之一.自上世纪七十年代被用于催化消除机动车尾气以来,铈基催化材料得到了广泛关注和研究.对铈基材料在尾气催化消除领域所起到的作用进行梳理,有助于对现有催化剂进行结构优化,同时能够将铈基材料的应用范围扩大到相关领域.本文对铈基材料在机动车催化后处理不同环节中的研究和应用进行了归纳,并对其在机动车尾气后处理过程中的反应过程进行了总结.最后,基于尾气处理行业的发展前景,本文对铈基催化材料未来的发展方向提出了展望.

靶向PD-1的shRNA慢病毒载体的构建

目的:设计以PD-1基因为靶点的短发夹状RNA(shRNA),构建重组慢病毒载体,鉴定此RNA干扰系列对PD-1基因表达的影响,从设计序列中筛选高(>90%)干扰效率的靶点序列(PD694/791)。方法:设计合成3种PD-1的shRNA干扰序列,与LV3载体连接,进行阳性鉴定,通过免疫印迹法(western)和阳性细胞数量检测筛选高干扰效率靶序列。结果:基于转染目的细胞的PD-1蛋白western检测结果,计算三种shRNA慢病毒载体的干扰效率分别为:PD791干扰效率为78%、PD 238干扰效率为8%、PD 694干扰效率88%。结论:成功构建靶向PD-1的shRNA慢病毒载体,其中干涉片段PD694和PD791对PD-1的干涉抑制效果显著,可以有效抑制原代T细胞PD-1表达,为研究开发PD-1抑制剂治疗肿瘤奠定基础。

铜分子筛涂覆颗粒捕集催化剂的实验研究

针对柴油催化氧化系统(diesel oxidation catalyst,DOC)、颗粒捕集器(diesel particulate filter,DPF)、选择性催化还原(selective catalytic reduction,SCR)系统应用于轻型车时面临的催化剂布置困难和SCR催化剂温度低等问题,将SCR催化剂涂覆到DPF载体(简称SDPF),实现NO_(x)减排和PM捕集功能,同时可显著减小后处理催化剂的体积。分别考察SDPF在200、300和400℃时不同碳烟加载量下的台架测试背压,测试结果表明SDPF催化剂加载碳烟在0~4.0 g/L范围内背压增长显著,在4.0~6.0 g/L范围内背压增长不明显。选取体积类似的SDPF和SCR催化剂进行新鲜态NO_(x)转化性能对比测试,测试结果表明:SDPF催化剂仅需相同体积SCR催化剂约2/3的涂覆量即可达到相当的NO_(x)转化能力,碳烟加载主要影响230℃以下的低温段NO_(x)转化。SDPF载体积炭量达到6.0 g/L后进行快速升温,以测试催化剂的积炭再生性能。测试结果表明:SDPF积炭再生时高温区域集中在出气端中心区域,可探测最高温度低于650℃,较充分的碳烟再生时间应大于15 min。

寿仙谷牌铁皮石斛含片增强免疫力功能的药效学研究

通过小鼠淋巴细胞转化试验、SRBC诱导小鼠DTH实验、抗体生成细胞检测、小鼠血清溶血素的测定、小鼠碳廓清试验、小鼠腹腔巨噬细胞吞噬CRBC试验、NK细胞活性测定、脏器/体重比值,研究寿仙谷牌铁皮石斛含片对实验小鼠免疫力的影响.结果发现:与阴性对照组比较,中、高剂量组小鼠左后足部24h与0h厚度差值均增加、空斑数增多、腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬指数均增加.有此得出结论:寿仙谷牌铁皮石斛含片具有增强实验小鼠免疫力功能.

华龙一号活化腐蚀产物沉积源项评估

根据国内外核电厂主管道上沉积源项的运行经验数据,分析了两种主要核素Co-58和Co-60的沉积活度随电厂运行时间的变化趋势。在此基础上,采用一回路活化腐蚀产物源项计算软件预估了华龙一号的活化腐蚀产物沉积源项。在参考国内广泛运行的M310机型设计源项确定方法的基础上,分析给出了华龙一号活化腐蚀产物沉积源项的设计源项和现实源项,并与国内二代核电机组和国际三代核电机组进行对比,结果显示三者均处于同一量级水平,华龙一号与国际三代核电机组相差不大,且优于国内二代核电机组。分析结果显示本文预估的沉积源项具有一定的可靠性,华龙一号核电机组在活化腐蚀产物源项控制方面具有一定的先进性。

靶向肿瘤细胞PD-L1的shRNA慢病毒干扰载体的构建

目的:利用RNAi技术构建靶向抑制肿瘤细胞PD-L1表达的shRNA慢病毒干扰载体,用于解除肿瘤细胞的免疫逃逸机制。方法:利用Designer3.0(Genepharma)软件以PD-L1为靶点设计4种shRNA基因序列,将shRNA序列插入到慢病毒载体中,连接产物转化后在选择性培养基上筛选阳性菌落并提取重组质粒,进行双酶切及测序鉴定,荧光显微镜观察慢病毒转染效果,westernblot对目的基因PD-L1四个靶点筛选获得PD-L1蛋白表达并计算出重组慢病毒的干扰效率。结果:限制性核酸内切酶Xba I和Nhe I双切鉴定结果皆为1000 bp大小的阳性重组载体;测序结果与shRNA模版一致;荧光显微镜观察结果显示慢病毒转染效果较好;western blot结果显示SH1、SH4组PD-L1表达无抑制,SH2、SH3组PD-L1表达有抑制;SH1组干扰效率19.75%,SH2组干扰效率32.10%,SH3组干扰效率40.74%,SH4组干扰效率7.41%。讨论:SH3组重组慢病毒对PD-L1表达有抑制作用且干扰效率最高,成功构建了一款靶向肿瘤细胞PD-L1的shRNA慢病毒干扰载体,为利用RNAi技术干扰PD-L1靶点的肿瘤免疫治疗奠定了实验基础。

福清核电2014—2018年职业照射剂量分析

分析了福清核电2014—2018年职业照射剂量监测数据,评价福清核电职业照射剂量状况,根据分析结果提出有针对性的辐射防护控制建议和措施,为福清核电提升辐射防护最优化水平提供参考。

Correlative Measurements of Fission Fragments and Light Particles（α，p）in Reactions of ^（40）Ar＋^（209）Bi，^（nat）Ag at 25MeV／u

Ｃｏｒｒｅｌａｔｉｖｅ Ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔｓ ｏｆ Ｆｉｓｓｉｏｎ Ｆｒａｇｍｅｎｔｓ ａｎｄ Ｌｉｇｈｔ Ｐａｒｔｉｃｌｅｓ（α，ｐ）ｉｎ Ｒｅａｃｔｉｏｎｓ ｏｆ ^（４０）Ａｒ＋^（２０９）Ｂｉ，^（ｎａｔ）Ａｇ ａｔ ２５ＭｅＶ／ｕ￥ＷｕＥ?..

Light Charged Particle Measurement in Coincidence with Fission Fragments in Reaction of 25MeV／u ^（40）Ar＋^（209）Bi

Ｌｉｇｈｔ Ｃｈａｒｇｅｄ Ｐａｒｔｉｃｌｅ Ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ ｉｎ Ｃｏｉｎｃｉｄｅｎｃｅ ｗｉｔｈ Ｆｉｓｓｉｏｎ Ｆｒａｇｍｅｎｔｓ ｉｎ Ｒｅａｃｔｉｏｎ ｏｆ ２５ＭｅＶ／ｕ ^（４０）Ａｒ＋^（２０９）ＢｉＬｉｇｈｔＣｈａｒｇｅｄＰａ...

Relation of Temperature and Excitation Energies of Hot Nuclei in Reactions of ^（40）Ar＋^（nat）Ag at 25MeV／u

Ｒｅｌａｔｉｏｎ ｏｆ Ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ａｎｄ Ｅｘｃｉｔａｔｉｏｎ Ｅｎｅｒｇｉｅｓ ｏｆ Ｈｏｔ Ｎｕｃｌｅｉ ｉｎ Ｒｅａｃｔｉｏｎｓ ｏｆ ^（４０）Ａｒ＋^（ｎａｔ）Ａｇ ａｔ ２５ＭｅＶ／ｕＲｅｌａｔｉｏｎｏｆＴｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ...

Measurement of Linear Momentum Transfer in Ar＋Bi and Ar＋Ag Systems at 25MeV／u

Ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ ｏｆ Ｌｉｎｅａｒ Ｍｏｍｅｎｔｕｍ Ｔｒａｎｓｆｅｒ ｉｎ Ａｒ＋Ｂｉ ａｎｄ Ａｒ＋Ａｇ Ｓｙｓｔｅｍｓ ａｔ ２５ＭｅＶ／ｕＭｅａｓｕｒｅｍｅｎｔｏｆＬｉｎｅａｒＭｏｍｅｎｔｕｍＴｒａｎｓｆｅｒｉｎＡｒ＋ＢｉａｎｄＡｒ＋...

Light Charged Particles Emitted from Central Collision in Reaction of 25MeV／u ^（40）Ar on ^（nat）Ag

Ｌｉｇｈｔ Ｃｈａｒｇｅｄ Ｐａｒｔｉｃｌｅｓ Ｅｍｉｔｔｅｄ ｆｒｏｍ Ｃｅｎｔｒａｌ Ｃｏｌｌｉｓｉｏｎ ｉｎ Ｒｅａｃｔｉｏｎ ｏｆ ２５ＭｅＶ／ｕ ^（４０）Ａｒ ｏｎ ^（ｎａｔ）ＡｇＬｉｇｈｔＣｈａｒｇｅｄＰａｒｔｉｃｌｅｓＥｍｉｔｔｅｄｆ...

水凝胶负载干细胞外泌体在组织再生领域的应用研究进展

近年来,间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)衍生的外泌体在组织再生领域引发许多关注。MSCs衍生外泌体作为细胞间通讯的信号分子,具有天然靶向性强、免疫原性低等特点,其通过MSCs旁分泌途径被细胞吸收,参与调控发挥促进细胞或组织再生功能。水凝胶作为再生医学领域的支架材料,具有良好的生物相容性、降解性等特点。将二者制成复合物联合使用后不仅可以提高外泌体在病变位置的滞留时间,且可通过原位注射等方法提高外泌体到达病变位置的剂量,在病变区域治疗效果显著且持续性改善。文中总结了现阶段外泌体与水凝胶复合物材料共同作用促进组织修复、再生的研究结果,以期为未来组织再生领域中的相关研究工作提供借鉴。

涂层材料及涂覆方式对DPF催化剂的性能影响

DPF能够捕集柴油机尾气中的颗粒物,并通过涂覆的催化剂氧化作用使其被氧化分解,以保持DPF的长时间运行和持续较低的背压,这种过程叫做被动再生。对比了多种不同涂层材料和涂覆方式,表征了其对涂层分布位置的影响,进而分析了对冷流背压、碳烟起燃、小样评价和颗粒捕集率等性能的影响,为催化剂涂层材料和涂覆方式的合理选择提供参考。

蓝斑核促肾上腺皮质激素释放激素系统对肠易激综合征大鼠内脏敏感性的影响

目的研究中枢蓝斑区促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)系统在IBS中的作用,探索影响其改变的分子机制。方法采用母婴分离联合出生后复合应激构建大鼠IBS模型,后采用脑核团微取样的方法获得大鼠蓝斑区的组织样本。应用实时荧光定量PCR技术检测对照组和IBS组大鼠蓝斑核内细胞癌基因Fos(c-Fos),以及CRH和其相应受体促肾上腺皮质激素释放激素受体(CRHR)1、CRHR2的mRNA表达;同时检测DNA甲基转移酶(DNMT)1、DNMT3a和DNMT3b的mRNA表达;采用蛋白质印迹法检测组蛋白甲基转移酶——ASH2样蛋白(ASH2L),以及SET核癌基因和MYND域2蛋白(SMYD2)的表达。统计学分析采用t检验。结果IBS组的直肠充气压低于对照组[(69.82±5.47)mmHg比(86.86±5.98)mmHg(1 mmHg=0.133 kPa)],c-Fos基因的mRNA水平较对照组升高(2.11±0.44比1.00±0.19),CRH的mRNA水平较对照组升高(1.99±0.35比1.00±0.13),SMYD2的蛋白表达水平较对照组上调(1.04±0.21比0.61±0.12),差异均有统计学意义(t=6.215、2.321、2.797、4.451,P均<0.05)。IBS组大鼠CRHR1、CRHR2、DNMT1、DNMT3a、DNMT3b的mRNA水平以及ASH2L的表达与对照组比较(分别为0.96±0.13比1.00±0.26、1.35±0.63比1.00±0.43、1.40±0.61比1.00±0.19、1.39±0.58比1.00±0.21、1.45±0.71比1.00±0.39和0.80±0.19比1.05±0.26),差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论母婴分离联合出生后复合应激通过影响蓝斑核内Crh基因的转录进而造成CRH系统和去甲肾上腺能系统应激调控网络的激活,导致大鼠内脏敏感性增加。Crh基因转录异常可能与SMYD2介导的组蛋白H3K36的甲基化有密切关系,而与DNA的甲基化修饰无关。