生姜乙醇提取物改善果糖所致大鼠脂肪肝的作用机制研究

目的观察姜提取物改善果糖所致大鼠脂肪肝的作用,并探讨其可能的作用机制。方法取SD大鼠24只,随机分为4组,每组6只,即正常对照组(给予正常饮食饮水),模型组(给予10%果糖水),姜提取物低、高剂量组20,50 mg·kg^(-1),给予姜提取物灌胃,连续28 d。用酶法和ELISA检测血浆葡萄糖、甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)和胰岛素含量,苏木精-伊红(HE)染色和油红-O染色观察肝脏组织中的脂肪沉积程度,RT-PCR和Western blot法检测肝脏相关基因和蛋白表达。结果姜提取物逆转了果糖过量消耗引起的大鼠肝脏甘油三酯的过度堆积(P<0.05)、肝细胞空泡化的增加和肝脏油红-O染色面积的增加(P<0.05)。然而,姜提取物并不影响大鼠食物摄入量和体质量。姜提取物能够抑制肝脏二脂酰甘油酰基转移酶(DGAT)-2 mRNA和蛋白的过表达(P<0.05),但对肝X受体(LXR)、DGAT-1、单酰甘油酰基转移酶(MGAT)-1、MGAT-2、激素敏感脂肪酶(HSL)和脂肪甘油三酯脂肪酶(ATGL)mRNA的表达无影响。结论姜提取物可能通过抑制介导肝脏甘油三酯生物合成的关键酶DGAT-2的过表达,从而改善果糖所致大鼠脂肪肝。

绞股蓝叶水提物对糖尿病大鼠降血糖作用研究

目的探讨绞股蓝Gynostemmapentaphyllum叶水提物对链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病大鼠的降血糖作用及其机制。方法采用ip STZ的方法制备糖尿病大鼠模型,将21只造模成功的SD雄性大鼠随机分为模型组和绞股蓝叶水提物低、高剂量(100、500 mg/kg)组,另取7只正常大鼠作为对照组,分别于给药2周末和3周末禁食取血,检测血浆葡萄糖(空腹血糖)、三酰甘油(TG)的浓度,实时荧光定量PCR(q RT-PCR)检测骨骼肌肿瘤坏死因子α(TNF-α)和葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)m RNA的表达,Western blotting检测骨骼肌GLUT-4总蛋白表达,免疫荧光染色观察GLUT-4蛋白在骨骼肌肌膜上的表达分布情况。结果与对照组比较,模型组大鼠的饮食、饮水量明显增加,而体质量以及骨骼肌的质量明显下降;血浆TG和空腹血糖以及骨骼肌中TNF-αmRNA的表达明显升高,而骨骼肌GLUT-4 mRNA、GLUT-4总蛋白及骨骼肌肌膜上GLUT-4蛋白的表达明显降低;与模型组比较,高剂量的绞股蓝叶水提物明显降低了STZ诱导的糖尿病大鼠的空腹血糖,逆转了骨骼肌TNF-αmRNA和肌膜GLUT-4蛋白的表达。结论绞股蓝叶水提物能够降低STZ诱导的糖尿病大鼠的血糖,其作用机制可能与增加骨骼肌肌膜GLUT-4蛋白表达和抑制骨骼肌炎症有关。

6-姜烯酚改善老年大鼠肝脏胰岛素抵抗作用的研究

目的:研究6-姜烯酚对老年大鼠肝脏胰岛素抵抗(IR)的作用及其机制。方法:用网络药理学方法查找6-姜烯酚作用靶点和IR相关基因,构建6-姜烯酚——IR基因调控网络并使用分子对接技术进行验证。20月龄SD雄性大鼠随机分为模型对照组、6-姜烯酚0.5 mg/kg组;另取3月龄SD雄性大鼠作为正常对照组。RT-PCR和Western blot法检测肝脏中相关基因和蛋白的表达。结果:6-姜烯酚作用靶点与IR基因密切相关,且主要富集在PI3K/AKT信号通路上;且与正常对照组相比,模型对照组大鼠肝脏磷酸化胰岛素受体底物1(p-IRS1)、总脂肪酸转位酶(t-CD36)和细胞膜脂肪酸转位酶(m-CD36)的表达显著上调,磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)、葡萄糖转运蛋白(GLUT)2和细胞浆脂肪酸转位酶(p-CD36)的表达显著下调,6-姜烯酚0.5 mg/kg可提高模型对照组大鼠肝脏胰岛素受体底物1(IRS1)、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)和蛋白激酶B(AKT)mRNA的表达(P<0.05);6-姜烯酚0.5 mg/kg显著逆转了这些蛋白的表达。结论:6-姜烯酚可改善老年大鼠肝脏IR,其机制可能与抑制IRS1(ser307)的磷酸化、促进AKT(ser 473)的磷酸化、抑制细胞膜CD36的表达和调节其质-膜转位、以及上调GLUT 2的表达有关。

6-姜辣素改善老年大鼠脂肪组织胰岛素抵抗的研究

研究6-姜辣素改善自然衰老糖脂代谢紊乱大鼠脂肪组织胰岛素抵抗的作用。将27只老年雄性SD大鼠随机分为3组(每组9只):老年模型组(aged)、6-姜辣素低剂量组(G-L,0.05 mg·kg^(-1))和6-姜辣素高剂量组(G-H,0.2 mg·kg^(-1)),另6只青年雄性SD大鼠作为青年对照组(NC),各组大鼠灌胃给药7周。ELISA法检测血浆游离脂肪酸(NEFA)和胰岛素的含量,计算脂肪组织胰岛素抵抗指数(Adipo-IR);采用HE染色法检测附睾周围脂肪组织(eWAT)脂肪细胞的大小;Western blot法检测附睾周围脂肪组织中脂联素(adiponectin,APN)信号通路、胰岛素信号通路和炎症因子相关蛋白如脂联素受体1(adiponectin receptor 1,AdipoR1)、腺苷酸活化蛋白激酶α(AMPKα)、磷酸化AMPK(苏氨酸172位点)(AMPKα;)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅助激活因子-1α(PGC-1α)、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、总蛋白激酶B(Akt)、磷酸化Akt(丝氨酸473位点)(p-Akt^(Ser473))、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、C-Jun氨基末端激酶1/2(JNK1/2)、磷酸化JNK1/2(苏氨酸183/络氨酸185位点)(p-JNK^(Thr183/Try185))、白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)的蛋白质表达;real-time PCR法检测它们基因的表达水平。结果显示,高剂量6-姜辣素给药7周可显著降低禁食血浆NEFA和胰岛素的含量,降低脂肪组织胰岛素抵抗指数;高剂量6-姜辣素组显著升高eWAT中APN、AdipoR1、PGC-1α、PI3K蛋白和mRNA的表达,以及p-AMPK;、p-Akt^(Ser473)的相对表达,显著降低eWAT中TNF-α、IL-1、IL-6蛋白和mRNA的表达,以及p-JNK1、p-JNK2的相对表达;结果说明6-姜辣素能够改善糖脂代谢紊乱大鼠的脂肪组织胰岛素敏感性,其机制可能与增强PI3K/Akt信号通路、抑制脂肪组织的炎症、增加脂肪组织APN的合成、增强AdipoR1的表达并激活其下游AMPK/PGC-1α信号通路有关。