大鼠胎脑神经干细胞的分离和培养

从胚龄14.5～16.5d(E14.5～16.5)的大鼠胎脑组织获得大鼠胎脑神经干细胞(ratfe-talneuralstemcells,rFNSCs),培养于含有碱性成纤维细胞生长因子(basicfibroblastgrowthfactor,bFGF)和表皮生长因子(epidermalgrowthfactor,EGF)的无血清培养液DMEM/F12中,用3[H]胸苷掺入试验检测EGF和bFGF对大鼠胚胎神经干细胞分裂和增殖的影响.BrdU结合反应和nestin免疫组化检测显示培养细胞在早期时代约90%以上具有分裂增殖能力并显示nestin阳性,而且这些细胞在培养过程中可以分化神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞,证明分离培养的是神经干细胞,可用于移植、定向分化和基因转移的研究.