组织激肽释放酶、缓激肽对心肌梗死后心力衰竭心室重构的作用

目的利用心肌梗死后心力衰竭模型研究组织激肽释放酶(TK)和缓激肽(BK)改善心功能、抑制心肌纤维化的机制。方法冠状动脉结扎后1周,纯化的TK及BK连续皮下渗透给药4周,5周后处死动物。导管法检测各组动物的心功能,天狼红染色检测胶原的沉积,银染法测量心肌细胞的面积,免疫组织化学法检测Ⅰ、Ⅲ型胶原,W estern b lot-ting检测TGF-β1、Sm ad 2和phosph-Sm ad 2的表达,化学发光法检测一氧化氮(NO)和过氧化物的含量。结果TK及BK能明显改善心功能,对梗死面积无影响。治疗组胶原的沉积明显减少,细胞肥大减轻,TGF-β1、Smad的表达和磷酸化减少,NO的合成增加,过氧化物蓄积减轻。结论TK及BK对心肌梗死后的心力衰竭有治疗作用,抑制TGF-β1活化及过氧化物形成是主要的机制。

Kallikrein-kinin in stem cell therapy

The tissue kallikrein-kinin system exerts a wide spectrum of biological activities in the cardiovascular, renal and central nervous systems. Tissue kallikrein-kinin modulates the proliferation, viability, mobility and functional activity of certain stem cell populations, namely mesenchymal stem cells(MSCs), endothelial progenitor cells(EPCs), mononuclear cell subsets and neural stem cells. Stimulation of these stem cells by tissue kallikrein-kinin may lead to protection against renal, cardiovascular and neural damage by inhibiting apoptosis, inflammation, fibrosis and oxidative stress and promoting neovascularization. Moreover, MSCs and EPCs genetically modified with tissue kallikrein are resistant to hypoxia- and oxidative stress-induced apoptosis, and offer enhanced protective actions in animal models of heart and kidney injury and hindlimb ischemia. In addition, activation of the plasma kallikrein-kinin system promotes EPC recruitment to the inflamed synovium of arthritic rats. Conversely, cleaved high molecular weight kininogen, a product of plasma kallikrein, reduces the viability and vasculogenic activity of EPCs. Therefore, kallikrein-kinin provides a new approach in enhancing the efficacy of stem cell therapy for human diseases.

果糖诱导大鼠胰岛素抵抗和高血压的机制及人组织型激肽释放酶基因的治疗作用

目的 研究果糖诱导高血压合并高胰岛素血症、胰岛素抵抗时内皮素 1(ET -1)及其受体 (ETA)、血管紧张素Ⅱ受体 1(AT1)的变化和人组织型激肽释放酶 (HK )基因的治疗作用。方法雄性Sprague -Dawley (SD)大鼠饮用 10 %果糖水诱导形成高血压和胰岛素抵抗动物模型后 ,静脉注入含HKcDNA的重组质粒 (pcDNA HK )。监测血压 ,血清胰岛素及血糖等。 2周时处死动物 ,测定脏器中HK的表达及ET 1、ETA和AT1的表达情况。结果 饮高果糖水 2周后 ,动物血压、血胰岛素水平明显高于正常饮水组 ,静脉注射pcDNA HK后第 3天即可明显降低果糖诱导高血压大鼠的血压 ,最大降压效应在导入基因后第 14天 (达 15mmHg) ,其降压效应持续 3周以上。HK基因导入后第 2周 ,HK治疗组动物ET 1、ETA及AT1明显低于对照组 ,与正常组接近。并且在血压下降的同时 ,血胰岛素浓度亦明显降低。结论 动物高果糖饮水可导致高血压及高胰岛素血症 ,其机理可能与ET 1、ETA和AT1表达增加有关 ,HK基因的导入可能通过降低血管ET 1、ETA和AT1表达而降低血压 ,并纠正高血压伴随的高胰岛素血症 。

急性心肌梗死后凋亡和炎症及相关因子的动态变化

目的探讨实验大鼠急性心肌梗死(AMI)后心功能改变和心肌梗死(MI)范围、凋亡、炎症的病理演变规律及相关机制。方法雄性Wistar大鼠68只,随机分MI(结扎冠状动脉左前降支)组(n=40)及相应假手术(Sham,只挂线不结扎冠状动脉)组(n=28)。MI组(3 h内死亡12只)分MI后1、7、14和28 d组,分别于术后观察期满导管法检测血流动力学改变,并取心脏组织行苏木素伊红(HE)、氯化四唑(TTC)、Masson染色观察病理变化,末端脱氧核糖核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法(TUNEL)染色检测凋亡,免疫组化检测炎症细胞密度及转化生长因子β1(TGF-β1)的表达。Western blot检测血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)、TGF-β1的表达,实时PCR法检测VCAM-1、单核细胞趋化因子1(MCP-1)的表达。结果MI后1～14 d心功能明显下降,28 d未明显恶化。MI后1、7、14及28 d组梗死范围分别为(41±3)%、(37±3)%、(38±3)%和(28±3)%,凋亡率分别为(46.3±3.0)%、(3.8±2.1)%、(3.3±2.3)%和(1.4±1.0)%,炎症细胞密度分别为(630±72)个/mm2、(1360±102)个/mm2、(1000±98)个/mm2和(223±13)个/mm2,而相应Sham组各种指标均为正常。VCAM-1、MCP-1的表达在MI后1 d明显升高,14 d后下降。TGF-β1在MI后始终处于高表达。结论大鼠MI后其凋亡高峰在1 d,炎症反应高峰在7 d出现,28 d后基本完成MI后修复过程。