局部缺血时的脂肪组织重构：脂肪细胞的死亡与干／祖细胞的激活

背景许多整形外科手术后（如脂肪移植），脂肪组织开始缺血，导致组织缺氧和营养缺失。然而，很少有研究检测脂肪组织中的缺血和／或缺氧变化的报道。方法切断小鼠体内为腹股沟脂肪垫供血的血管，建立外科手术诱导的缺血模型。利用氧气监视器测量脂肪组织的氧分压，利用全标本染色、免疫组化、流式细胞术和蛋白质印迹法分析缺血改变。作者还检测了体外低氧环境下的细胞寿命。结果3种程度缺血模型（轻度、中度、重度）的氧分压水平分别为正常脂肪组织（50．5±1．3）mmHg的75％、55％、20％。在第28天观察到脂肪组织萎缩伴随实质纤维变性，这取决于缺血的严重程度。在第1天观察到中度和重度缺血诱导低氧诱导因子1仪和纤维生长因子2表达的提高，中度和重度缺血还可导致脂肪组织中的退行性改变（如细胞凋亡、坏死、巨噬细胞侵噬）。死亡细胞包括脂肪细胞，血管内皮细胞，血源性细胞，但不包括脂肪源性干／祖细胞。退行性改变后可观察到再生性改变，包括血管形成、脂肪形成和细胞的增殖（包括脂肪源性干／祖细胞、血管内皮细胞和血细胞）。笔者还发现，严重缺氧时在体外用实验方法分化的脂肪细胞发生凋亡和／或坏死，而脂肪源性干／祖细胞仍然存活。结论脂肪组织严重缺血／缺氧导致退行性改变，继而发生相应的组织重构。在缺血环境下，脂肪细胞很容易死亡，而脂肪源性干／祖细胞却非常活跃，并有助于组织修复。

抽吸与切取方法获取的脂肪组织的结构特征和细胞组成的对比研究

背景脂肪组织是一种容易获取的组织，可当做软组织填充物，也是成人多功能细胞的来源，这种多功能细胞被称为脂肪源性干细胞／基质细胞／祖细胞。然而，由于脂肪细胞和脂肪组织的结构很脆弱，脂肪细胞的许多解剖特征仍不清楚。方法纳入抽吸方法获取的皮下脂肪组织标本15例，完整皮下脂肪组织标本9例，采用以下方法进行评估：①采用组织全层包埋结合三重荧光染色技术，对活脂肪组织进行三维成像；②甘油一3．磷酸脱氢酶试验；③多色流式细胞术（CD34、CD31和CD45）；④培养血管基质部分细胞的贴壁细胞，以产生脂肪源性基质细胞。结果组织全层包埋方法显示脂肪组织旁存在毛细血管网，抽吸获取的脂肪组织中的毛细血管网被部分破坏。抽吸脂肪组织也缺少大的脉管结构，其小脂肪粒（破碎脂肪组织，P=0．00016）和死亡细胞（P=0．0038）的数量均高于切取脂肪组织。抽吸与切取的脂肪组织中，脂肪细胞数量占全部细胞数的比例均小于20％，且脉管系统相关细胞（包括内皮细胞和脂肪源性基质细胞）占到细胞总量的一半以上。甘油一3．磷酸脱氢酶试验显示，抽吸和切取脂肪组织中破裂的脂肪组织所占百分比分别为大于30％和5％（P=0．032）。多色流失细胞术分析结果显示，抽吸脂肪组织中受污染的血源性细胞（CD45＋）数量在总细胞中所占百分比更大（P=0．0038），抽吸脂肪组织内的脂肪源性基质细胞产量大约是切取脂肪组织的一半（P=0．011）。结论作者研究表明两种组织有不同的结构特征和细胞成分，且抽吸脂肪组织内组织损伤更严重，祖细胞产量也不足。