大肠癌HT-29细胞亚系与母系转移能力和相关因子的比较

目的 :探讨大肠癌细胞转移能力与肿瘤相关因素的关系。方法 :用结肠癌 HT- 2 9亚系 HT- 2 9c和 HT- 2 9d细胞在裸大鼠体内建立转移模型 ,比较其与母系的转移能力。用 ELISA法测定 3个大肠癌细胞系的尿激酶型纤溶酶原激活因子 (u PA)及纤溶酶原抑制剂 - 1(PAI- 1)含量 ;用免疫组化技术检测癌胚抗原和 3-磷酸肌醇激酶(PI3- Kinase)在体内外的表达 ;用流式细胞仪测定癌胚抗原表达。结果 :在裸鼠体内 HT- 2 9d细胞的肝转移率明显高于母系 HT- 2 9细胞 ,转移累及的脏器增多。在体外培养中 ,HT- 2 9d细胞的 u PA及 PAI- 1含量明显高于 HT- 2 9和 Wi Dr细胞。在裸鼠体内 ,HT- 2 9d细胞的 PI3- Kinase表达明显高于 HT- 2 9和 Wi Dr细胞。结论 :经裸鼠体内筛选的大肠癌 HT- 2 9细胞亚系表现出增强的肿瘤转移能力。UPA、PAI- 1的含量及 PI3- Kinase的表达与肿瘤转移能力有关。

绿色荧光蛋白在人大肠癌HT-29c细胞的表达

目的 观察增强型绿色荧光蛋白 (enhancedgreenfluorescentprotein ,EGFP)在人大肠癌细胞的表达情况。 方法 构建逆转录病毒载体质粒prkatEGFP/neo ,用磷酸钙沉淀法转导 2 93T细胞 ,4 8h获得高滴度病毒颗粒上清液并转染人大肠癌HT 2 9c细胞。荧光显微镜及流式细胞仪观察转染的EGFP基因在人大肠癌HT 2 9c细胞体内外的表达。 结果 携带EGFP的逆转录病毒载体能有效地转染人大肠癌细胞 ,HT 2 9c细胞能稳定、高效和持久地表达EGFP ,与未转染细胞比较 ,他们的生物学特性未改变 (F =0 6 2 ,P >0 0 5 )。在裸大鼠皮下肿瘤中 ,EGFP也能稳定、高效的表达。 结论 外源性EGFP能在人大肠癌HT 2 9c细胞内进行有效的复制、转录和翻译 ,在体内外可持续、稳定、高效的表达。它能作为一种新的实验方法应用于肿瘤细胞生长。