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紫花苜蓿SAUR基因家族的鉴定及其在非生物胁迫中的表达模式研究
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作者 刘昊 李显炀 +6 位作者 何飞 王雪 李明娜 龙瑞才 康俊梅 杨青川 陈林 《草业学报》 CSCD 北大核心 2024年第4期135-153,共19页
SAUR(small auxin-up RNA)是植物早期响应生长素的一类基因,参与植物生长发育与非生物胁迫响应等一系列生物过程。在拟南芥、水稻、棉花等物种中已经对SAUR基因家族进行了系统鉴定与分析,但是,在世界上最重要的豆科牧草紫花苜蓿中关于S... SAUR(small auxin-up RNA)是植物早期响应生长素的一类基因,参与植物生长发育与非生物胁迫响应等一系列生物过程。在拟南芥、水稻、棉花等物种中已经对SAUR基因家族进行了系统鉴定与分析,但是,在世界上最重要的豆科牧草紫花苜蓿中关于SAUR基因家族的研究尚未开展。本研究利用生物信息学的方法在紫花苜蓿参考基因组共鉴定到433个MsSAUR成员,并对其基因组位置、基因结构、启动子顺式作用元件以及不同组织中的表达模式进行了分析。同时,利用紫花苜蓿在不同非生物胁迫下的转录组数据,发现有5、11、19以及12个MsSAUR成员分别响应干旱、盐、冷以及碱胁迫,MsSAUR14/94/254可以同时响应干旱和盐胁迫,MsSAUR297可以同时响应干旱、盐以及碱胁迫,MsSAUR306可以同时响应干旱、盐以及冷胁迫。本研究结果可为后期通过基因工程技术创制高产抗逆新种质提供重要的候选基因。 展开更多
关键词 紫花苜蓿 SAUR基因 全基因组鉴定 非生物胁迫 表达模式
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全基因组水平紫花苜蓿WRKY转录因子家族鉴定与表达模式分析
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作者 李显炀 刘昊 +6 位作者 何飞 王雪 李明娜 龙瑞才 康俊梅 杨青川 陈林 《草业学报》 CSCD 北大核心 2024年第4期154-170,共17页
WRKY转录因子是植物中最大的基因家族之一,在植物生长发育以及非生物胁迫过程中发挥重要的作用。目前,WRKY基因家族成员已经在多个植物物种中进行了广泛的研究和分析。然而,WRKY转录因子尚未在四倍体紫花苜蓿全基因组水平上进行鉴定与... WRKY转录因子是植物中最大的基因家族之一,在植物生长发育以及非生物胁迫过程中发挥重要的作用。目前,WRKY基因家族成员已经在多个植物物种中进行了广泛的研究和分析。然而,WRKY转录因子尚未在四倍体紫花苜蓿全基因组水平上进行鉴定与分析。本研究系统鉴定了紫花苜蓿WRKY基因家族成员,并对其在不同胁迫处理下的表达模式进行了分析。结果显示,共有198个WRKY转录因子不均匀分布在紫花苜蓿的32条染色体上,其中7号染色体的数量最多。系统进化树结果显示,WRKY基因家族成员可以分为3个组。在这些WRKY转录因子中,有42个响应盐胁迫,7个响应碱胁迫,19个响应冷胁迫和37个响应干旱胁迫,同时发现MsWRKY154和MsWRKY166可以同时响应盐、干旱、冷以及碱胁迫。本研究的结果可为紫花苜蓿WRKY转录因子的生物学功能深入研究奠定基础,同时可为紫花苜蓿分子育种提供有价值的信息。 展开更多
关键词 WRKY转录因子 紫花苜蓿 表达模式 非生物胁迫
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河北地区22个紫花苜蓿品种的生产性能比较研究 被引量:23
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作者 吕会刚 康俊梅 +3 位作者 龙瑞才 杨青川 孙彦 张铁军 《草地学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期948-958,共11页
2013-2016年通过田间试验,在中国农业大学涿州教学实验场对22个紫花苜蓿品种的产量性能进行比较分析,以期筛选出适宜河北地区种植的苜蓿品种。结果表明,不同年份的苜蓿年干草产量具有极显著差异(P<0.01);建植当年各苜蓿品种平均年产... 2013-2016年通过田间试验,在中国农业大学涿州教学实验场对22个紫花苜蓿品种的产量性能进行比较分析,以期筛选出适宜河北地区种植的苜蓿品种。结果表明,不同年份的苜蓿年干草产量具有极显著差异(P<0.01);建植当年各苜蓿品种平均年产量最低,随着生长年限的延长,产量总体呈增加趋势;‘中苜5号’的4年总干草产量最高,‘SR4030’等6个品种的总产量低于对照品种‘中苜1号’,但与对照差异不显著;第1茬产量最高,随着茬次的增加产量呈下降趋势,第1茬与年产量之间的关联度最高;秋眠性3~6级的品种丰产性和产量稳定性综合评价较高。综合4年试验结果,‘中苜5号’、‘中苜1号’、‘SR4030’、‘巨能551’、‘BR4010’、‘MF4020’、‘SK3010’和‘WL363HQ’产草量高,具有潜在的推广价值,适宜在河北地区大面积推广应用。 展开更多
关键词 紫花苜蓿 品种 产量 河北地区
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播种量和行距配置对盐碱地紫花苜蓿草产量及品质的影响 被引量:17
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作者 吕会刚 康俊梅 +4 位作者 龙瑞才 徐化凌 陈小芳 杨青川 张铁军 《草业学报》 CSCD 北大核心 2019年第3期164-174,共11页
在山东省东营市农业科学研究院试验基地,以黄淮海当家紫花苜蓿品种中苜3号为试验材料,采用随机区组设计,设播种量(7.5, 15.0, 22.5 kg·hm^(-2))和行距(15, 30, 40 cm)两个因素,研究了盐碱地条件下不同播种量和行距对紫花苜蓿干草... 在山东省东营市农业科学研究院试验基地,以黄淮海当家紫花苜蓿品种中苜3号为试验材料,采用随机区组设计,设播种量(7.5, 15.0, 22.5 kg·hm^(-2))和行距(15, 30, 40 cm)两个因素,研究了盐碱地条件下不同播种量和行距对紫花苜蓿干草产量和品质的影响,旨在为苜蓿生产确定最佳播种量和行距配置,为发展盐碱地苜蓿产业提供科学依据。结果表明,1)播种量对3年总产量无显著性影响(P>0.05),但对播种当年产量有极显著影响(P<0.01),播种量22.5 kg·hm^(-2)的3年总产量最高,产量随播种量增加呈不断提高的趋势;行距对3年总产量有极显著性影响(P<0.01),行距15 cm的3年总产量最高,随着行距的增加产量呈减小趋势;行距对播种当年的产量影响较大,随着生长时间的延长,行距对产量的影响逐渐减小;播种量为22.5 kg·hm^(-2)、行距为15 cm组合的3年总产量最高。2)播种量和行距对每m^2枝条数和枝条重有显著性影响(P<0.05),随着播种量的增加和行距的减小,每m^2枝条数呈增加的趋势,枝条重则呈减小趋势。产量与每m^2枝条数始终呈正相关关系,与枝条重呈负相关关系,均达到极显著水平(P<0.01)。3)随着播种量的增加和行距的减小,粗蛋白(crude protein,CP)含量和相对饲喂价值(relative feed value,RFV)有上升的趋势,中性洗涤纤维(neutral detergent fiber,NDF)和酸性洗涤纤维(acid detergent fiber,ADF)含量有下降趋势;播种量为22.5 kg·hm^(-2)、行距为15 cm时营养价值最高。4)从高产和品质综合考虑,在播种量22.5 kg·hm^(-2)和行距15 cm配置情况下,有利于提高苜蓿的产量和品质。综上,在山东以及黄淮海盐碱地区以种植耐盐碱苜蓿品种为宜,不同播种量和行距对产量的影响有随生长期的延长而减少的趋势,在适宜播种量和行距配置条件下,有利于提高苜蓿的产量和品质。 展开更多
关键词 紫花苜蓿 播种量 行距 产量 品质
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氮磷钾配比施肥对紫花苜蓿草产量及品质的影响 被引量:37
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作者 何飞 赵忠祥 +4 位作者 康俊梅 龙瑞才 吕会刚 杨青川 张铁军 《中国草地学报》 CSCD 北大核心 2019年第5期24-32,共9页
为了探寻紫花苜蓿种植的最适养分施用量及最佳施肥方案,提高牧草的生产性能及其营养品质,为紫花苜蓿实际生产提供技术指导。于2015和2016年在河北沧州应用“3414”试验设计,以华北地区推广的中苜3号紫花苜蓿为材料,研究了氮、磷、钾肥... 为了探寻紫花苜蓿种植的最适养分施用量及最佳施肥方案,提高牧草的生产性能及其营养品质,为紫花苜蓿实际生产提供技术指导。于2015和2016年在河北沧州应用“3414”试验设计,以华北地区推广的中苜3号紫花苜蓿为材料,研究了氮、磷、钾肥不同施肥配比对紫花苜蓿产量以及营养品质的影响,并探讨了该区域的推荐施肥量。结果表明,不同的施肥量对产量的影响很大,少施肥或者过量施肥都可以影响产量;与未施肥的对照相比,施以不同数量的氮、磷、钾对苜蓿的产量和品质均有显著影响;影响中苜3号紫花苜蓿干草产量高低顺序依次为磷肥>氮肥>钾肥。其中,处理12(N1P1K2)组合两年的产量均为最高,分别为9848.0kg/hm^2和14545.4kg/hm^2,较对照分别增产28.89%和20.37%。本研究得出最佳施肥组合为:施N5.0kg/hm^2、P30.0kg/hm^2、K180.0kg/hm^2,为黄淮海地区类似气候土壤条件下紫花苜蓿草田的合理施肥提供了科学依据和实际生产指导。 展开更多
关键词 紫花苜蓿 施肥 产量 营养品质
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蒺藜苜蓿lncRNA167及其剪切产物miR167c的鉴定和功能分析 被引量:4
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作者 张家驹 于洁 +3 位作者 李明娜 康俊梅 杨青川 龙瑞才 《草业学报》 CSCD 北大核心 2022年第1期164-180,共17页
长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)是一类长度大于200个核苷酸的功能性RNA分子,lncRNA在植物生长发育以及生物和非生物胁迫响应过程中发挥着重要作用。lncRNA常与microRNA(miRNA)关联发挥作用。本研究从蒺藜苜蓿中克隆一个预... 长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)是一类长度大于200个核苷酸的功能性RNA分子,lncRNA在植物生长发育以及生物和非生物胁迫响应过程中发挥着重要作用。lncRNA常与microRNA(miRNA)关联发挥作用。本研究从蒺藜苜蓿中克隆一个预测的新lncRNA,该lncRNA与蒺藜苜蓿miR167c在染色体上位置重合,命名为Mt-lncRNA167,并推测Mt-lncRNA167作为Mt-miR167c的剪切前体发挥作用。靶基因预测分析结果表明,生长素响应因子6/8(auxin response factor 6/8)是miR167c的两个靶基因。表达模式分析表明,Mt-lncRNA167主要在叶中表达,Mt-lncRNA167和Mt-miR167c对100 mmol·L-1NaCl、5%PEG 6000和4℃低温胁迫处理均有响应,与Mt-lncRNA167启动子顺式作用元件功能预测结果一致。在盐、干旱、低温胁迫条件下,Mt-lncRNA167与MtmiR167c表达模式基本相同,与靶基因ARF6/8表达模式相反。Mt-lncRNA167与Mt-miR167c超表达转化拟南芥植株表现出生育缺陷的表型,即果荚和花丝显著缩短,花药不能正常释放花粉,花粉活力降低。盐和干旱胁迫下发芽率结果表明Mt-lncRNA167和Mt-miR167c超表达植株抗性优于野生型。此外,Mt-lncRNA167和Mt-miR167c超表达植株下胚轴显著长于野生型。综合以上,推测Mt-lncRNA167作为Mt-miR167c的前体发挥作用,MtmiR167c抑制ARF6/8基因的表达,Mt-lncRNA167-Mt-miR167c-ARF6/8作用网络在蒺藜苜蓿抗逆和发育调控方面发挥重要作用。 展开更多
关键词 苜蓿 长链非编码RNA MICRORNA 非生物胁迫 生长发育
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紫花苜蓿开花性状的遗传特性分析与QTL定位 被引量:3
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作者 何飞 张帆 +4 位作者 张铁军 康俊梅 龙瑞才 杨青川 马春晖 《草业学报》 CSCD 北大核心 2019年第2期112-120,共9页
通过构建紫花苜蓿杂交F1代遗传分离群体,研究紫花苜蓿早熟性状的遗传特性,确定始花期性状的最适遗传模型,同时定位始花期相关的QTL位点。以低产早熟紫花苜蓿(父本)和高产晚熟紫花苜蓿(母本)为亲本构建杂交群体,以亲本和二者杂交产生的15... 通过构建紫花苜蓿杂交F1代遗传分离群体,研究紫花苜蓿早熟性状的遗传特性,确定始花期性状的最适遗传模型,同时定位始花期相关的QTL位点。以低产早熟紫花苜蓿(父本)和高产晚熟紫花苜蓿(母本)为亲本构建杂交群体,以亲本和二者杂交产生的152个F1代单株为研究对象。于2015和2016年调查始花期性状,运用主多基因遗传模型分析始花期性状的最适遗传模型。通过GBS测序技术对154个单株进行基因分型,利用测序产生的SNP标记构建连锁图谱,同时结合表型数据进行QTL定位。结果表明:2MG-A为始花期性状的最适遗传模型,2015年的主基因遗传率为99%,2016年的主基因遗传率为98.5%。父本连锁图覆盖图距为1386cM,平均标记密度3.2cM;母本连锁图覆盖图距为798.73cM,平均标记密度8.07cM。对两年的数据进行QTL定位分析得到2个主效QTL位点,表型贡献率分别为12.1334%和11.0157%。表明始花期主要受两对主效基因控制,同时具有加性作用。始花期性状主要由2个QTL位点控制。 展开更多
关键词 开花性状 始花期 遗传分析 连锁图谱 QTL定位
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紫花苜蓿镰刀菌根腐病抗病种质资源筛选 被引量:4
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作者 支旭欣 张帆 +3 位作者 杨青川 王珍 康俊梅 龙瑞才 《中国草地学报》 CSCD 北大核心 2022年第4期104-112,共9页
紫花苜蓿根腐病是我国苜蓿产区普遍发生的病害之一,其主要致病病原为尖孢镰刀菌。采用水培接菌法接种尖孢镰刀菌,测定58份供试苜蓿材料的病情指数、株高、根长、地下生物量并进行相关分析和聚类分析,评价紫花苜蓿种质材料苗期根腐病抗... 紫花苜蓿根腐病是我国苜蓿产区普遍发生的病害之一,其主要致病病原为尖孢镰刀菌。采用水培接菌法接种尖孢镰刀菌,测定58份供试苜蓿材料的病情指数、株高、根长、地下生物量并进行相关分析和聚类分析,评价紫花苜蓿种质材料苗期根腐病抗性。结果表明,株高、根长、地下生物量与病情指数均呈负相关。病情指数变化范围为12.50~70.83,根据病情指数共划分出4个不同抗性等级,分别是抗病材料、耐病材料、感病材料和高感材料。其中,抗病材料共1份,耐病材料共22份,感病材料共25份,高感材料共10份。根据聚类分析结果显示,58份紫花苜蓿材料大致分为可分为三类,分别为15份耐病材料、24份感病材料和19份高感材料。虽然部分材料与病情指数划分结果不是完全一致,但抗病材料和感病材料在聚类分析结果中能够被明显区分。其中,不同分析方法都表明,PAMPA为抗病材料,阳高、甘农3号、新牧2号、龙牧1号、CF030056、狼山、北疆、敖汉、偏关、G 13608都为高感材料,没有对根腐病完全免疫的种质材料。 展开更多
关键词 紫花苜蓿 尖孢镰刀菌 根腐病 抗病性鉴定
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蒺藜苜蓿叶绿素酸酯a加氧酶(MtCAO)基因的克隆与功能分析 被引量:4
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作者 刘文文 崔会婷 +4 位作者 尉春雪 龙瑞才 康俊梅 杨青川 王珍 《草业学报》 CSCD 北大核心 2020年第5期171-181,共11页
叶绿素含量直接影响植物光合效率,从而决定其生物量。叶绿素酸酯a加氧酶(CAO)催化叶绿素酸酯a转化成叶绿素酸酯b,是叶绿素合成的限速酶之一。本研究克隆了蒺藜苜蓿MtCAO,该基因编码531个氨基酸。进化分析表明,MtCAO与双子叶植物的CAO亲... 叶绿素含量直接影响植物光合效率,从而决定其生物量。叶绿素酸酯a加氧酶(CAO)催化叶绿素酸酯a转化成叶绿素酸酯b,是叶绿素合成的限速酶之一。本研究克隆了蒺藜苜蓿MtCAO,该基因编码531个氨基酸。进化分析表明,MtCAO与双子叶植物的CAO亲缘关系较近。高等植物CAO基因的结构保守,均含有9个外显子。MtCAO主要在绿色组织尤其是叶片中高丰度表达。瞬时表达拟南芥原生质体试验显示,MtCAO-GFP融合蛋白定位于叶绿体。表达模式分析表明,茉莉酸甲酯(MeJA,100μmol·L^-1)及黑暗处理抑制MtCAO的表达,而24 h内NaCl(100 mmol·L^-1)及聚乙二醇(PEG,5%)处理先诱导后抑制其表达,且该基因受昼夜节律调控。这与对MtCAO启动子区顺式作用元件的预测结果一致。类似于超表达AtCAO的拟南芥,超表达MtCAO的拟南芥株系叶色正常,叶绿素含量及鲜重与野生型差异不显著,推测是由于MtCAO高度保守的A结构域中的降解子导致的。 展开更多
关键词 蒺藜苜蓿 叶绿素酸酯a加氧酶 叶绿体定位 昼夜节律 转基因拟南芥
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过量表达紫花苜蓿MsHB7基因对拟南芥耐旱性的影响 被引量:2
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作者 候怡谣 李霄 +3 位作者 龙瑞才 杨青川 康俊梅 郭长虹 《草业学报》 CSCD 北大核心 2021年第4期170-179,共10页
同源异型域-亮氨酸拉链蛋白(HD-Zip)第I类亚家族在植物非生物胁迫调控过程中起着重要作用,已在多个物种中进行了克隆鉴定,但关于紫花苜蓿该家族基因的研究还鲜有报道。本研究旨在研究紫花苜蓿HD-Zip第I类亚家族基因MsHB7对拟南芥抗旱性... 同源异型域-亮氨酸拉链蛋白(HD-Zip)第I类亚家族在植物非生物胁迫调控过程中起着重要作用,已在多个物种中进行了克隆鉴定,但关于紫花苜蓿该家族基因的研究还鲜有报道。本研究旨在研究紫花苜蓿HD-Zip第I类亚家族基因MsHB7对拟南芥抗旱性的调控功能。通过克隆得到大小为738 bp、编码245个氨基酸的MsHB7基因的开放阅读框。多重序列比对和系统进化树分析结果显示,MsHB7蛋白属于HD-Zip I亚家族,且与拟南芥中ATHB7和ATHB12亲缘关系较近。实时荧光定量分析表明,MsHB7基因受干旱诱导。将MsHB7基因转化拟南芥并获得了阳性植株。干旱处理后,转基因拟南芥比野生型拟南芥萎蔫程度更明显,转基因植株相对含水量显著低于野生型拟南芥,并积累了更多的脯氨酸和丙二醛。qRT-PCR检测发现处理之后逆境胁迫指示基因ATCAT1、ATDREB2A和ATRD29A在转基因拟南芥中的表达量显著升高,而ATLEA3的表达量显著下降。上述结果表明MsHB7基因的过表达可降低转基因拟南芥的耐旱性,为进一步开发利用该基因提供理论依据。 展开更多
关键词 紫花苜蓿 同源异型域-亮氨酸拉链蛋白 干旱胁迫 转基因拟南芥
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低磷胁迫对蒺藜苜蓿苗期生长的影响及评价 被引量:1
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作者 刘晓波 王雪 +1 位作者 康俊梅 杨青川 《中国奶牛》 2022年第6期43-47,共5页
本试验以33份蒺藜苜蓿(Medicago truncatula)材料为研究对象,通过在幼苗期进行低磷胁迫处理,观察其对幼苗生长的影响,并评价不同样品对低磷的敏感性。测定植株茎色、枯叶率以及地上与地下生物量,将材料划分为中度敏感型材料、耐低磷型... 本试验以33份蒺藜苜蓿(Medicago truncatula)材料为研究对象,通过在幼苗期进行低磷胁迫处理,观察其对幼苗生长的影响,并评价不同样品对低磷的敏感性。测定植株茎色、枯叶率以及地上与地下生物量,将材料划分为中度敏感型材料、耐低磷型材料和对低磷敏感型材料3类。结果表明:102、103、107、108、111、113、114、115、116、117、118、119、120、124、125和130在5μmol/L KH_(2)PO_(4)低磷处理后生长并未受到显著影响,耐低磷能力较强,101、106、122、123、129和132在低磷处理后生长迟缓、发育不良,为敏感型材料,其余为中度敏感型材料。 展开更多
关键词 蒺藜苜蓿 低磷胁迫 幼苗期 评价
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紫花苜蓿甘氨酸脱羧酶H-蛋白基因MsGDC-H1功能分析
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作者 尉春雪 何飞 +7 位作者 许蕾 李霄 张立霞 李明娜 陈林 康俊梅 杨青川 龙瑞才 《草业学报》 CSCD 北大核心 2022年第12期95-105,共11页
光呼吸通过清除2-磷酸乙醇酸(2-PG)使氧合光合作用成为可能,该过程对C3植物至关重要。H-蛋白是光呼吸过程中将甘氨酸转化为丝氨酸的甘氨酸脱羧酶(GDC)的关键组成蛋白之一。本研究克隆了紫花苜蓿MsGDCH1,该基因编码166个氨基酸,具有1个... 光呼吸通过清除2-磷酸乙醇酸(2-PG)使氧合光合作用成为可能,该过程对C3植物至关重要。H-蛋白是光呼吸过程中将甘氨酸转化为丝氨酸的甘氨酸脱羧酶(GDC)的关键组成蛋白之一。本研究克隆了紫花苜蓿MsGDCH1,该基因编码166个氨基酸,具有1个硫辛酰基附着位点保守结构域和1个N6-硫辛酰赖氨酸保守位点。进化分析表明,MsGDC-H1蛋白与双子叶植物的甘氨酸脱羧酶H-蛋白(GDC-H)亲缘关系近。表达模式分析表明,MsGDC-H1在苜蓿叶中表达丰度高,且受光诱导。为了探究MsGDC-H1基因对拟南芥生长的影响,分别使用光诱导的茎叶特异性启动子ST-LS1和组成型启动子CaMV 35S驱动MsGDC-H1(ST-LS1::MsGDC-H1;CaMV35S::MsGDC-H1)在拟南芥中异源表达。检测过表达植株生物量、淀粉、可溶性糖含量以及光合速率。数据分析显示,CaMV 35S::MsGDC-H1过表达拟南芥(G系列植株)生长受阻,淀粉含量比ST-LS1::MsGDC-H1特异性表达拟南芥(GS系列植株)增加了34%~67%,比野生型(WT)增加了7。3%~33。7%;可溶性糖含量比GS系列降低了36%~38%,比WT增加了44。3%~49。7%;与WT相比,GS系列植株生长更快,淀粉含量无显著差异(P>0。05),可溶性糖含量显著增加(P<0。05)。试验结果表明,MsGDC-H1基因在调控拟南芥光合速率、碳水化合物合成以及生长等方面发挥重要作用,未来可作为提高苜蓿产量的基因工程育种候选基因。 展开更多
关键词 甘氨酸脱羧酶H-蛋白 产量 光合速率 糖含量 拟南芥
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紫花苜蓿MsFtsH8基因的克隆及功能分析
13
作者 余倩文 李明娜 +3 位作者 龙瑞才 杨青川 康俊梅 郭长虹 《植物遗传资源学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期1442-1451,共10页
盐胁迫是影响植物生长发育的主要非生物胁迫之一。金属蛋白酶FtsH(Filamentation Temperature-Sensitive H)是一种ATP和Zn2+依赖型蛋白酶,广泛存在于真核生物和原核生物中,属于AAA蛋白酶家族(ATPase associated with various cellular a... 盐胁迫是影响植物生长发育的主要非生物胁迫之一。金属蛋白酶FtsH(Filamentation Temperature-Sensitive H)是一种ATP和Zn2+依赖型蛋白酶,广泛存在于真核生物和原核生物中,属于AAA蛋白酶家族(ATPase associated with various cellular activities),在植物叶绿体发育、光合系统蛋白合成和修复、非生物胁迫的应答和抵抗、植物叶片杂色的调控等重要植物生长发育过程中起到了重要的作用。FtsH在拟南芥、油菜、大豆等植物中多有研究,但在紫花苜蓿中的功能还尚未有详细报导。本研究克隆且分析了紫花苜蓿MsFtsH8基因的表达模式,并对该基因进行生物信息学分析,通过在拟南芥中过表达发现,过表达的拟南芥植株在盐胁迫条件下,种子发芽率、根长和鲜重显著提高。研究结果表明,MsFtsH8具有调控耐盐的功能。本研究为苜蓿耐盐分子育种提供了重要候选基因和理论参考。 展开更多
关键词 紫花苜蓿 金属蛋白酶FtsH 盐胁迫 蛋白水解酶
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蒺藜苜蓿膜联蛋白MtANN2基因的表达模式及盐胁迫下的功能分析
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作者 刘亚男 于人杰 +4 位作者 高燕丽 康俊梅 杨青川 武志海 王珍 《草业学报》 CSCD 北大核心 2022年第5期124-134,共11页
膜联蛋白(annexins)是一类进化保守的多基因家族蛋白,它们广泛存在于真核生物中,能通过Ca^(2+)与膜磷脂的结合参与胁迫相关的多种生物学过程。早期对膜联蛋白的研究多集中于脊椎动物,对植物膜联蛋白的认识开始于番茄。关于豆科植物尤其... 膜联蛋白(annexins)是一类进化保守的多基因家族蛋白,它们广泛存在于真核生物中,能通过Ca^(2+)与膜磷脂的结合参与胁迫相关的多种生物学过程。早期对膜联蛋白的研究多集中于脊椎动物,对植物膜联蛋白的认识开始于番茄。关于豆科植物尤其是牧草中膜联蛋白的研究还鲜有报道。本研究分析了蒺藜苜蓿膜联蛋白与饲草紫花苜蓿同源蛋白的进化关系,研究了蒺藜苜蓿膜联蛋白基因MtANN2的表达模式,进一步利用拟南芥同源基因的突变体阐明了MtANN2在根系发育和盐胁迫中的功能。RT-qPCR结果显示,MtANN2在根中高丰度表达,且表达水平受NaCl诱导。RNA原位杂交表明MtANN2特异表达于幼苗侧根原基。拟南芥同源基因AtANN2的T-DNA插入突变体植株弱小、侧根数少、根鲜重低,且对盐(100 mmol·L^(-1))处理的敏感性显著高于野生型。超表达MtANN2于atann2后转基因植株的侧根数介于野生型与突变体之间,根鲜重接近野生型,表明MtANN2能在一定程度上互补该突变体的表型缺陷。在盐处理下,该转基因株系的发芽率和长势均恢复到类似野生型的水平。以上结果从分子水平上表明,蒺藜苜蓿膜联蛋白MtANN2参与植物根系生长及盐胁迫响应,高水平表达该基因能够改善植物的耐盐性。本研究为紫花苜蓿耐盐分子育种提供了备选基因。 展开更多
关键词 蒺藜苜蓿 膜联蛋白 表达模式 超表达 盐胁迫
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Proteomic analysis of salt and osmotic-drought stress in alfalfa seedlings 被引量:6
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作者 MA Qiao-li kang jun-mei +5 位作者 LONG Rui-cai CUI Yan-jun ZHANG Tie-jun XIONG Jun-bo YANG Qing-chuan SUN Yan 《Journal of Integrative Agriculture》 SCIE CAS CSCD 2016年第10期2266-2278,共13页
Alfalfa is widely grown and is one of the most important forage crops in the world, but its growth and biomass production are markedly reduced under salt and drought stress, particularly during the early seedling stag... Alfalfa is widely grown and is one of the most important forage crops in the world, but its growth and biomass production are markedly reduced under salt and drought stress, particularly during the early seedling stage. To identify the mechanisms behind salt and drought responsiveness at the alfalfa seedling stage, the proteins expressed were analyzed under no-treatment, 200 mol L–1 Na Cl and 180 g L–1 PEG treatment conditions during the seedling stage. Out of more than 800 protein spots detected on two-dimensional electrophoresis(2-DE) g els, 35 proteins showed statistically significant responses(P<0.05) to Na Cl and PEG stress, which were selected for tandem mass spectrometric identification, owing to their good resolution and abundance levels, and 32 proteins were positively identified. The identified proteins were divided into seven functional categories: photosynthetic metabolism, protein biosynthesis, folding and assembly, carbohydrate metabolism-associated proteins, stress defense related protein, metabolism of nucleic acid, other function categories and unknown proteins. Our results suggested that these proteins may play roles in alfalfa adaptation to salt and drought stress. Further study of these proteins will provide insights into the molecular mechanisms of abiotic stress and the discovery of new candidate markers in alfalfa. 展开更多
关键词 ALFALFA salinity stress osmotic stress seedling growth PROTEOMICS
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Transcriptome analysis of salt-responsive genes and SSR marker exploration in Carex rigescens using RNA-seq 被引量:4
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作者 LI Ming-na LONG Rui-cai +6 位作者 FENG Zi-rong LIU Feng-qi SUN Yan ZHANG Kun kang jun-mei WANG Zhen CAO Shi-hao 《Journal of Integrative Agriculture》 SCIE CAS CSCD 2018年第1期184-196,共13页
Carex rigescens(Franch.) V.Krecz is a wild turfgrass perennial species in the Carex genus that is widely distributed in salinised areas of northern China.To investigate genome-wide salt-response gene networks in C.rig... Carex rigescens(Franch.) V.Krecz is a wild turfgrass perennial species in the Carex genus that is widely distributed in salinised areas of northern China.To investigate genome-wide salt-response gene networks in C.rigescens,transcriptome analysis using high-throughput RNA sequencing on C.rigescens exposed to a 0.4% salt treatment(Cr_Salt) was compared to a non-salt control(Cr_Ctrl).In total,57 742 546 and 47 063 488 clean reads were obtained from the Cr_Ctrl and Cr_Salt treatments,respectively.Additionally,21 954 unigenes were found and annotated using multiple databases.Among these unigenes,34 were found to respond to salt stress at a statistically significant level with 6 genes up-regulated and 28 downregulated.Specifically,genes encoding an EF-hand domain,ZFP and AP2 were responsive to salt stress,highlighting their roles in future research regarding salt tolerance in C.rigescens and other plants.According to our quantitative RT-PCR results,the expression pattern of all detected differentially expressed genes were consistent with the RNA-seq results.Furthermore,we identified 11 643 simple sequence repeats(SSRs) from the unigenes.A total of 144 amplified successfully in the C.rigescens cultivar Lüping 1,and 69 of them reflected polymorphisms between the two genotypes tested.This is the first genome-wide transcriptome study of C.rigescens in both salt-responsive gene investigation and SSR marker exploration.Our results provide further insights into genome annotation,novel gene discovery,molecular breeding and comparative genomics in C.rigescens and related grass species. 展开更多
关键词 salt stress Carex rigescens TRANSCRIPTOME differentially expressed genes SSR markers
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Modulation of protein expression in alfalfa (Medicago sativa L.) root and leaf tissues by Fusarium proliferatum 被引量:1
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作者 CONG Li-li SUN Yan +5 位作者 LONG Rui-cai kang jun-mei ZHANG Tie-jun LI Ming-na WANG Zhen YANG Qing-chuan 《Journal of Integrative Agriculture》 SCIE CAS CSCD 2017年第11期2558-2572,共15页
Alfalfa(Medicago sativa L.) is an important forage crop and is also a target of many fungal diseases including Fusarium spp.As of today,very little information is available about molecular mechanisms that contribute t... Alfalfa(Medicago sativa L.) is an important forage crop and is also a target of many fungal diseases including Fusarium spp.As of today,very little information is available about molecular mechanisms that contribute to pathogenesis and defense responses in alfalfa against Fusarium spp.and specifically against Fusarium proliferatum,the causal agent of alfalfa root rot.In this study,we used a proteomic approach to identify inducible proteins in alfalfa during a compatible interaction with F.proliferatum strain YQC-L1.Samples used for the two-dimensional gel electrophoresis(2-DE) and MALDI-TOF/TOF mass spectrometry were from roots and leaves of alfalfa cultivar Ameri Graze 401+Z and WL656 HQ.Plants were grown in hydroponic conditions and at 4 days post inoculation with YQC-L1.Our disease symptom assays indicated that AmeriG raze401+Z was tolerant to YQC-L1 infection while WL656 HQ was highly susceptible.Analysis of differentially expressed proteins found in the 2-DE was further characterized using the MASCOT MS/MS ion search software and associated databases to identify multiple proteins that might be involved in F.proliferatum resistance.A total of 66 and 27 differentially expressed proteins were found in the roots and leaves of the plants inoculated with YQC-L1,respectively.These identified proteins were placed in various categories including defense and stress response related metabolism,photosynthesis and protein synthesis.Thirteen identified proteins were validated for their expressions by quantitative reverse transcription(q RT)-PCR.Our results suggested that some of the identified proteins might play important roles in alfalfa resistance against Fusarium spp.These finding could facilitate further dissections of molecular mechanisms controlling root rot disease in alfalfa and potentially other legume crops. 展开更多
关键词 紫花苜蓿 蛋白表达 病原菌 逆转录-聚合酶链反应 叶组织 MALDI-TOF 蛋白质组学 二维凝胶电泳
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Yield Evaluation of Twenty-Eight Alfalfa Cultivars in Hebei Province of China
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作者 ZHANG Tie-jun kang jun-mei +4 位作者 GUO Wen-shan ZHAO Zhong-xiang XU Yu-peng YAN Xu-dong YANG Qing-chuan 《Journal of Integrative Agriculture》 SCIE CAS CSCD 2014年第10期2260-2267,共8页
Cultivar selection is important for alfalfa(Medicago sativa L.) hay production. From 2009 to 2012, a field study was conducted to evaluate the dry matter yield(DMY) of 28 cultivars in Cangzhou District of Hebei Provin... Cultivar selection is important for alfalfa(Medicago sativa L.) hay production. From 2009 to 2012, a field study was conducted to evaluate the dry matter yield(DMY) of 28 cultivars in Cangzhou District of Hebei Province, China, and to determine the most suitable cultivars for this province and other zones with similar climate conditions. 28 alfalfa cultivars were sown in late March of 2009 and were harvested for hay four times in each subsequent year. The results showed that the climatic conditions resulted in significant differences in annual DMY among years, with the second year being the highest and the first year the lowest. The top five cultivars with the highest total DMY were L2750(62.75 t ha-1), Horn(62.72 t ha-1), 86-266(61.55 t ha-1), German(61.44 t ha-1) and Zhongmu 1(61.18 t ha-1), respectively. Across all four years, first harvest had the highest ratios to annual DMY except the cultivar of Rambler, while the fourth harvest had the lowest ratio. There were positive correlation relationships between DMY of each harvest and annual DMY, and the correlation coefficients were all significant in four years. And the path coefficients of first harvest were always the highest in four years. The qualities showed small variations among these cultivars and the cultivar L3750 presented the highest crude protein in both years. Crude protein had significant positive correlation with relative feed value(RFV) in both years while crude fiber had significant negative correlation with RFV and crude fiber. 展开更多
关键词 品种播种 河北省 产量表现 中国 正相关关系 评价 紫花苜蓿 干草生产
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Detection of quantitative trait loci(QTL)associated with spring regrowth in alfalfa(Medicago sativa L.)
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作者 JIANG Xue-qian ZHANG Fan +9 位作者 WANG Zhen LONG Rui-cai LI Ming-na HE Fei YANG Xi-jiang YANG Chang-fu JIANG Xu YANG Qing-chuan WANG Quan-zhen kang jun-mei 《Journal of Integrative Agriculture》 SCIE CAS CSCD 2022年第3期812-818,共7页
Spring regrowth is an important trait for perennial plants including alfalfa,the most cultivated forage legume worldwide.However,the genetic and genomic basis of the trait is largely unknown in alfalfa due to its comp... Spring regrowth is an important trait for perennial plants including alfalfa,the most cultivated forage legume worldwide.However,the genetic and genomic basis of the trait is largely unknown in alfalfa due to its complex genetic background of the tetroploid genome.The objective of this study was to identify quantitative trait loci(QTLs)associated with spring regrowth using high-resolution genetic linkage maps we constructed previously.In total,36 significant additive effect QTLs for the trait were detected.Among them,10 QTLs individually explained more than 10%of the phenotypic variation(PVE)with four in P1 and six in P2.Six overlapped QTLs intervals were detected with two and four intervals distributed in P1 and P2,respectively.In P1,both overlapped genomic regions were located on homolog 7 D.In P2,the four QTLs with PVE>10%were co-localized on homolog 6 D.Meanwhile,six pairs of significant epistatic QTLs were identified in P2.Screening of potential candidate genes associated with four overlapped QTLs(q CP2019-8,q LF2019-5,q LF2020-4,and q BLUP-3)narrowed down one candidate annotated as MAIL1.The Arabidopsis homolog gene has been reported to play an important role in plant growth.Therefore,the detected QTLs are valuable resources for genetic improvement of alfalfa spring vigor using marker-assisted selection(MAS),and further identification of the associated genes would provide insights into genetic control of spring regrowth in alfalfa. 展开更多
关键词 ALFALFA GBS genetic map QTL spring regrowth
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