非血管化的脂肪移植后脂肪细胞的命运：脂肪细胞早期死亡和替换的证据

背景与目的脂肪移植的临床效果是一种可变因素，而且其依赖于所采用的技术，同时，移植组织怎样建立血管化是未知的。近来，我们通过对蛋白进行免疫组化染色，而非HE染色，对存活和死亡的脂肪细胞进行观察。方法利用如下方法对人类脂肪组织中各细胞成分（脂肪细胞，脂肪干细胞／间质细胞／祖细胞，血管内皮细胞，造血细胞）的生存能力进行评价：①储存脂肪抽吸物；②培养细胞；③培养功能性脂肪组织。此外，将小鼠腹股沟脂肪垫（150～200mg）移植于头皮下，并在第0、1、2-,3、5、7、14天对移植物进行染色。结果体外研究显示，尽管脂肪来源间质干细胞可以保持3d的活性，但在缺血环境条件下脂肪细胞最易受影响而死亡。体内研究证实，大多数移植脂肪细胞在第1天开始死亡，仅有少部分距离组织边缘300μm的脂肪细胞存活。增殖细胞的数量在第3天开始增多，从第7天开始活性脂肪细胞区域增大，提示坏死组织的修复重建过程开始。结论我们展示了非血管化的脂肪移植后脂肪组织最大程度有活力模型的令人信服的证据。我们观察到移植组织由外围至内部分为3个区域：存活区域（脂肪细胞存活），再生区域（脂肪细胞死亡，脂肪来源间质干细胞存活，坏死脂肪细胞由新生的脂肪细胞替换），坏死区域（脂肪细胞核脂肪来源间质干细胞均死亡）。

局部缺血时的脂肪组织重构：脂肪细胞的死亡与干／祖细胞的激活

背景许多整形外科手术后（如脂肪移植），脂肪组织开始缺血，导致组织缺氧和营养缺失。然而，很少有研究检测脂肪组织中的缺血和／或缺氧变化的报道。方法切断小鼠体内为腹股沟脂肪垫供血的血管，建立外科手术诱导的缺血模型。利用氧气监视器测量脂肪组织的氧分压，利用全标本染色、免疫组化、流式细胞术和蛋白质印迹法分析缺血改变。作者还检测了体外低氧环境下的细胞寿命。结果3种程度缺血模型（轻度、中度、重度）的氧分压水平分别为正常脂肪组织（50．5±1．3）mmHg的75％、55％、20％。在第28天观察到脂肪组织萎缩伴随实质纤维变性，这取决于缺血的严重程度。在第1天观察到中度和重度缺血诱导低氧诱导因子1仪和纤维生长因子2表达的提高，中度和重度缺血还可导致脂肪组织中的退行性改变（如细胞凋亡、坏死、巨噬细胞侵噬）。死亡细胞包括脂肪细胞，血管内皮细胞，血源性细胞，但不包括脂肪源性干／祖细胞。退行性改变后可观察到再生性改变，包括血管形成、脂肪形成和细胞的增殖（包括脂肪源性干／祖细胞、血管内皮细胞和血细胞）。笔者还发现，严重缺氧时在体外用实验方法分化的脂肪细胞发生凋亡和／或坏死，而脂肪源性干／祖细胞仍然存活。结论脂肪组织严重缺血／缺氧导致退行性改变，继而发生相应的组织重构。在缺血环境下，脂肪细胞很容易死亡，而脂肪源性干／祖细胞却非常活跃，并有助于组织修复。