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日本血吸虫新抗原基因的筛选、克隆、表达和免疫效果研究
被引量:
7
1
作者
陈利玉
易新元
+2 位作者
曾宪芳
蔡春
l.mcreynolds
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2005年第4期331-337,共7页
为了寻找日本血吸虫(Schistosomajaponicum,Sj) 新的疫苗候选基因并进行免疫效果研究,用Sj雌虫抗原免疫家兔制备血清,对Sj成虫cDNA文库进行免疫筛选,将获得的新基因(命名为Sj-F1,GenBank登录号为AY261995) 克隆入原核表达载体pTWIN1和...
为了寻找日本血吸虫(Schistosomajaponicum,Sj) 新的疫苗候选基因并进行免疫效果研究,用Sj雌虫抗原免疫家兔制备血清,对Sj成虫cDNA文库进行免疫筛选,将获得的新基因(命名为Sj-F1,GenBank登录号为AY261995) 克隆入原核表达载体pTWIN1和真核表达载体pcDNA3,经PCR、限制性酶切筛选和鉴定阳性重组子. 将pTWIN1/Sj-F1质粒转化大肠杆菌ER2566,在低温和低IPTG浓度下诱导表达可溶性重组融合蛋白(rSj-F1/intein2),并经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质印迹(Western blot)分析鉴定. 将pcDNA3/Sj-F1质粒转化大肠杆菌ER2502,大量制备DNA疫苗. 用重组融合蛋白和DNA疫苗免疫小鼠,末次免疫后2周用Sj尾蚴进行攻击感染. 感染后42天剖杀冲虫,计算减虫率和减卵率. 感染前采血用ELISA法检测抗体. 免疫保护效果测定显示:重组蛋白疫苗以FCA作佐剂经皮下免疫和以壳聚糖作佐剂经粘膜免疫分别获得了28.07%、24.69%的减虫率和48.30%、46.38%的减卵率;DNA疫苗(pcDNA3/Sj-F1)单独免疫获得了18.47%的减虫率和35.06%的减卵率;用DNA疫苗启动免疫后用重组蛋白疫苗经皮下加强免疫,减虫率和减卵率分别提高到了40.42%和56.17%;用DNA疫苗启动免疫后用重组蛋白疫苗经黏膜加强免疫,减虫率和减卵率增高更明显,分别提高到了42.38%和62.
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关键词
日本血吸虫
免疫筛选
雌虫
Sj-F1
免疫
下载PDF
职称材料
两种佐剂对日本血吸虫重组抗原SjGST-Sj32保护效果的影响
被引量:
5
2
作者
蔡春
易新元
+3 位作者
曾宪芳
周金春
舒新华
l.mcreynolds
《中国人兽共患病杂志》
CSCD
北大核心
2000年第2期46-49,共4页
目的比较弗氏完全佐剂(FCA)与单磷脂A(MPL)的免疫增强作用,为提高重组SjGST-Sj32(SjGST-Sj32)的疫苗效果提供依据。方法SjGST-Sj32加弗氏完全佐剂(SjGST-Sj32+FCA)或单磷脂A(SjGST-Sj32+MPL)免疫小鼠3次,ELISA法检测抗体...
目的比较弗氏完全佐剂(FCA)与单磷脂A(MPL)的免疫增强作用,为提高重组SjGST-Sj32(SjGST-Sj32)的疫苗效果提供依据。方法SjGST-Sj32加弗氏完全佐剂(SjGST-Sj32+FCA)或单磷脂A(SjGST-Sj32+MPL)免疫小鼠3次,ELISA法检测抗体水平,用减虫率及减卵率表示保护性作用。结果与PBS对照组相比,SjGST-Sj32加FCA或MPL,免疫BALBC/c小鼠减虫率分别为48.8%(P<0.01)和44.1%(P<0.01);每克肝卵(LEPG)减少率分别为59.4%(P<0.01)和46.2%(P<0.01);SjGST-Sj32+FCA组抗体滴度达1:204800(P<0.05),而SjGST-Sj32+MPL组抗体滴度为1:51200(P<0.05)。结论FCA和MPL均可以增强对SjGST-Sj32免疫小鼠的抗感染保护性免疫力;FCA也可增强SjGST-Sj32诱导小鼠抗生殖免疫,而MPL似不具明显增强SjGST-Sj32的抗生殖免疫作用。佐剂MPL在提高免疫小鼠体液免疫应答方面稍逊于经典佐剂FCA。
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关键词
日本血吸虫病
重组抗原
完全弗氏佐剂
单磷脂A
下载PDF
职称材料
题名
日本血吸虫新抗原基因的筛选、克隆、表达和免疫效果研究
被引量:
7
1
作者
陈利玉
易新元
曾宪芳
蔡春
l.mcreynolds
机构
中南大学湘雅医学院病原生物学系
Molecular Parasitology Group
出处
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2005年第4期331-337,共7页
基金
TDR/WHO资助项目(980268)
湖南省科技厅资助项目(00jzy2115).~~
文摘
为了寻找日本血吸虫(Schistosomajaponicum,Sj) 新的疫苗候选基因并进行免疫效果研究,用Sj雌虫抗原免疫家兔制备血清,对Sj成虫cDNA文库进行免疫筛选,将获得的新基因(命名为Sj-F1,GenBank登录号为AY261995) 克隆入原核表达载体pTWIN1和真核表达载体pcDNA3,经PCR、限制性酶切筛选和鉴定阳性重组子. 将pTWIN1/Sj-F1质粒转化大肠杆菌ER2566,在低温和低IPTG浓度下诱导表达可溶性重组融合蛋白(rSj-F1/intein2),并经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质印迹(Western blot)分析鉴定. 将pcDNA3/Sj-F1质粒转化大肠杆菌ER2502,大量制备DNA疫苗. 用重组融合蛋白和DNA疫苗免疫小鼠,末次免疫后2周用Sj尾蚴进行攻击感染. 感染后42天剖杀冲虫,计算减虫率和减卵率. 感染前采血用ELISA法检测抗体. 免疫保护效果测定显示:重组蛋白疫苗以FCA作佐剂经皮下免疫和以壳聚糖作佐剂经粘膜免疫分别获得了28.07%、24.69%的减虫率和48.30%、46.38%的减卵率;DNA疫苗(pcDNA3/Sj-F1)单独免疫获得了18.47%的减虫率和35.06%的减卵率;用DNA疫苗启动免疫后用重组蛋白疫苗经皮下加强免疫,减虫率和减卵率分别提高到了40.42%和56.17%;用DNA疫苗启动免疫后用重组蛋白疫苗经黏膜加强免疫,减虫率和减卵率增高更明显,分别提高到了42.38%和62.
关键词
日本血吸虫
免疫筛选
雌虫
Sj-F1
免疫
Keywords
Schistosoma japonicum
immunoscreening
female adult worm
Sj-F1
immunization
分类号
R383 [医药卫生—医学寄生虫学]
下载PDF
职称材料
题名
两种佐剂对日本血吸虫重组抗原SjGST-Sj32保护效果的影响
被引量:
5
2
作者
蔡春
易新元
曾宪芳
周金春
舒新华
l.mcreynolds
机构
湖南医科大学寄生虫学教研室
New England Biolabs
出处
《中国人兽共患病杂志》
CSCD
北大核心
2000年第2期46-49,共4页
文摘
目的比较弗氏完全佐剂(FCA)与单磷脂A(MPL)的免疫增强作用,为提高重组SjGST-Sj32(SjGST-Sj32)的疫苗效果提供依据。方法SjGST-Sj32加弗氏完全佐剂(SjGST-Sj32+FCA)或单磷脂A(SjGST-Sj32+MPL)免疫小鼠3次,ELISA法检测抗体水平,用减虫率及减卵率表示保护性作用。结果与PBS对照组相比,SjGST-Sj32加FCA或MPL,免疫BALBC/c小鼠减虫率分别为48.8%(P<0.01)和44.1%(P<0.01);每克肝卵(LEPG)减少率分别为59.4%(P<0.01)和46.2%(P<0.01);SjGST-Sj32+FCA组抗体滴度达1:204800(P<0.05),而SjGST-Sj32+MPL组抗体滴度为1:51200(P<0.05)。结论FCA和MPL均可以增强对SjGST-Sj32免疫小鼠的抗感染保护性免疫力;FCA也可增强SjGST-Sj32诱导小鼠抗生殖免疫,而MPL似不具明显增强SjGST-Sj32的抗生殖免疫作用。佐剂MPL在提高免疫小鼠体液免疫应答方面稍逊于经典佐剂FCA。
关键词
日本血吸虫病
重组抗原
完全弗氏佐剂
单磷脂A
Keywords
Schistosoma japonicum
Recombinant protein
Freund's complete adjuvant
Monophosphoryl lipid A
Vaccination
分类号
R532.21 [医药卫生—内科学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
日本血吸虫新抗原基因的筛选、克隆、表达和免疫效果研究
陈利玉
易新元
曾宪芳
蔡春
l.mcreynolds
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2005
7
下载PDF
职称材料
2
两种佐剂对日本血吸虫重组抗原SjGST-Sj32保护效果的影响
蔡春
易新元
曾宪芳
周金春
舒新华
l.mcreynolds
《中国人兽共患病杂志》
CSCD
北大核心
2000
5
下载PDF
职称材料
已选择
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