脂肪酶lipAB操纵子在防御假单胞菌中的克隆、表达及活性研究

对荚壳伯克氏菌PG1(Burkholderia glumae PG1)基因组中的脂肪酶操纵子lipAB片段进行直接克隆,构建含有脂肪酶基因的分泌表达载体,实现其在防御假单胞菌Pf-5(Pseudomonas protegens Pf-5)中的异源表达,并研究重组工程菌的胞外脂肪酶活性。利用Red/ET直接克隆技术获得克隆载体p15A-cm-lipAB;再通过亚克隆技术构建重组表达载体pBBR1-km-lipAB和pBBR1-km-Papra-lipAB,将这两个表达载体分别电转至Pf-5中,通过卡那霉素或者阿伯拉霉素抗性筛选得到转化子,以三丁酸甘油酯平板扩散法和对硝基苯酚法检测脂肪酶酶活,并通过实时荧光定量PCR检测启动子的替换对lipA表达的影响。本研究从PG1中成功克隆了脂肪酶操纵子lipAB(GenBank accession number:AJK49931. 1 and AJK49932. 1);成功构建了重组工程菌Pf-5/pBBR1-km-lipAB和Pf-5/pBBR1-km-Papra-lipAB,并成功检测到两株工程菌的胞外脂肪酶活性;以LB培养基培养至24 h时,启动子优化后lipA基因表达量是原始水平的2. 1倍;在LB培养基摇瓶发酵至66 h时,Pf-5/pBBR1-km-lipAB的脂肪酶酶活最高且为13. 51 U/mL,而Pf-5/pBBR1-km-Papra-lipAB的酶活为46. 85 U/mL,是Pf-5/pBBR1-km-lipAB的3. 47倍。初步实现基因lipA在Pf-5中的表达,发现组成型启动子Papra比lipAB的原始启动子PlipAB效率更高,为将来实现规模化生产奠定了技术基础。

新《公司法》若干重要问题解读(笔谈)

新《公司法》修订所涉及的内容非常丰富,修订内容包括公司登记制度、股东出资责任、公司治理制度、公司资本制度、控股股东义务、董监高信义义务等方面。赵旭东教授指出,本次《公司法》修订在公司登记与信息公示制度、股东出资责任和法律后果、公司资本制度、公司治理制度、股东权益保护和控股股东义务这五个关键领域实现了重大突破和创新。周林彬教授集中解析了“国家出资公司组织机构的特别规定”一章,认为新《公司法》的亮点之一是通过新设这一章积极回应了我国国有企业治理的“本土实践”与“中国问题”,给出新时期国有企业治理的“中国方案”,推进了中国特色的国有企业治理制度的设计,重塑了国有企业的规范体系。刘凯湘教授对本次《公司法》修订中与公司资本制度相关的若干条文展开解析,包括限期认缴制、新增有限公司股东出资义务加速到期制度、股东违反出资义务的责任承担规则、董事会的催缴出资义务、股东失权制度、董监高对股东抽逃出资的连带责任、类别股的规定、授权资本制等。赵万一教授深入探讨了这次《公司法》修改的主要特点,认为新《公司法》既坚持了其商法属性,同时又充分考虑了《民法典》的既有制度内容,适当兼顾了与《民法典》之间的制度衔接关系,从而既为科学解决民法与商法的关系提供了理念和制度支持,也为中国式法律制度体系的创建提供了完美的立法实践样本。周友苏教授深入解析了新《公司法》在完善股东出资制度方面增加的股东出资缴纳、股东出资“加速到期”、股东失权、股东出资责任这四条新规定,认为新《公司法》在完善股东出资制度方面增加的这些新规定,积极回应了我国自2013年以来公司数量大幅增长所带来的股东盲目认缴、天价认缴、期限过长的现象突出,损害债权人利益的纠纷案件呈明显上升态势等问题,极大地强化了保护债权人的力度。李建伟教授深入解析了《公司法》修订中与法定代表人制度相关的若干条文,认为新《公司法》关于法定代表人的规定较之以往更加体系化,并有望基本解决困扰公司实践许多年的诸多难题,但其中亦存在不完全规范的问题。

基于生物信息学探讨犀角地黄汤治疗银屑病的作用机制

目的运用生物信息学方法筛选银屑病炎症相关的特征基因并探索犀角地黄汤的干预机制。方法从GEO数据库中筛选包含银屑病皮损及正常对照的数据集。从GSEA数据库中获得炎症相关基因。使用limma包筛选出差异表达基因并与炎症相关基因取交集获取差异表达的炎症相关基因(differentially expressed inflammation-related genes,DEIRGs),并对DEIRGs进行基因本体论(gene ontology,GO)和京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)通路富集分析。通过加权基因共表达网络分析(weighted geneco-expression network analysis,WGCNA)和最小绝对值收敛和选择算子(least absolute shrinkage and selection operator,LASSO)回归筛选出银屑病炎症相关的特征基因,并进行受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC)检验。检索TCMSP、TCMID数据库,筛选犀角地黄汤活性成分和靶点,与DEIRGs取交集得到有效作用成分和有效靶点。然后,通过Pubchem、PDB数据库获取相关结构文件,再利用swissdock数据库进行分子对接并计算结合能。结果本研究共筛选560个差异表达基因和20个DEIRGs。GO和KEGG富集分析共得到779条生物功能和37条通路。WGCNA分析共筛选出483个基因,与20个DEIRGs取交集得到9个银屑病核心炎症反应基因,通过LASSO回归筛选出6个与银屑病发病高度相关的炎症反应特征基因,分别为CXCL10、F3、NMI、P2RY2、RTP4和TPBG。ROC曲线显示各个基因的曲线下面积(area under curve,AUC)均>0.9,LASSO回归模型的AUC为1。将犀角地黄汤的中药成分采用网络药理学检索解析后发现赤芍中的活性成分鞣花酸(ellagic acid)可作用于CXCL8,芍药苷(paeoniflorin)可作用于IL-6;牡丹皮中的活性成分栎精(quercetin)可作用于CXCL8、IL-6、F3和CXCL10。结论CXCL10、F3、NMI、P2RY2、RTP4和TPBG可能是银屑病的炎症相关特征基因,预测犀角地黄汤中的赤芍、牡丹皮有作用于银屑病相关特征基因的成分,可为后续药物研究提供参考。

西安市城市轨道交通站点功能演变及影响因素

城市轨道交通站点功能是城市土地利用状况和空间活力的综合反映,轨道交通站点与城市用地的协调发展对于缓解交通拥堵压力、提高土地利用效率具有积极的作用。运用信息熵、优势度、均衡度和多元回归模型,分析2011—2020年西安市中心城区轨道交通站点功能演变及影响因素。结果表明:西安市城市轨道交通站点功能呈现波动上升、中稳外变和混合主导的演变特征,商服功能、到城市中心的距离是城市轨道交通站点功能演变的主要因素,其中,商服功能对城市轨道交通站点功能的混合度呈正向影响,到城市中心的距离对城市轨道交通站点功能的混合度呈负向影响。规划期城市空间格局对城市轨道交通站点功能具有重要影响,建设期地区经济水平成为关键因素,运营期商业服务业则成为推动城市轨道交通站点功能演变的主要力量。基于城市轨道交通站点功能演变的时空分异和影响因素探究,有助于优化城市轨道交通站点周边区域土地利用和提升城市轨道交通站点活力。

预付式消费及押金制度的规则理解与适用

一、规则确立的背景及目的消费模式随着经济发展不断更新迭代,以预付式消费和押金制度为代表的创新型消费模式作为市场自主设计的产物,因符合需求而迅速扩张,却也不可避免地存在“野蛮生长”的问题。相较于传统的消费模式,预付式消费与押金制度共有的特点是消费者依约将一定资金预先放置于经营者处。如此,无论是为了此后金钱给付义务的履行抑或担保,消费者均让渡了对资金的控制权而过度依赖于经营者后续的诚信履约。

信义义务体系化设计的公司法方案

新修订的《公司法》极大地完善了勤勉义务、忠实义务的内涵及外延,但仍缺乏对信义义务的一般规定,这导致信义义务的理据不足,使得司法适用中存在诸多困难,主要体现在忠实义务与勤勉义务的类型分化不足、违信责任路径紊乱以及认定标准不清晰。为厘定信义义务的基本范畴,应当构建“一般条款+具体规则”的信义义务体系。具言之,设置信义义务的一般条款统摄、充实忠实义务与勤勉义务的具体规则,整合禁止权利滥用和合规经营义务规则,以阐明信义义务体系化的必要性与正当性,实现信义义务的体系化构建。

基于GA-LSTM自适应卡尔曼滤波的路面不平度识别

准确、快速地识别出车辆当前行驶的路面激励信息,是实现智能底盘控制进而保证车辆平顺性的关键。针对传统路面不平度识别算法准确率低、自适应性差等问题,提出了基于遗传算法(genetic algorithm,GA)优化长短期记忆神经网络(long short-term memory networks,LSTM)自适应卡尔曼滤波的路面不平度识别算法。基于2自由度车辆悬架模型,通过灰色关联法选择LSTM神经网络的特征输入变量,并采用GA优化LSTM神经网络的模型参数以准确识别路面等级,并据此实时更新卡尔曼滤波器算法中的噪声矩阵,实现了在复杂路况下对路面不平度的自适应识别。仿真和试验研究表明,所提出的基于GA-LSTM自适应卡尔曼滤波算法能够快速准确的识别路面不平度与路面等级,与传统卡尔曼滤波算法相比,相关系数、均方根误差和最大绝对误差分别提高3.11%、37.5%和51.2%,表明所提算法对复杂工况具有很好的自适应能力。

法定代表人涤除登记制度的创新与展望

法定代表人在组织法上具有法定性和唯一性的特征,若原法定代表人辞任后,公司迟迟不能选任新的法定代表人,原法定代表人的正常涂销登记存在制度性障碍,只能寻求涤除登记。但新公司法并未提供涤除登记的直接规范依据。为此,需要在新公司法的框架内寻求妥当解释路径,为涤除登记之诉续造裁判依据与商事登记依据。一方面,新公司法虽然极大革新了法定代表人的辞任制度,但对于留任期限问题仍有待完善,应将及时选任新法定代表人纳入董事勤勉义务范围,督促公司及时选任,以平衡法定代表人单方辞任权与公司登记适法性之间的张力。另一方面,涤除登记之诉的制度性构造,需要建立民事诉讼、行政诉讼与公司登记执法的协同机制,包括确立涤除登记为独立的商事登记类型,实现行政诉讼、民事诉讼生效判决与登记机关行政行为的衔接,确保原法定代表人离任的自治意思得以及时实现,实现私法正义。

论公司法规制国家出资公司的口径与路径

新修订的公司法增加了第七章“国家出资公司组织机构的特别规定”,实现公司法对国家出资公司的规制体例编排“从节到章”、条款数量“从少到多”以及适用范围“从国有独资到国家出资”的重要进步,相当程度上克服了原公司法中存在的规制理念陈旧、口径局限、路径紊乱等缺陷。但新公司法仍存在规制口径模糊、组织规范制度供给不足等痼疾,需要进一步校准国家出资公司的规制口径,将国有独资公司的全资子公司纳入其中,保证规制逻辑的周延性;继续改进规制路径与立法技术,通过引致技术简化关联部门法的重复性规定,增加具有制度特色的治理规则供给,包括完善党组织条款,细化外部董事条款,鼓励并引导国有控股公司章程设置赋权性的差异化治理条款,以提升公司法的适应性品格。

椎体压缩性骨折患者术后运动康复的循证护理实践

目的:检索、总结椎体压缩性骨折患者术后运动康复的证据,制定审查指标,实施并评价其临床应用效果。方法:以基于证据的持续质量改善模型为研究框架,于2022年12月至2023年3月通过证据获取、现状审查、证据引入,构建椎体压缩性骨折患者术后运动康复的循证方案;便利选取2023年3月—8月在青岛市某三级甲等医院脊柱外科行手术治疗的椎体压缩性骨折患者59名及科室护士20名为研究对象,比较应用运动康复循证实践证据前后2组患者的满意度、生存质量和功能障碍指数得分,同时比较循证实践证据应用前后运动康复相关审查指标的执行率及护士运动康复知识水平变化。结果:证据应用后,循证实践组患者满意度、生存质量得到提升(P<0.001)、功能障碍指数下降(P<0.001)、运动康复相关审查指标的执行率和护士康复知识水平得分均较应用前提高(t=-15.873,P<0.001),差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:基于证据的椎体压缩性骨折患者术后运动康复方案临床应用切实可行,有效促进了护士专业知识的提升以及临床管理行为的落实,同时对于提高椎体压缩性骨折患者满意度、改善术后生存质量、降低功能障碍程度具有重要意义。

大城市工业用地布局演变中的城市问题研究——以西安市为例

改革开放以来在我国经济转型过程中大城市工业用地的规模和布局发生了巨大变化,并影响城市的空间形态。以西安市为例,基于多源数据,采用定量与定性相结合方法,研究发现1974—2019年西安市工业用地面积呈先持续增长后快速减少变化趋势,空间布局在园区化集聚的过程中具有显著的工业用地郊区化与城市中心用地去工业化特征,布局模式则经历了由改革开放初期“组团布局+扇形扩展”向增量规划时期“圈层扩展+跳跃扩张+轴向集聚”至存量规划时期“外围园区化集聚”转变。帮助企业纾困、城市增长、生活居住条件改善与土地经济价值是推动工业用地布局演变的主要驱动力。工业用地郊区化与城市中心去工业化加剧了职住分离、交通拥堵等城市问题,不利于城市健康可持续发展。

参麦注射液治疗冠心病慢性心力衰竭

目的探究参麦注射液治疗冠心病慢性心力衰竭(CHD-CHF)临床疗效及对左心功能、血清因子、血清凝血指标的影响。方法选择冠心病慢性心力衰竭患者118例,随机数表法分为观察组与对照组,各59例。对照组予阿托伐他汀钙片治疗,观察组在对照组基础上联合参麦注射液治疗,2组均治疗1个月。比较2组临床疗效,治疗前后左心功能、血清因子、血清凝血指标水平变化,治疗期间不良反应发生情况。结果观察组临床疗效总有效率(91.53%,54/59)高于对照组(72.88%,43/59)(P<0.05)。治疗后,2组血清脑钠肽(BNP)、神经肽Y(NPY)、肌酸激酶同工酶-MB(CK-MB)、粒膜蛋白140(GMP-140)、血管性血友病因子(vWF)、纤维蛋白原(FIB)、D-二聚体(D-D)水平及左心室收缩末期内径(LVESD)、左室舒张末期内径(LVEDD)水平均较治疗前下降,且观察组低于对照组(P<0.05);2组左心室射血分数(LVEF)水平均较治疗前升高,且观察组高于对照组(P<0.05)。观察组不良反应发生率低于对照组(P<0.05)。结论参麦注射液联合阿托伐他汀钙片治疗冠心病慢性心力衰竭患者,可降低血清BNP、NPY、CK-MB水平,调节凝血指标,改善左心功能,疗效确切且安全性高。

农业科研管理人员参与土壤三普工作的实践与思考——以江苏省农业科学院农业资源与环境研究所为例

第三次全国土壤普查是一次重大国情国力的调查,时间紧、任务重、要求严、标准高。江苏省农业科学院农业资源与环境研究所统筹调配人员以确保人员力量到位,积极动员科研管理人员参与,全力支撑土壤三普工作。文章介绍了江苏省农业科学院农业资源与环境研究所科研管理人员概况,阐述了该所科研管理人员参与土壤三普工作的实践,并从农业科研管理人员是科研事业的重要参与者、新时期需要多元化高水平复合型科研管理人才、深度参与科研事业是培养新时期科研管理人才的重要途径等方面对农业科研管理人员参与土壤三普工作展开思考。

延伸护理在老年获得性免疫缺陷综合征患者抗病毒治疗中的应用

目的探究延伸护理对提高老年获得性免疫缺陷综合征患者抗病毒治疗依从性、疗效及生活质量的影响。方法选取2015年1月-2021年12月北京佑安医院接受初始抗病毒治疗的200例老年获得性免疫缺陷综合征患者作为研究对象,按照抽签法随机分为对照组与试验组,各100例。对照组接受常规护理以及健康教育,试验组则在对照组基础上给予延伸护理。随访1年,比较两组的服药依从性、疗效和生活质量。结果随访1年时,试验组的服药依从性高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);试验组CD4+T淋巴细胞计数增幅高于对照组(P<0.05);两组治疗后病毒载量均检测不到。试验组在生活质量的生理领域、心理领域、社会关系领域和环境领域评分均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论延伸护理有利于提高老年获得性免疫缺陷综合征患者的服药依从性和抗病毒效果,提高患者的生活质量,值得临床推广及应用。

易误诊为巨人症的马凡综合征合并垂体瘤一例

马凡综合征(MFS)是一种常染色体显性遗传疾病,易伴有纤维发育不良、晶状体脱位和身高增长过快,需与巨人症鉴别。本文报道一例14岁以身高增长过快和视力受损为临床表现的MFS患者,其双眼存在典型的双眼晶状体半脱位。垂体增强MRI提示垂体微腺瘤,但生长激素和胰岛素样生长因子-1正常,排除巨人症或肢端肥大症,考虑无功能性垂体腺瘤。MFS患者需要长期的随访和多学科协作,注意心血管系统的监测和基因检查等,有助于患者的疾病诊疗与风险防控。

碳关税的跨国影响及政策应对研究

本文深入探讨了碳关税的内涵实质和作用机制,总结了国际实践进展,在此基础上运用GTAP-E模型以及141个国家(地区)、65个行业的基础数据,模拟分析了碳关税在不同实施方式、不同国际博弈情景下的跨国效应,结合我国实际探讨了应关注的问题,并提出政策建议。研究发现:碳关税是低碳转型发展下的“规则之争”,发达国家以减少碳泄漏、营造公平竞争环境为由推进碳关税,但实质上是在执行气候单边主义、构建绿色贸易壁垒、争夺全球应对气候变化主导权,对目标国的国际贸易、产出、福利、碳减排、金融等多个方面产生影响;对我国影响方面,碳关税兼有贸易抑制和贸易转移双重效应,对高碳行业和低碳产业分别产生负面冲击和溢出效应,静态看影响有限,但动态看会随着征税范围拓宽、税率提高以及碳核算方法趋严而增强;在国际影响方面,碳关税将加剧国际不平等,并导致全球贸易条件恶化,改变国际贸易格局;在国际应对方面,相比于发达国家建立碳关税同盟和发展中国家进行贸易反制,加强国际合作、形成阶梯碳价是一种相对优势策略;我国在应对碳关税方面开展了内容丰富的实践,但在碳关税中长期动态影响应对、碳关税国际博弈、碳关税与“双碳”政策协调、金融服务供给以及相关基础设施建设等方面还面临挑战。结合我国实际,本文从加强政策研判和综合应对、主动开展国际对话磋商、加快高碳行业低碳转型、推动绿色金融和转型金融有效衔接以及健全完善碳排放权交易市场体系等方面提出政策建议。

Metallogenic Dynamics of Zhashui Ag－Pb Polymetallic Ore Deposit in Shaanxi，China

Zhashui Ag-Pb polymetallic ore deposit is located in northern Qinling geosyncline. In this paper, its geological features and metallogenic background are introduced. The volcanic dynamics,physical-chemical conditions of metallogeny and ore-forming experimental simulation are discussed in detail. Based on the existence of paleovolcanic activity, the protolith characters and geochemistry of ore-bearing rock series, the authors study the law of volcanic activity in Middle Devonian period. The Physical-chemical conditions of metallogeny. including temperature, pressure, pH and Eh of mineralizing solution, are also determined. The evolution of salinity, f(O2), pH, M (H2S), M(SO2-4) (M is mole fraction of certain component ), t (temperature) and a(ionic activity)of mineralizing solution suggests that the mineralization was a long-term dynamic process. Finally, the metallogenic pattern is established.

不同比例聚2,5-呋喃二甲酸乙二醇酯(PEF)对聚对苯二甲酸乙二醇酯(PET)性能影响分析

本文通过对使用不同比例生物基聚2,5-呋喃二甲酸乙二醇酯(PEF)共混的聚对苯二甲酸乙二醇酯(PET)进行性能改善,研究了PEF对PET的力学性能、水蒸气透过率、氧气透过率和玻璃化转变温度(Tg)的改善效果。力学性能表明:随着PEF含量的增加,PET的力学性能有一定程度增加;阻隔性测试表明,PEF对PET阻隔性能有着较明显的提升;玻璃化转变温度的测试结果表明:PEF较PET的玻璃化转变温度高,耐热性能好。另外使用电镜分析PEF和PET共混相容效果,表明两种材质有极好的相容性。

梅州苏区革命山歌发掘整理与云平台信息资源组织建设研究

阐述信息时代面向“红色+”教育的革命山歌、曲谱、红色故事的搜集整理原则和数字资源开发思路,探讨服务云平台建设及信息资源分类方法,以多视角展现独具客家文化特色的革命山歌的宣传教育价值,深层揭示其蕴含的红色基因。

基于三阶段最小二乘法的甘肃省科技创新与高质量发展相互作用研究

科技创新是影响甘肃实现高质量发展的关键与核心。文章首先对高质量发展、创新驱动与科技创新三者的关系进行了阐述,然后通过分别以高质量和科技创新为被解释变量的2个估计方程构建联立方程模型,最后基于三阶段最小二乘法(3SLS)对模型进行估计,对2011-2021年甘肃省高质量发展、科技创新的相互作用进行了实证研究。结论:2011-2021年,甘肃省科技创新与高质量发展之间存在联合内生性,具有相互促进的正相关关系;甘肃省科技创新与高质量发展之间,处于低效率下的均衡状态。