CaMKK2调控肝细胞癌化疗耐药性的作用和机制

目的 探讨钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶激酶2(calcium/calmodulin-dependent protein kinase kinase 2,CaMKK2)调控肝细胞癌(hepatocellular carcinoma, HCC)化疗耐药性的作用及其机制。方法 (1)为了检测CaMKK2在HCC耐药细胞株中的表达变化,将实验分为亲本组和耐药组。采用浓度梯度递增法建立奥沙利铂(oxaliplatin, OXA)耐药细胞株MHCC97H/OXA和Hep3B/OXA。采用Western blot检测CaMKK2的磷酸化和总蛋白表达水平。(2)为了检测CaMKK2对肝细胞癌化疗药性的调控作用,将实验分为对照组和CaMKK2敲除组。采用CRISPR/Cas9技术敲除MHCC97H/OXA和Hep3B/OXA细胞株中的CaMKK2基因表达,采用Western blot验证CaMKK2敲除效率。采用细胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8,CCK-8)实验检测CaMKK2敲除对MHCC97H/OXA和Hep3B/OXA细胞株细胞存活率的影响。采用流式细胞术检测CaMKK2敲除对MHCC97H/OXA和Hep3B/OXA细胞株凋亡的影响。采用Western blot检测CaMKK2敲除对微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein 1 light chain 3,LC3)、p62、腺苷酸活化蛋白激酶(adenosine 5′-monophosphate-activated protein kinase, AMPK)和UNC-51样激酶1(UNC51-like kinase 1,ULK1)蛋白表达水平的影响。(3)为了验证CaMKK2对肝细胞癌化疗药性的调控作用,将实验分为CaMKK2敲除+空载体组和CaMKK2敲除+CaMKK2载体组。采用Western blot检测CaMKK2的蛋白表达水平。采用CCK-8实验检测重新表达CaMKK2对CaMKK2敲除的细胞耐药性的影响。采用Western blot检测重新表达CaMKK2对CaMKK2敲除的细胞中AMPK、ULK1和LC3蛋白表达水平的影响。结果 (1)与亲本组相比,耐药组HCC细胞株中CaMKK2的总蛋白表达水平无显著变化(P>0.05),而CaMKK2的磷酸化水平显著升高(P<0.01)。(2)与对照组比较,CaMKK2敲除组细胞中CaMKK2表达水平显著减少(P<0.01)。与对照组比较,CaMKK2敲除组HCC耐药细胞对OXA的敏感性显著提高(P<0.05),OXA细胞凋亡率显著升高(P<0.01)。与对照组比较,CaMKK2敲除组LC3Ⅱ/LC3Ⅰ显著降低,p62蛋白水平显著升高,p-AMPK/AMPK以及p-ULK1/ULK1显著降低(均P<0.01)。(3)与CaMKK2敲除+空载体组比较,CaMKK2敲除+CaMKK2载体组HCC耐药细胞对OXA的敏感性显著降低(P<0.01),LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、p-AMPK/AMPK和p-ULK1/ULK1显著升高(P<0.01)。结论 基因敲除CaMKK2有效逆转HCC化疗耐药性,其作用机制与调控AMPK/ULK1介导的自噬通路相关。

冷轧板边部表面色差缺陷原因分析及改进措施

针对生产st13镀锌用冷轧板边部表面色差缺陷问题,对热轧板和酸洗板表面粗糙度进行了检测分析,结果表明,热轧板边部与中间部位的表面粗糙度差异大是边部表面产生色差的主要原因。结合热轧板横断面的铁皮厚度,分析了钢板表面粗糙度差异大的原因。根据实际生产情况,调整冷轧末机架轧机负荷和优化板形,改善钢板表面的色差缺陷,通过合理匹配热轧卷取温度和层流冷却模式,解决了st13钢板表面的边部色差问题。

管理学视角下饲料企业工作绩效的影响因素及提升策略

作为农业产业的组成部分,饲料企业的经济效益、战略目标、管理水平都直接关系到整个产业链的稳定发展。而工作绩效是管理学的重要概念,主要用于反映一定时期内的工作成绩和成效。在饲料企业内部,持续提升工作绩效就是要从员工的行为、方式、结果等角度入手,制定相应措施,以便更好地预测员工所能取得的工作成绩和成效。为此,本文从管理学视角出发,对工作绩效的重要性和影响因素进行深入分析,并提出了饲料企业工作绩效的提升策略,从而为饲料企业的可持续发展奠定坚实的基础。

基于网络药理学及实验验证探讨除风益损汤治疗角膜损伤机制

目的采用网络药理学结合实验验证方法研究除风益损汤治疗角膜损伤的机制。方法通过TCMSP、TCMID数据库获取除风益损汤组方药物活性成分及相关靶点,通过GeneCards、OMIM、TTD、NCBI-Gene数据库查找角膜损伤相关靶点。建立中药-活性成分-关键靶点网络,分析除风益损汤治疗角膜损伤的主要活性成分,并通过蛋白相互作用网络预测核心靶点。采用CCK-8法筛选除风益损汤含药血清促进细胞生长的最佳浓度,Westernblot检测自噬相关蛋白LC3、LAMP1及ERK2表达。结果除风益损汤治疗角膜损伤的主要活性成分为山柰酚、汉黄芩素、槲皮素及芍药苷,核心靶点为AKT1、TP53、MAPK1、JUN及TNF。除风益损汤含药血清干预人角膜成纤维细胞可升高LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值及LAMP1蛋白表达,降低ERK2蛋白表达,符合网络药理学预测。结论除风益损汤通过多成分、多靶点、多通路治疗角膜损伤,其促进自噬治疗角膜损伤的机制是通过下调ERK2表达、上调LC3和LAMP1表达实现的。

常见水生植物对氮磷营养盐的利用和蓄积

以风车草(Cyperus involucratus Rottboll)、菖蒲(Acorus calamus)、美人蕉(Canna indica)、凤眼莲(Eichhornia crassipes)、苦草(Vallisneria natans)和金鱼藻(Ceratophyllum demersum)6种水生植物为研究对象,采用常规耗竭法分析其养分吸收动力学特征,探究水生植物对水体氮磷的利用和蓄积能力,同时还探讨了硫累积及水体pH对水生植物吸收氮磷的影响。结果表明:挺水植物对氮磷营养盐的利用和蓄积能力高于其他水生植物;其中美人蕉对水体总氮(total nitrogen,TN)和总磷(total phosphorus,TP)的蓄积量最多,达到40.95 mg和5.83 mg,菖蒲的最大吸收速率(I_(max))比其他水生植物更高,分别为1.428 mg·g^(-1)·d^(-1)和0.313 mg·g^(-1)·d^(-1);挺水植物对水体TN和TP去除率均超过85%,贡献率达到80%。硫的累积不利于水生植物对氮磷的蓄积和利用;美人蕉对硫的累积量最少,其对氮磷的去除率在6种植物中最高,达到92.29%和86.24%。水生植物在生长过程中会改变水体的pH,而水体pH又会反过来影响水生植物对氮磷的吸收和蓄积。综上可知,挺水植物具有较好氮磷利用与蓄积能力,培养环境中过多的硫及过低的pH均会降低水生植物对氮磷的利用和蓄积。

肝癌细胞系中circAMOTL1的表达及对肝前体细胞增殖和恶性转化的影响

目的探讨环状RNA circAMOTL1在肝癌细胞系中的表达及其对肝前体细胞(HPCs)系WB-F344的增殖迁移及恶性转化的影响。方法通过实时荧光定量PCR检测circAMOTL1在5种肝癌细胞系和正常肝细胞系L-02以及HPCs系WB-F344中的表达;同时构建过表达和敲除circAMOTL1的WB-F344的细胞系;通过CCK-8实验检测过表达或敲除cAMOTL1后HPCs的增殖变化;细胞划痕实验验证细胞迁移的变化;通过蛋白免疫印迹实验验证过表达或敲除circAMOTL1后对肝癌干细胞(LCSCs)标志物CD133的表达影响。结果5种肝癌细胞系中circAMOTL1的表达水平均高于L-02(P<0.05);过表达circAMOTL1后HPCs的增殖能力显著提高(P<0.01),敲除circAMOTL1后细胞的增殖能力显著下降(P<0.001);过表达circAMOTL1后显著提升了细胞的迁移能力(P<0.01),敲除后细胞的迁移能力明显下降(P<0.01);过表达circAMOTL1后可以检测到CD133的表达。结论circAMOTL1在5种肝癌细胞系中高表达,过表达circAMOTL1可以促进HPCs的增殖和迁移能力,诱导其向LCSCs方向恶性转化。

基于ABC⁃X模型的结直肠癌术后造口病人康复护理干预方案的构建与应用

目的:基于ABC-X模型构建结直肠癌术后造口病人康复护理干预方案并探讨其应用效果。方法:通过参考国内外文献、专家函询、课题组讨论及预试验,基于ABC-X理论模型构建结直肠癌术后造口病人康复护理干预方案。经两轮德尔菲专家函询,最终构建了包括5个一级指标、18个二级指标和38个三级指标的基于ABC-X模型的结直肠癌术后造口病人康复护理干预方案。选取2022年2月—2023年2月于华北理工大学附属医院、唐山市工人医院、唐山市人民医院住院的结直肠癌术后96例造口病人,分为试验组48例和对照组48例,对照组实施常规护理,试验组在常规护理的基础上实施基于ABC-X模型的结直肠癌术后造口病人康复护理干预方案,比较两组病人结肠造口压力、肠造口自我管理能力及造口病人生活质量。结果:干预过程中,试验组脱落3例,对照组脱落2例,最终试验组45例,对照组46例。干预8周后,试验组身体状况改变所致压力、自我概念改变所致压力、结肠造口护理所致压力均较对照组降低(P<0.05),造口护理管理、信息管理、症状管理、日常生活管理及心理管理得分均较对照组提高(P<0.05),病人社会交往、造口袋对病人的影响、与家属和朋友的关系及身心状况改善均优于对照组(P<0.05)。结论:构建的基于ABC-X模型的结直肠癌术后造口病人康复护理干预方案科学可行,应用该方案能有效降低造口病人压力,提高病人肠造口自我管理能力及生活质量。

辽宁5座水源地水库底栖动物群落结构特征比较

为探究辽宁省5座水源地水库—观音阁、白石、柴河、清河和汤河水库底栖动物的群落结构特征,并根据底栖动物的现存量估算鱼产潜力,为这5座水库保水渔业的放养捕捞提供科学依据,于2019-2020年开展季节性调查,共检出底栖动物67种,其中,节肢动物52种,以摇蚊幼虫为主,有39种;寡毛类12种,主要为颤蚓和仙女虫;软体动物3种,分别为观音阁和汤河水库检出的椭圆萝卜螺,以及观音阁和白石水库的梨形环棱螺和褶纹冠蚌。检出种类以汤河水库最多,39种,其次为观音阁水库34种,白石水库最少,仅23种。密度以白石水库最高,1546.89 ind/m^(2),其次为观音阁水库658.33 ind/m^(2),汤河水库最低,481.92 ind/m^(2)。生物量以白石水库最高,7.76 g/m^(2),其次为汤河水库5.68 g/m^(2),清河水库最低,2.49 g/m^(2)。5座水库密度在春、夏、秋季均可出现峰值,但最低值皆出现在夏季;生物量则以春、冬季较高,夏、秋季较低。各库密度和生物量总体表现为静水区最高,仅观音阁水库密度和生物量、白石水库生物量峰值出现在过渡区。观音阁和柴河水库河流区至坝前密度和生物量总体以寡毛类为主,而入水口以摇蚊幼虫占比最高;清河水库和汤河水库入水口至静水区密度和生物量总体以摇蚊幼虫为主,而坝前均以寡毛类占比最高;白石水库入水口至过渡区主要为摇蚊幼虫,坝前静水区以寡毛类为主。群落聚类与MDS排序结果显示,观音阁、柴河和清河水库群落较为相似,而白石水库和汤河水库群落相似性较低,且与观音阁、柴河和清河水库差异明显。CCA结果显示,水深、总氮、氨氮、DOC、叶绿素a含量是5座水库影响底栖动物密度的关键因子。底栖动物种类组成受总氮、氨氮影响明显,汤河水库总氮、氨氮含量最低,表现为种类最多,摇蚊幼虫优势地位高;白石水库中总氮、氨氮含量最高,表现为种类最少,水丝蚓优势地位高。基于底栖动物估算的鱼产潜力白石水库最高,汤河水库次之,清河水库最低。与以往调查数据相比,5座水库种类数均增加,主要是检测出的摇蚊幼虫种类增加;而密度和生物量表现有所不同,观音阁水库密度和生物量均降低,而清河和汤河水库均增加,白石水库则密度增加而生物量降低,柴河水库则密度降低而生物量增加。以上结果表明,应根据这5座水源地水库底栖动物群落结构特征,针对性地管理底栖动物食性鱼类的放养和捕捞。

不同骨强度下全膝置换过程中发生股骨前皮质切迹的三维有限元分析

背景:全膝关节置换后发生膝关节股骨假体周围骨折是常见并发症之一,目前对不同骨质强度条件下发生膝关节股骨假体周围骨折的生物力学研究欠缺,三维有限元分析可为临床提供生物力学基础。目的:探讨不同骨质强度下全膝关节置换过程中发生股骨前皮质切迹的生物力学变化,为临床预防膝关节置换后发生膝关节股骨假体周围骨折提供力学理论基础。方法:获取健康成年人的股骨CT数据,运用Mimics、Geomagic studio、Solidworks软件建立膝关节股骨侧置换三维模型,然后构建不同深度的股骨前皮质切迹模型,将模型导入到ANSYS软件并分析不同骨强度、不同股骨前皮质切迹深度对股骨髁上生物应力的影响,并分析股骨前皮质切迹骨水泥填补前、后的股骨前髁截面应力变化。结果与结论:①任何骨质强度下,髁上应力都随股骨前皮质切迹深度加深而增加;在正常骨质情况下,当股骨前皮质切迹深度在3 mm和4 mm间有一个应力突变点;在骨质疏松情况下,当股骨前皮质切迹深度在2 mm和3 mm间有一个应力突变点;②膝关节置换过程中发生股骨前皮质切迹且深度超过骨皮质厚度时,随着骨质强度降低,股骨髁上应力逐渐增大;③使用骨水泥填补股骨前皮质切迹深度为3 mm的模型,股骨前髁截面应力下降;④结果显示,膝关节置换过程中应该避免股骨前皮质切迹出现,特别是骨质疏松患者;如术中出现股骨前皮质切迹且深度超过骨皮质厚度时,可以采用骨水泥均匀填充股骨前皮质切迹以降低股骨髁上应力,降低膝关节股骨假体周围骨折的发生率。

汤河水库亚洲公鱼人工增殖、胚胎与仔鱼发育研究

针对采捕的野生亚洲公鱼(Hypomesus transpacificus nipponensis)雄亲鱼精液量少,传统上在亚洲公鱼发眼卵阶段即放流成活率低的特点,改进了繁殖方法,采用“湿法授精+孵化篓孵化”方式,2023年3月在辽宁省辽阳汤河水库进行了亚洲公鱼人工增殖改进试验。3月19日至21日在汤河水库上游东河头采集亚洲公鱼亲鱼200 kg,获受精卵3 000万粒,受精率达83.4%,孵化率达65.4%。4月6日向水库投放1 637.6万尾仔鱼。胚胎与仔鱼显微观察:受精卵弱黏性,有黏丝。水温(10±2)℃,其胚胎发育历时429 h,孵化积温4 290℃·h。卵黄囊平均体积与日龄相关方程:V_(卵黄囊体积)=0.121 4-0.020 6d+0.000 9d~2(R~2=0.995 8)。此改进方法延长生长阶段至水花鱼苗阶段放流,提高了放流效率。

肉芽肿性炎组织中结核分枝杆菌检出方法的对比分析及应用价值

目的 探讨肉芽肿性炎组织中结核分枝杆菌常用两种检查方法[抗酸染色和荧光定量PCR(FQ-PCR)]检出效能的大小,与其他实验室检测指标的关系及临床应用价值。方法 对373例石蜡包埋的肉芽肿性炎组织行抗酸染色和FQ-PCR检测,比较两者在各种病检组织中的阳性检出率、敏感度和特异度等方面的差异,同时分析它们与其他实验室检测指标的关系。结果 373例肉芽肿性炎的病例组织中,抗酸染色阳性率为19.57%,敏感度和特异度分别为60.38%、96.63%;结核分枝杆菌DNA(TB-DNA)的阳性率为27.35%,敏感度和特异度分别为94.34%、99.25%;在确诊结核病的病例中,CT影像、涂片抗酸染色、T-SPOT.TB、γ-干扰素释放试验(IGRAs)、TB特异性细胞免疫反应等影像和实验室检查的阳性率分别为82.47%、6.45%、96.00%、80.00%、82.35%。结论 抗酸染色和TB-DNA两者在肉芽肿性炎组织中的联合检测对早期确诊结核病有重要意义,其中TB-DNA有较高的检出率和特异性,与其他实验室检测指标一起可以提高结核分枝杆菌的检出率。

基于离散元法的皂荚壳籽分离仿真与试验

针对打击式壳籽分离过程中存在皂荚壳破碎率低,以及皂荚壳易堵塞筛孔,造成壳籽分离效率低等问题,研究滚筒转速对皂荚壳籽分离的影响。通过对皂荚壳力学特性进行研究,基于离散元法建立皂荚壳离散元模型(Hertz-Mindlin with bonding),并对皂荚壳离散元模型进行粘结参数标定;得到皂荚壳粘结模型法向刚度、切向刚度、临界法向应力、临界切向应力为1.8 MPa、1.35 MPa、1.41 MPa、0.59 MPa。采用EDEM软件对皂荚壳籽分离过程进行仿真分析,仿真结果表明,在滚筒转速为200、360、400、500、1 000 r/min时,皂荚壳破碎率分别为41.7%、65.96%、88.3%、94.52%、94.8%,滚筒转速在500 r/min和1 000 r/min时,破碎率无明显变化,皂荚壳主要破碎形式为冲击破碎和挤压破碎,破碎后物料形态包括粉尘、丝状、未完全破碎3种。样机试验亦表明滚筒转速为500 r/min时,皂荚壳破碎率较高,且易于形成丝状物料,有利于皂荚壳籽分离和减小筛孔堵塞。

鞍钢1580热轧线粗轧机自由轧制生产实践

为解决热轧常规产线粗轧生产瓶颈问题,实现粗轧机组轧制工艺的自由度,结合鞍钢1580热轧线的工艺特点,在原有设备和工艺的基础上,研发应用了低碳、超低碳钢粗轧“1+3”轧制、粗轧R1轧机无间歇轧制和粗轧“5+0”轧制工艺技术,并通过工艺特性与钢种特性的匹配,解决了钢种在生产时的粗轧瓶颈问题。粗轧机组轧制自由度的轧制工艺技术应用于鞍钢1580热轧线后,在提高生产效率、降低能耗方面取得了很好的效果。

The 450 nm Up-Conversion Fluorescence of Crystalline TmP_(5)O_(14)

This paper reports the 450 nm up-conversion Buorescence of the crystalline TmP_(5)O_(14) at room temperature induced by pulsed DCM dye laser.It is iound that the up-conversion mechanism is the excited st&te absorption.

基于阴火理论探析干眼的中医内涵

脾胃学说为后世医家治疗疾病提供广泛思路,本文将以脾胃学说中的阴火理论为基础,探析干眼的中医内涵。目珠与脾胃在生理和病理上有密切联系,脾胃运化的水谷精微以及转化成的血起到濡养作用,有助于维持眼珠的正常功能;脾失健运,脾胃气虚导致阴火内盛、湿热内生、肝木亢旺、脾不统血将引起眼珠功能失常。干眼分为“热、郁、虚”3个阶段,干眼作为慢性低度炎症是由于脾胃气虚,气机升降失常,阴火内盛,灼伤阴液所致,日久累及他脏,出现严重并发症。从慢性低度炎症入手,认为阴火理论与自噬功能异常引起的炎症反应相关,慢性低度炎症引起了干眼的发病。阴火理论进一步完善了脾胃学说在干眼诊治方面的应用。

岐黄学者彭清华基于“血水同治”辨治视网膜静脉阻塞的经验

岐黄学者彭清华认为,血水互结为视网膜静脉阻塞的病机关键。其中,气血逆乱为发病的先决条件,气滞水停为发病的始动因素,最终血水互结导致视力下降、眼内出血等症。治疗上,以活血利水为基础,活血散瘀、凉血止血、利水行气、化痰通络,方选生蒲黄汤合四苓散加减;注重肝肾同治、育阴潜阳,常用天麻钩藤饮。并附验案加以阐明。

甘薯脱毒试管苗直繁种苗生产技术体系的创建

推广应用甘薯脱毒苗是目前防治甘薯病毒病、提高甘薯产量和品质的唯一有效方法。详细介绍了甘薯脱毒试管苗直繁种苗生产技术体系的创建,主要包括茎尖脱毒培养、试管苗继代扩繁、日光温室扩繁、防虫网塑料大棚扩繁及大田扩繁等技术环节,阐明了河南省甘薯脱毒试管苗直繁种苗具体生产流程,并与常规薯块育苗技术体系进行了比较。甘薯脱毒试管苗直繁种苗生产技术体系中试管苗的扩繁完全在室内进行,全年可灵活安排生产;且种苗繁育过程不经历种薯生产环节,繁育周期大大缩短,减少了种苗感染病毒病的风险,提升了种苗质量。

重氮化合物环丙烷化用多相催化剂研究进展

从重氮化合物环丙烷化用多相催化剂类型角度,将环丙烷化多相催化剂分为金属催化剂、金属负载型催化剂、络合物固载化催化剂、金属有机骨架(MOF)基催化剂等,详细介绍和评述了催化剂在活性组分、载体、固载方法、性能及作用原理等方面的研究进展。指出金属负载型催化剂制备简单,活性和选择性较高,但立体选择性差,在农药、医药领域适用性有限,更适宜应用于燃料合成领域,因此提升催化剂的稳定性和拓展金属活性组分是其发展趋势。络合物固载化催化剂具有较好的活性和立体选择性,结构与性能易于调控,但制备过程复杂,活性组分易流失,需通过优化固载方法如共价键合提高固载强度,以及优化载体孔道结构与表面基团提升载体-配体的协同作用。MOF基催化剂在环丙烷化中展现出独特的催化性能,通过机械研磨、配体掺杂、热处理等方式引入缺陷可综合提高MOF基环丙烷化催化剂性能,但需平衡活性与骨架结构的稳定性。此外,设计利于环丙烷化的手性配体并引入至MOF结构提高其立体选择性是MOF基环丙烷化催化剂的重要发展方向。

基于开口谐振环的三层高效电小天线设计

为提高电小天线的辐射效率,提出一款基于开口谐振环结构的3层小型化环形天线。天线的3层结构分为中间的馈电层和两侧的耦合层,采用电磁耦合方法实现激励。在馈电层设计了一种倒“山”形匹配网络,弥补了传统耦合馈电SRR天线存在部分反向电流的缺陷;通过加载耦合环结构实现强磁耦合,降低天线的金属损耗;在耦合层与馈电层间设计支柱固定的空气间隙,有效地降低介质损耗,从而提高辐射效率。采用电磁仿真软件对天线进行设计,并分析了介质基板对天线性能的影响。对设计的天线进行了实物研制与测试。结果表明,实测结果与仿真结果基本吻合,天线的中心频率为50.03 MHz,电尺寸为0.045λ_(0)×0.045λ_(0)×0.01λ_(0)(λ_(0)为工作波长),其在水平面内具有良好的全向性,辐射效率大于41%。

彭清华教授运用宣散退翳法治疗外伤性角膜损伤术后经验

总结彭清华教授运用宣散退翳法治疗外伤性角膜损伤术后经验。彭清华教授认为外伤性角膜损伤术后病因病机以卫外不固、风热侵袭为标,气血失和、正气不足为本。治疗上强调标本结合同治,将扶正、祛邪、退翳诸法合参,确立轻清宣透以疏散风热,调理气血以扶助正气,明目退翳以消散翳障的辨治思路,可改善临床症状,延缓病程进展,并注重精神调摄,预防疾病再发,取得良好临床疗效。