MeRIP-qPCR技术检测RNA m^(6)A甲基化修饰对t(8;21)AML细胞中KDM4B基因表达的调控作用

目的:通过MeRIP联合逆转录实时定量PCR(RT-qPCR)技术,证明WTAP介导的RNA m^(6)A修饰对伴t(8;21)急性髓系白血病(AML)细胞中KDM4B基因的直接调控作用。方法:采用靶向WTAP或KDM4B基因的短发夹RNA(small hairpin RNA,shRNA)慢病毒载体沉默t(8;21)AML细胞系Kasumi-1和SKNO-1中WTAP或KDM4B基因表达,以转染随机打乱序列(scramble)的shRNA的细胞为对照。用超纯RNA提取试剂盒(DNaseⅠ)提取细胞RNA,Magna MeRIP^(TM)m^(6)A Kit试剂盒富集甲基化修饰片段,并通过RT-qPCR检测m^(6)A甲基化修饰的RNA区域;采用蛋白免疫印迹实验(Western blot)和逆转录实时定量PCR(RT-qPCR)技术检测细胞中WTAP、KDM4B蛋白和mRNA的表达水平。采用克隆形成实验检测细胞体外克隆形成能力。结果:沉默Kasumi-1细胞中WTAP的表达后,m^(6)A甲基化修饰在KDM4B mRNA 3’UTR的富集程度显著下降(P<0.01),沉默Kasumi-1和SKNO-1细胞中WTAP的表达可显著抑制KDM4B蛋白(P<0.001)和mRNA表达水平(Kasumi-1:P<0.001;SKNO-1:P<0.01)、细胞体外克隆形成能力下降(Kasumi-1:P<0.001;SKNO-1:P<0.01)。结论:t(8;21)AML细胞系中,WTAP通过调控KDM4B基因mRNA 3’UTR的m^(6)A修饰调控KDM4B的表达,沉默KDM4B表达可以抑制t(8;21)AML细胞增殖。

配筋混凝土肋空心砖组合楼板防坠落技术应用

本着最小干预、保证文物建筑原真性、加固措施可逆的原则,在对文物建筑修缮加固方案选择上,应选择最恰当的加固方案。配筋混凝土肋空心砖组合楼板常见于建造年代较为久远的各类文物建筑中,在经历长时间使用后,容易出现肋部混凝土酥松脱落、钢筋外露锈蚀、空心砖粉化等问题,严重影响后续结构使用安全。通过加固方案适应性分析,选用“钢框架+镀锌钢丝网”组合承托式加固方案,既解决了楼板因荷载产生挠度过大的问题,又起到了防止局部块体坠落的作用,可为今后类似工程提供参考。

Fabrication of High-Quality Niobium Superconducting Tunnel Junctions

For high-quality superconducting tunnel junctions(STJs),it is necessary to reduce leakage current as much as possible.We describe the fabrication of niobium STJs using the selective niobium(Nb)etching process and various ways to minimize the leakage current.The experiment shows that the leakage current mainly comes from shorts in the tunnel barrier layer rather than those around the junction edges.Through systematic analysis of the thin film stress,surface morphology and modified junction structures,we fabricate high-quality Nb STJs with a gap voltage of 2.8 mV and a leakage current at 1 mV as low as 8.1%and 0.023%at 4.2 K and 0.3 K,respectively.

肉牛羊消化道寄生蠕虫耐药性研究进展

由于长期使用种类有限的体内驱虫药物,世界范围内肉牛羊消化道寄生蠕虫耐药性问题日益严重。本文概述了国内外肉牛羊消化道寄生蠕虫耐药性的现状及其产生机制,从基因突变、生存压力和药物使用等因素,分析了耐药基因频率升高的原因;总结了粪便虫卵减数试验、体外检测试验和分子检测等检测方法的优缺点,为科研和生产实践中的寄生蠕虫耐药性检测提供了参考;提出了科学用药建立“避难所”、研发新型驱虫药物、加强饲养管理等缓解耐药性形成的可行性措施。本文旨在引起肉牛羊产业对消化道寄生蠕虫耐药性的重视,并为精准高效进行耐药性检测和逐步减缓肉牛羊消化道寄生蠕虫耐药性提供依据,从而提升肉牛羊科学健康养殖水平,进一步推动肉牛羊产业高质量发展。

重金属累积对泽兰实蝇幼虫生长发育和保护酶的影响

为了弄清重金属通过寄主植物紫茎泽兰累积后对专性寄生天敌泽兰实蝇的生理影响,采用模拟Cd^(2+)、Pb^(2+)或Zn^(2+)污染的土壤培养法胁迫紫茎泽兰,让泽兰实蝇低龄幼虫寄生取食,利用原子吸收分光光度法测定泽兰实蝇老熟幼虫中Cd^(2+)、Pb^(2+)或Zn^(2+)的含量,同时测定分析泽兰实蝇老熟幼虫的体长、鲜重、能量物质和保护酶的变化。结果表明,实验处理的Cd^(2+)、Pb^(2+)或Zn^(2+)均可通过紫茎泽兰传递并累积到泽兰实蝇老熟幼虫体内,引起老熟幼虫一系列生理变化:长度和鲜重降低;总糖、总蛋白和总脂的含量降低,相应的热量值也降低;超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)等保护酶的活性降低。本研究为进一步阐明重金属污染对食物链各环节的影响提供了重要的理论依据。

除草活性成团泛菌ZLSY20菌株发酵条件的优化

【目的】明确除草活性成团泛菌ZLSY20菌株的最佳发酵条件,为应用成团泛菌对紫茎泽兰进行生物防治打下基础。【方法】采用单因素试验,对一株来自泽兰实蝇幼虫消化道的成团泛菌ZLSY20菌株进行基础发酵培养基[YSP培养基、营养琼脂培养基(NA)、LB培养基、细菌基本培养基(CM)、NYBD培养基和紫茎泽兰琼脂培养基(EAS)]和发酵条件(温度16~40℃、初始pH4~9、接菌量0.05%~2.50%、通气量20~160mL/250mL、发酵时间0~72h、转速140~240r/min)筛选,并用正交试验对培养基组分及培养条件进行优化。【结果】ZLSY20菌株在YSP培养基上生长最快,细菌浓度最大;在葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖、淀粉和甘露醇6种不同碳源中,蔗糖最有利于ZLSY20菌株生长;在甘氨酸、蛋白胨、硝酸铵、胰蛋白胨和谷氨酸作氮源时,蛋白胨最有利于ZLSY20菌株生长,其次为胰蛋白胨;YSP培养基中蛋白胨1.5%、酵母膏2.0%和蔗糖2.0%时ZLSY20菌株生长最快。在不同的发酵条件下,以发酵时间24h、培养温度32℃、pH8、接菌量0.05%、通气量20mL/250mL、转速200r/min的菌株生长最好。【结论】优化方案下可有效提高ZLSY20菌株的发酵产量,建立的方案可用于快速、大批量地发酵ZLSY20菌悬液。

泽兰实蝇幼虫和虫瘿的空间分布型及抽样技术

【目的】明确泽兰实蝇幼虫及虫瘿在野外的空间分布特点,为应用泽兰实蝇对紫茎泽兰进行生物防治并提高其防治效果提供理论指导。【方法】采用棋盘式取样法在云南省昆明市呈贡区松花村旁紫茎泽兰入侵较重的区域选取3块样地进行泽兰实蝇幼虫及虫瘿的分布情况调查,通过6种聚集度指标(扩散系数、丛生指数、聚集度指标、聚块性指标、La指标和负二项分布指标)、m*-m回归模型和Taylor幂法则等研究泽兰实蝇幼虫及虫瘿种群在野外的空间分布型,并利用种群聚集均数分析幼虫及虫瘿的聚集原因。根据Iwao的理论抽样数计算公式和序贯抽样理论公式,建立理论抽样模型及序贯抽样模型。【结果】泽兰实蝇幼虫在野外均呈聚集分布,种群分布的基本成分是个体群,但个体间相互吸引;泽兰实蝇虫瘿在野外也呈聚集分布,种群分布的基本成分是个体群,但个体间相互排斥。聚集均数分析结果表明,泽兰实蝇幼虫及虫瘿的聚集原因主要由泽兰实蝇的产卵、取食等习性和环境共同引起;建立了泽兰实蝇幼虫及虫瘿理论抽样数模型:N=(9.919/m+1.033)/D2、N=(6.632/m+0.015)/D2和序贯抽样模型:T0=10n±1.9617.24n+0.4、T0=10n±1.96 6.77n+4。【结论】泽兰实蝇幼虫及虫瘿在野外均呈聚集分布,聚集原因主要由泽兰实蝇的产卵、取食等习性和环境共同引起。

云南小粒咖啡果皮果胶酶提取工艺的优化及其结构表征

果胶作为一种重要的天然植物提取物,是重要的食品添加剂,在全球有着较大的需求量。以云南小粒咖啡果皮为原材料,在单因素试验的基础上,采用响应面优化云南小粒咖啡果皮果胶的提取工艺;采用傅里叶变换红外光谱法表征粗果胶结构。结果表明,云南小粒咖啡果皮中果胶的最优工艺条件为提取温度45℃、pH 4.9、酶添加量1.5%、料液比1∶24.65,果胶提取率为(10.30±1.28)%。红外光谱结果表明,云南小粒咖啡果皮果胶是含有典型O-H、C=O、OCH、C-O-C等化学键和α-(1→6)糖苷键的吡喃多糖或呋喃多糖。

基于Meta分析的关中平原冬小麦-夏玉米施氮/磷增产效应研究

为明确施用氮肥和磷肥对关中平原冬小麦/夏玉米产量的影响及其控制因素,以公开发表的试验数据为基础,采用Meta分析法定量分析了施氮及施磷条件下,试验年份、作物品种、生育期降水量、种植密度、施氮量、灌水量、土壤质地、施磷量以及施磷比例对冬小麦-夏玉米轮作体系作物产量的影响。结果表明,就试验年份来讲,2007年以后施氮的增产效果更为稳定,这可能与品种更替和农艺措施的变迁有关。与不施氮处理相比,施氮处理夏玉米品种为郑单958、生育期降水量≥350 mm、种植密度≥60000株·hm^(-2)、灌水量≥75 mm、土壤质地为粘壤土、施氮量为151~210 kg·hm^(-2)时,夏玉米增产率最大,分别为36.92%、34.00%、18.19%、42.37%、67.88%、47.96%。施氮能够显著增加冬小麦产量,冬小麦品种为小偃22,生育期降水>230 mm,灌水量为46~75 mm,土壤质地为粉砂质粘壤土、施氮量为90~150 kg·hm^(-2)时施氮的增产率最大,分别为77.91%、79.63%、75.94%、52.06%、69.27%。施磷总量为90~150 kg·hm^(-2)、夏玉米、冬小麦施磷比例为0∶1时(磷肥全部施于小麦季),冬小麦、夏玉米单季及轮作体系总产量均表现出最佳的增产效果。施氮量、灌水量、施磷量、施磷比例、作物品种、种植密度以及土壤质地是影响施肥增产效果的主要因素,分别控制在上述范围时可使施肥的增产效果得到充分发挥,这可作为关中平原氮/磷肥合理施用的依据。

基于零信任架构的医院网络安全防护研究

目的:探求一种更加安全的网络架构,从而解决日益严峻的医院网络安全问题.方法:利用微分隔和细粒度边界策略,通过风险汇聚与分析、持续的信任评估及不断地对外部风险进行评估、对漏洞进行修复来降低医院网络的访问风险.结果:零信任安全架构应用于医院网络后,任何对医院数据的访问请求都必须经过认证、授权,提升了医院内部安全风险感知能力,显著降低了医院网络安全风险和不良事件发生的概率.结论:零信任安全架构可以解决医院现存的网络风险问题,可有效提升医院网络安全防护水平.

基于PCA-BP组合模型的股价预测分析

随着金融业数据环境的日益复杂,投资者稳定或超额投资收益难以保障。传统模型因其非线性映射能力弱而不能作为选股指导,因而面对日益突出的股票分析技术需求,新型算法的研究十分必要。运用了主成分分析法与BP神经网络模型的算法对五只个股进行预测,实现了数据的降维,良好地处理了股票市场复杂的非线性问题,并基于回测的历史数据不断更正模型得到精确度较高的PCA-BP组合模型。实际运用时还选取了数据拟合的方法,较好模拟了指标趋势,使得模型预测后的平均误差保持在极小的状态,且在短期预测上有一定的优势。

泽兰实蝇雄性附腺高通量转录组测序数据组装和分析

泽兰实蝇Procecidochares utilis Stone是恶性杂草紫茎泽兰Eupatorium adenophorum Spreng重要的专食性天敌。为进一步开发泽兰实蝇的基因资源,深入了解其遗传信息,本研究采用Illumina HiSeq 2000高通量测序技术对泽兰实蝇的雄性附腺组织进行了转录组测序,构建了转录组数据库,获得62 684 346条Clean Reads数据;拼接组装后获得89 195条Unigene数据,平均长度为898 bp;与NR、NT、KO、SwissProt、PFAM、GO、KOG七大数据库进行Blast信息比对(E-value为10-5),共获得52 743个注释基因;与NR数据库比对发现,泽兰实蝇雄性附腺转录组基因序列与瓜实蝇Bactrocera cucurbitae具有较高的同源性,为29.1%;将泽兰实蝇转录组的Unigene的功能通过与KOG数据库进行注释比对划分为25类;GO数据库注释可分为3类,即细胞组分、生物过程和分子功能,共包括65个分支;KEGG分析发现,泽兰实蝇转录组数据中按照代谢通路可分为92类,利用Blast蛋白库比对和Estscan软件进行CDS预测,获得长度大于300 nt的CDS共48 509个;通过SSR分析,共获得69 352个SSR标记,数量最高的SSR类型为单碱基重复,为47 139条,出现频率为67.97%,最少的是五碱基重复SSR,只有27条,出现频率仅为0.039%。本研究中获得的转录组信息可为今后进行泽兰实蝇分子标记的开发和关键基因的克隆及功能分析等研究提供基础数据。

贵州茅台酒股份有限公司财务分析

贵州茅台自1999年成立,现已经成为中国白酒类行业的代表。目前,五粮液依然占据很大市场份额,并且随着山西汾酒、泸州老窖、洋河等品牌对高端市场的冲击,白酒行业竞争显得尤为激烈。如此形势下,良好的财务管理对公司发展经营至关重要。论文对贵州茅台近4年的财务指标进行分析,针对贵州茅台提出了几点建议。

中国南方地区基因3型慢性丙型肝炎抗病毒治疗的疗效和安全性分析

目的研究口服直接抗病毒药物(direct-acting antiviral,DAA)不同组合的抗病毒治疗方案,治疗中国南方地区GT3型丙型肝炎病毒感染患者的疗效及安全性。方法采用回顾性研究方法,纳入40例GT3型、初治、伴或不伴(失)代偿期肝硬化的慢性丙型肝炎患者,分别接受不同的DAA治疗方案联合利巴韦林进行抗病毒治疗,包括:利托那韦增强的达诺瑞韦+索磷布韦+利巴韦林(DNVr+SOF+RBV),索磷布韦+维帕他韦+利巴韦林(SOF+VEL+RBV),索磷布韦+达拉他韦+利巴韦林(SOF+DCV+RBV)治疗12/24周。评估患者12/24周治疗结束后获得的持续病毒学应答(SVR12)、治疗过程中安全性及随访过程中出现不良事件情况。结果本研究纳入了40例GT3型的慢丙肝患者,其中20%(8/40)存在代偿期肝硬化、5%(2/40)存在失代偿期肝硬化;5%(2/40)合并肾功能异常、5%(2/40)为肾移植术后、10%(4/40)合并乙型肝炎感染。40例患者接受12周或24周治疗方案,其中以SOF+DCV+RBV方案治疗失代偿性肝硬化患者,疗程为24周,非失代偿期肝硬化患者治疗疗程均为12周。在治疗的4、12周,DNVr+SOF+RBV组病毒学应答率分别93.3%、100%,与另外两组相比病毒学应答率差异无统计学意义(P=0.644,P=0.567),在治疗结束后第4、12周的随访时,DNVr+SOF+RBV组的病毒学应答率均为100%。与另外两组相比病毒学应答率差异无统计学意义(P=0.567)。各组治疗结束后肝癌发生率以及HCV RNA复阳率之间的比较均差异无统计学意义(P=0.567,P=0.285)。结论以DNVr为基础的DAA抗病毒治疗方案,SVR12可达到100%,且安全性较高、不良反应较少。但仍需进行更大规模的研究,进一步评估以DNVr为基础的方案治疗GT3型慢丙肝患者的疗效及安全性。

CO2非混相驱微观孔喉波及特征研究

为明确CO2非混相驱波及特征与其影响因素,采用实验与数值模拟相结合的方式,对低渗岩心取样并进行CT扫描构建其二维微观孔喉模型。在此基础上,借助Comsol流体软件进行有限元计算,从微观角度对比了CO2驱和水驱的波及特征与区别,并对不同岩石润湿性下的CO2驱进行研究。结果表明:微观孔喉内水驱形成单一流通通道,油水界面分明并以活塞式驱油的方式流动,而CO2驱则形成多个流通通道,油气界面存在明显过渡段并以顶替原油的方式流动;不同的孔喉壁面润湿性会对油相流动效果产生显著影响,岩石由亲油向中间润湿性转变后油相流动效果变好,亲油岩石向疏油性转变后油相流动效果变差。

广东省绿色交通建设的战略思考及政策建议

绿色交通是交通运输行业加强生态文明建设和实现发展转型的重要战略举措。文中通过对交通运输绿色发展要求的内涵研究分析,从省级交通运输的行业范围提出了绿色交通发展的总体框架,预测分析了广东省交通运输节能减排量需求,并以发展框架及节能减排需求为导向,探讨了广东省绿色交通建设的思路及战略重点,并从建设保障的角度提出了政策建议。

复值耦合神经网络的渐近和有限时间聚同步

主要研究具有时变时滞的复值耦合神经网络的聚同步问题。基于Halanay不等式,Filippov解的框架和微分包含原理,得到了确定具有时变时滞的复值耦合神经网络渐近和有限时间聚同步的一些充分条件。另外估计了实现有限时间聚同步所需时间的上确界。最后通过两个例子来说明我们结果的有效性。

基于网络消费观察大学生消费观——以河北农业大学为例

近些年大学生的消费观的转变引起了社会的关注,为了了解大学生消费观的特点,根据调查河北农业大学大学生的消费行为,通过描述性分析和模型分析总结大学生消费行为和消费观,对比男女消费偏好的差距,以及对比高低年级消费行为总结出大学生消费行为和消费观,发现大学生消费的不同以及根据消费观提出相对建议。

悬吊运动训练对痉挛型脑瘫患儿运动及平衡功能的影响

目的探讨悬吊运动训练对痉挛型脑瘫患儿运动及平衡功能的影响。方法将97例痉挛型脑瘫患儿随机分为试验组(49例)和对照组(48例)。两组均采用常规康复训练,试验组在常规康复训练的基础上增加悬吊运动训练。分别于治疗前、治疗后1、3、6个月记录粗大运动功能测试量表-88(GMFM-88)D、E区及Berg平衡量表得分,同时进行表面肌电图检查,观察内收肌、腓肠肌的表面肌电信号均方根值(RMS)的变化。结果随着治疗时间延长,试验组和对照组两组的GMFM?D、E区和Berg平衡量表得分较前均有不同程度提高,且试验组在改善D、E两大功能区和平衡功能方面优于对照组(P<0.05);两组内收肌和腓肠肌的RMS随着治疗时间延长而逐渐下降,且试验组的降低幅度大于对照组(P<0.05)。结论悬吊运动训练能有效改善痉挛型脑瘫患儿的运动和平衡功能。

依他尼酸抑制小鼠气管平滑肌收缩

本研究旨在探讨依他尼酸(ethacrynic acid, EA)抑制气管平滑肌(airway smooth muscle, ASM)收缩的作用及其机制。利用BL-420S系统测量小鼠气管环张力,用全细胞膜片钳技术记录ASM细胞通道电流,用钙成像系统测量ASM细胞内Ca^2+浓度。结果显示,EA剂量依赖性地抑制高-K^+(80 mmol/L)和乙酰胆碱(acetylcholine, ACh, 100μmol/L)引起的小鼠气管环收缩,最大舒张百分比分别为(97.02±1.56)%和(85.21±0.03)%,半数有效浓度(median effective concentration, EC50)分别为(40.28±2.20)μmol/L和(56.22±7.62)μmol/L。EA分别降低高-K^+和ACh诱导的细胞内Ca^2+浓度,分别从0.40±0.04降到0.16±0.01,0.50±0.01降到0.39±0.01。此外,EA抑制ASM细胞L-型电压依赖钙通道(L-type voltage-dependent calcium channel,LVDCC)和钙库操纵的钙离子通道(store-operated calcium channel, SOCC)电流,以及高-K^+和ACh引起的外Ca^2+内流。同时,EA可以降低小鼠呼吸系统阻力(resistance of the respiratory system, Rrs)。以上结果提示,EA通过抑制小鼠ASM细胞LVDCC和SOCC,抑制Ca^2+的内流,降低细胞内Ca^2+浓度,导致ASM舒张,提示EA是一种潜在的支气管扩张剂。