基于UHPLC-Q-Exactive Orbitrap HRMS技术结合化学计量学方法的不同干燥处理杜仲叶成分分析

采用基于液质联用的非靶向代谢组学技术结合化学计量学数据自动解析软件AntDAS-LCHRMS分析了4种不同干燥处理(冻干、热泵烘干、电热烘干、晒干)杜仲叶样本中的化合物。杜仲叶样本数据由超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱(UHPLC-Q-Exactive Orbitrap HRMS)分别在正、负离子模式下进行采集,经AntDAS-LCHRMS软件解析,共鉴定出71种差异性化合物,经标准品验证确定40种化合物,包括环烯醚萜类、有机酸类、黄酮类、氨基酸类、核苷类、维生素类等9类物质。其中,正、负离子模式下均可识别并验证的化合物有车叶草苷、绿原酸、芦丁、异槲皮苷、车叶草苷酸、京尼平苷等25种化合物。层次聚类分析(HCA)及主成分分析(PCA)结果均显示,相同处理的杜仲叶样本各自聚成一类,不同处理的杜仲叶样本可明显区分。热图分析进一步揭示了不同干燥处理杜仲叶样本中差异性化合物的含量变化。晒干处理样本中苯丙氨酸及色氨酸等氨基酸类物质的水平较高;冻干及热泵烘干处理样本中有机酸类、环烯醚萜类、糖类等含量较高;电热烘干样本中核苷类、黄酮类物质的含量较高;黄酮类物质在冻干、热泵烘干及晒干样本中差异较小。研究结果为不同干燥处理杜仲叶的成分分析、品质评价及其开发应用提供了科学依据,也可为其他复杂药用植物体系的化学成分分析提供参考。

副鸡禽杆菌外膜蛋白抗体间接ELISA检测方法的建立

副鸡禽杆菌(Avibacterium paragallinarum,Apg)是鸡传染性鼻炎的致病菌,可以引起急性呼吸道病,可导致蛋鸡产蛋率下降、从而造成严重的经济损失。副鸡禽杆菌引起的症状与鸡毒支原体等病原引起的其他上呼吸道传染病非常相似,本试验利用副鸡禽杆菌外膜蛋白,建立间接 ELISA 抗体检测方法,用于血清抗体的检测。通过分析副鸡禽杆菌外膜蛋白HMTp210中较为保守的P9片段,将其进行原核表达并纯化,纯化的P9蛋白免疫鸡制备了抗血清。结果显示,P9蛋白分子量62Ku,纯度80%以上。以纯化的蛋白P9作为包被抗原,采用棋盘滴定法确定了抗原最佳包被浓度为1μg/Ml、血清样品最佳稀释度为1∶100,作用时间为 60min;酶标二抗的最佳稀释浓度为1∶10000,最佳作用时间为 30min;底物显色时间为15 min;阴、阳性的判定值为0.3。按上述条件建立的间接ELISA方法可以检测出P9蛋白免疫后的鸡血清及三种血清型副鸡禽杆菌的阳性鸡血清,与其他禽病病原体抗血清无交叉反应,本研究为检测副鸡禽杆菌血清抗体提供了一种新的方法。

血清14-3-3β蛋白联合呼出气一氧化氮及常规通气肺功能参数对儿童支气管哮喘的诊断效能

目的探讨血清14-3-3β蛋白联合呼出气一氧化氮(fractional exhaled nitric oxide,FeNO)及常规通气肺功能参数对儿童支气管哮喘(简称“哮喘”)的诊断效能。方法前瞻性纳入136例初次诊断为哮喘且处于急性发作期的儿童为哮喘组,选择同期85例健康体检儿童为健康对照组,比较两组血清14-3-3β蛋白浓度的差异,分析血清14-3-3β蛋白与临床指标的相关性,评估14-3-3β蛋白联合FeNO及常规通气肺功能参数对儿童哮喘的诊断效能。结果哮喘组血清14-3-3β蛋白浓度高于健康对照组(P<0.001)。血清14-3-3β蛋白与中性粒细胞百分比、血清总免疫球蛋白E呈正相关,与常规通气肺功能参数呈负相关(P<0.05)。联合指标交叉验证显示14-3-3β蛋白+FeNO+用力呼出75%肺活量的呼气流量占预测值百分比预测哮喘的曲线下面积为0.948,灵敏度和特异度分别为88.9%和93.7%,具有较好的诊断效能(P<0.001),模型的外推性最好。结论血清14-3-3β蛋白联合FeNO、用力呼出75%肺活量的呼气流量占预测值百分比可以显著提高儿童哮喘的诊断效能。

中小学教师实施过程性评价的困境及其突破

随着新课改的逐步深入以及新时代评价方案的出台,中小学阶段的过程性评价受到了越来越多专家与一线教师的关注。而中小学教师在过程性评价的实施过程中面临诸多困境,如评价制度改革缓慢、教师评价素养尚有不足、家长与社区的评价主体缺位、评价活动难设计、评价方法与工具使用效果难持续以及评价结果受质疑等。为帮助教师突破在实施过程性评价中遇到的困境,确保评价工作的顺利推进,可以尝试从以下几个方面着手:推动评价制度改革,完善顶层设计;构建教师培训体系,提升评价素养;创新家校合作模式,凝聚评价合力;引入教师助手,共创评价活动;应用新型评价方法与工具,畅通评价过程;建立信息管理系统,提升评价质量。

FSHR基因多态性在颗粒细胞中的表达与卵巢储备功能及妊娠结局的相关研究

目的探讨卵泡刺激素受体(FSHR)基因多态性在颗粒细胞中的表达与卵巢储备功能及临床治疗结局的相关性,为辅助生殖技术(ART)助孕提供个体化治疗方案。方法以2020年9月至2022年10月于内蒙古医科大学附属医院生殖医学中心接受ART治疗的103例不孕症女性为研究对象。取卵后,提取废弃卵泡液中颗粒细胞的RNA,反转录获取cDNA,聚合酶链反应(PCR)扩增后,基因测序患者FSHR-rs6166的单核苷酸多态性(SNP)位点基因型。根据FSHR-rs6166 SNP位点基因测序结果将患者分为AA组(野生型,n=51)、AG组(杂合型,n=40)及GG组(突变型,n=12),比较各组患者的一般资料、卵巢储备功能、妊娠结局及卵巢的反应性。结果纳入的103例行ART助孕的患者中,FSHR-rs6166基因型以AA型最常见,频率为49.5%。GG组基础卵泡刺激素(bFSH)值[(6.90±1.30)U/L]及AG组bFSH值[(6.26±1.54)U/L]显著高于AA组[(5.65±0.90)U/L,P=0.003],GG组的抗苗勒管激素(AMH)水平[(3.20±1.28)ng/ml]及AG组AMH水平[(3.36±1.62)ng/ml]显著低于AA组[(4.29±1.97)ng/ml,P=0.036];3组患者间的窦卵泡数(AFC)、促性腺激素(Gn)启动量、Gn总量、Gn天数、人绒毛膜促性腺激素(HCG)日雌二醇(E 2)、获卵数、MⅡ卵数、2PN数、卵裂数、受精率、优质胚胎率、临床妊娠率、活产率、卵巢反应性差异均无统计学意义(P>0.05)。结论突变型及杂合型FSHR-rs6166位点可能与女性卵巢储备功能下降有一定关联,但FSHR-rs6166基因型对卵巢的反应性和妊娠结局影响并不明显。

钴镍金属氧化物碳纳米纤维复合材料的制备及其电化学性能研究

采用静电纺丝的方法制备了钴镍比分别为2∶1、1∶1、1∶2的镍钴金属氧化物碳纳米纤维复合材料,通过XRD表征了3种复合材料的晶体结构、材料形貌,并通过SEM和能谱图分析了其组分,最后对材料进行了析氧反应电化学性能的研究。结果表明:钴镍比为2∶1时得到的复合材料作为析氧阳极催化剂的催化活性及稳定性最好。

热应激对绵羊机体氧化损伤及免疫功能的影响

高温易引起绵羊热应激,热应激时下丘脑-垂体-肾上腺轴(The hypothalamic-pituitary-adrenal axis,HPA)和交感-肾上腺髓质轴(The sympathetico-adrenomedullary axis,SAM)兴奋,引起体内多种激素水平变化,以抵抗热应激对机体的影响;同时产生大量的活性氧(ROS)和活性氮(RNS)通过核因子E2相关因子2(Nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)、抗氧化反应元件(Antioxidant response element,ARE)、核转录因子kB(Nuclear factor kappa-B,NF-κB)等信号通路,调控抗氧化酶及细胞因子的表达与分泌。高温引发的热应激最终会导致绵羊生长和繁殖能力降低。本文主要阐述了热应激时绵羊体内激素水平的变化,以及氧化应激信号通路、天然免疫和适应性免疫的调控作用,以期为减轻热应激对绵羊机体氧化损伤及免疫功能影响的研究提供参考依据。

磁共振弥散加权成像对孕中晚期胎脑及其病变的诊断评估

目的 通过测量不同脑区ADC值探讨MRI弥散加权成像对孕中晚期胎脑及其合并病变的诊断价值。方法 收集我院MRI检查的单胎孕妇43例,先行三平面常规T2HASTE扫描,再行弥散加权成像,分析胎儿磁共振表现并测量不同脑区的ADC值,比较两组间差异,采用Pearson相关分析不同区域ADC值与孕龄的关系。结果 43例孕妇均为单胎,正常对照组胎脑19例,病变组24例,包括脑室扩张16例;颅后窝增宽6例,蛛网膜囊肿1例,1例胎儿头围发育较小。对照组及病变组内显示脑白质区ADC值均较深部核团、脑干及小脑增高,且有统计学意义;小脑及基底节区ADC值较丘脑及脑干有统计学意义;丘脑较脑干ADC值有统计学意义。两组间比较显示病变组顶叶ADC值较对照组下降,且P<0.05。对照组枕顶叶及小脑与孕龄存在负相关,病变组丘脑、脑干及小脑与孕龄存在负相关。结论 MRI弥散加权成像可初步评估正常胎脑及合并病变的脑发育情况;病变组顶叶脑白质ADC值下降,提示该区域可能对脑部潜在损伤较敏感。

基于成人脑卒中新急救流程在佛山市缺血性脑卒中急诊创新绿色通道的应用效果

目的探讨基于成人脑卒中新急救流程在佛山地区缺血性脑卒中急诊创新绿色通道的应用效果。方法选取2015年10月至2017年9月于佛山市中医院通过新急救流程收治的缺血性脑卒中并行溶栓治疗的患者共532例作为观察组,选取于2014年9月至2015年9月以旧急救流程收治的缺血性脑卒中并行溶栓治疗患者共200例作为对照组,比较两组患者到达急诊后完成抽血、完成头颅CTA及MRI影像学检查、和血液检查结果的时间,家属完成决策的时间,接诊到溶栓时间(DNT),对比两组患者到达急诊后60 min内完成溶栓患者的比例,记录所有患者的住院时间和72 h内的死亡率,卒中后3个月的神经功能NIHSS评分和病情伤残(mRs)评分。结果观察组患者的DNT时间为(71.6±19.7)min,而对照组为(113.5±28.4)min,观察组患者DNT时间显著低于对照组(t=22.543,P<0.001),观察组患者在接诊到护士抽血、影像学检查、血液检查、家属决策的时间均显著短于对照组,差异有统计学意义(P<0.001),观察组患者其接诊后60 min溶栓率为17.7%,显著高于对照组的8.0%(χ~2=10.643,P=0.001);观察组住院时间显著短于对照组(t=12.564,P<0.001)。溶栓治疗3个月后观察组NHISS评分和mRs评分显著低于对照组(P<0.001)。结论基于成人脑卒中新急救流程在佛山市缺血性脑卒中患者急诊创新绿色通道的应用,显著减少了接诊后完成溶栓治疗的时间,改善了患者的预后。

用3种方法定位玉米萌发期和苗期的耐盐和耐碱相关性状QTL

以耐盐碱郑58和盐碱敏感昌7-2为亲本,构建包含151份F2:5重组自交系(RILs)群体。基于3K芯片对郑58、昌7-2及其F2:5家系进行基因型分析,构建了包含1407个SNP分子标记的高密度遗传连锁图谱。该图谱的各染色体标记数在84～191之间,标记间的平均距离为0.81 cM。胁迫液为200 mmol L–1 NaCl和100 mmol L–1 Na2CO3,对照液为蒸馏水或霍格兰营养液,对盐、碱胁迫和自然条件下玉米的发芽率(GP)、株高(PH)、植株干、鲜重(FW、DW)、幼苗组织含水量(TWS)、植株地上部分钠含量(SNC)、钾含量(SKC)、钠/钾含量比(NKR)、苗期耐盐率(STR)、耐碱率(ATR)10项指标,采用3种不同的作图方法同时定位研究,对加性QTL定位采用复合区间作图法(CIM)和完备区间作图法(ICIM),对加性QTL与环境互作联合分析采用混合线性模型的复合区间作图法(MCIM)。结果表明,(1)与对照条件下各性状表型值相比,耐碱相关性状的降低较耐盐相关性状明显,说明玉米对碱胁迫更加敏感和碱胁迫对玉米的伤害更严重。碱与盐胁迫下SKC相当而SNC差异较大,表明Na+、K+的吸收和运输是相互独立的两个过程,玉米盐、碱胁迫可能是两种性质不同的胁迫。(2)在自然、盐和碱胁迫条件下,运用CIM分别检测到27、28、40个加性QTL;运用ICIM分别检测到28、23、17个加性QTL;运用MCIM共检测到11个耐盐加性QTL、4个环境互作QTL以及11个耐碱加性QTL、3个环境互作QTL。(3)盐胁迫条件下的qPH-9、qSTR-8、qNKR-6、qNKR-7和碱胁迫条件下的qPH-9、qATR-3能被3种作图方法重复检测到。与前人结果比较, qPH-9、qSTR-8、qNKR-6、q-ATR-3定位在相同或邻近区域,qNKR-7尚未见报道。本研究结果为精细定位玉米耐盐碱主效基因、挖掘候选基因和开发用于标记辅助选择的实用功能标记奠定基础。

2012-2017年我国鸡传染性鼻炎流行态势分析

2012-2017年,北京、山东、安徽、贵州、河北和广西等省市区送检鸡传染性鼻炎疑似病料125份,共分离到副鸡禽杆菌45株,其中A型15株,B型30株。表明近六年来我国的鸡传染性鼻炎以B型为主。

植物氮素利用途径中硝酸盐转运基因的研究进展

氮素是植物生长发育必不可少的大量元素之一,土壤中的硝酸盐是植物获取氮素的主要来源。植物对硝酸盐的吸收与利用是通过一个精密的信号调控网络来实现的,其中硝酸盐转运蛋白在植物体内硝酸盐的运输和分配过程中发挥着重要的作用。通过对氮素利用途径中不同硝酸盐转运基因在硝酸盐的吸收、转运、同化和再利用进行功能鉴定,可以更好地解析硝酸盐在植物体内的吸收机制,从而找到提高植物氮素利用效率的关键环节。因此,综述了植物硝酸盐转运蛋白对土壤中硝酸盐的响应和信号的传递;硝酸盐转运蛋白在植株体内参与硝酸盐的转运、储存和再利用的功能以及硝酸盐在植物育种中的应用,并从对硝酸盐转运基因的单碱基编辑、关键结构域的改造和基因功能鉴定等方面进行展望。综述了有利于揭示硝酸盐转运基因的功能,拓宽植物吸收转运硝酸盐的分子机制认识,为提高植物氮素利用效率、培育氮高效利用农作物品种提供理论支撑。

不同机械通气方式治疗新生儿呼吸衰竭的效果及对患儿CC16、KL-6水平的影响

目的探讨有创高频振荡通气和同步间歇指令通气治疗新生儿呼吸衰竭的临床疗效及对患儿CC16、KL-6水平的影响。方法选取呼吸衰竭患儿130例,按随机数字表法将其分为观察组65例(其中足月儿53例,早产儿12例)和对照组65例(其中足月儿50例,早产儿15例)。观察组采用有创高频振荡通气治疗,对照组采用同步间歇指令通气治疗,比较2组早产儿和足月儿的临床疗效,并检测2组机械通气0 h、24 h和72 h血气指标氧合指数(oxygenation index,OI)、呼吸指数(respiratory index,RI)、二氧化碳分压(pressure of carbon dioxide,PaCO_2)、氧分压(oxygen partial pressure,PaO_2)、动脉氧分压与吸入氧浓度比(oxygen partial pressure/fraction of inspiration O_2,PaO_2/FiO_2),治疗前后血清CC16及KL-6变化情况和不良反应发生率。结果观察组总的临床有效率为90.8%(59/65),明显高于对照组的80.0%(52/65)(P<0.05)。2组足月儿治疗有效率优于早产儿(P<0.05)。观察组经口喂养时间、呼吸机使用时间和住院时间明显短于对照组(P<0.05)。机械通气后2组OI、RI和PaCO_2均呈逐渐下降趋势,2组PaO_2和PaO_2/FiO_2均呈逐渐升高趋势,但观察组降低和升高的幅度更大,2组在组间、时点间以及组间·时点间交互作用差异均有统计学意义(P<0.05)。2组血清CC16和KL-6均较治疗前明显降低(P<0.05),治疗后观察组CC16和KL-6水平均明显低于对照组(P<0.05)。观察组肺出血、呼吸机相关性肺炎、下呼吸道感染等不良反应发生率均明显低于对照组(P<0.05)。结论有创高频振荡通气治疗新生儿呼吸衰竭的疗效更佳,能够明显改善患儿血气指标,减缓炎症作用,从而降低患儿CC16、KL-6水平,改善肺部损伤,不良反应较少。

高速逆流色谱技术在天然产物研究中的应用进展

高速逆流色谱是液-液分配色谱,与传统固-液分配色谱相比,其具有固定相成本低、易回收、分离过程灵活、高效等优点,近年来被广泛应用于天然产物研究中。本文总结归纳了高速逆流色谱的两相溶剂体系、分离洗脱方式的选择和应用方法,分析阐述了高速逆流色谱技术在天然产物研究中的应用实例,为天然产物功效成分的进一步深入研究提供可靠的技术参考。

副鸡禽杆菌LAMP检测方法的建立

应用环介导等温扩增(LAMP)技术建立了快速特异的检测副鸡禽杆菌的方法。利用在线引物设计软件Primer Explorer Version 4.0,针对副鸡禽杆菌16SRNA基因序列设计两组LAMP引物,并对副鸡禽杆菌特异性DNA的扩增条件进行优化,评价所建立LAMP的特异性和灵敏性。结果显示,优化后的反应条件为65℃恒温反应60min,内引物1.60pmol/μL、外引物0.20pmol/μL。该LAMP对13株副鸡禽杆菌均发生了扩增反应,而对大肠埃希菌、禽多杀性巴氏杆菌、空肠弯曲杆菌等14株其他病原微生物没有扩增反应;该LAMP最低检出量为0.17pg/反应,敏感性远高于常规PCR的56pg/反应。结果表明,所建立的副鸡禽杆菌LAMP具有快速、高效、方便操作等特点,适用于基层兽医部门进行副鸡禽杆菌的快速检测。

副鸡禽杆菌外膜囊泡提取及成分分析

为研究副鸡禽杆菌外膜囊泡(OMVs)的构成,提取A型副鸡禽杆菌的OMVs,纯化并透射电镜观察其形态结构,检测其内毒素含量和DNA含量,分析其是否具有血凝活性,测定OMVs蛋白含量,并用质谱法分析了OMVs的蛋白组成成分。结果显示,副鸡禽杆菌的OMVs呈球形、泡状,直径为20 nm^300 nm,含有内毒素和少量核酸物质。该OMVs不能凝集鸡红细胞,Western blot结果表明,OMVs蛋白与该菌外膜蛋白单克隆抗体有阳性反应,构成OMVs的蛋白分子质量大多集中于65 ku和13 ku处,蛋白成分主要有ATP依赖性RNA解旋酶等多种功能酶、铁链霉素B受体、膜蛋白等结构成分和一些未知功能的假定蛋白等,为进一步分析副鸡禽杆菌外膜囊泡在致病和免疫方面的作用奠定基础。

防水汽非织造布口罩的生产技术

设计了一款新型的防水汽非织造布口罩,口罩的三层结构面层、芯层和里层通过超声波焊接工艺连接。采用环保的吸湿PET网孔水刺非织造布替代传统口罩的里层,可大幅度提高口罩的防水汽性能;面层的表面设置有均匀的轧点,能够显著提高口罩的柔软性。该口罩具有舒适、透气、耐用的优点,并具有较好的防雾和防水汽性能。

化疗相关恶心呕吐危险因素的性别差异

目的探索不同性别患者化疗相关恶心呕吐(CINV)危险因素的差异,为临床用药提供参考。方法采用回顾性病例对照研究,以某院871例化疗患者为对象,其中男性448例,女性423例,分别统计人口学数据,病史资料,检查情况,治疗信息等资料共32项。以CINV为终点,采用单因素分析、向后似然比逐步回归法进行变量筛选。将筛选后的变量纳入多因素Logistic回归。使用多层感知神经网络预测各危险因素的重要性。结果结果显示男性独有的独立危险因素3项,分别为体表面积、阿片类止痛药应用、首次化疗;女性独有的独立危险因素1项,为化疗前紧张焦虑情绪;男女共有的独立危险因素6项,分别为胃肠道疾病史、手术史、电解质紊乱、化疗前24 h恶心呕吐、化疗呕吐史,化疗方案致吐风险等级。男性患者的独立危险因素中,化疗前24 h恶心呕吐(100.0%),体表面积(96.5%),化疗方案致吐风险等级(96.3%)的相对重要性较高。女性患者的独立危险因素中,化疗方案致吐风险等级(100.0%),化疗前24 h恶心呕吐(78.3%),紧张焦虑情绪(58.8%)的相对重要性较高。结论CINV的发生与多种因素相关,不同性别的患者,CINV的危险因素有所不同,各危险因素的重要性亦有不同。体表面积更大、使用阿片类药物、首次化疗的男性更容易发生CINV;存在紧张焦虑情绪的女性更容易发生CINV。医师在化疗前应充分考虑患者的性别差异,有针对性地对CINV进行预防。

基于TRIZ和QFD理论的视障儿童玩具创新设计

目的设计一款适合视障儿童的创新型玩具。方法利用QFD理论建立视障儿童用玩具的质量屋,将顾客需求转化为产品技术特性,找到两对技术矛盾:外形与凹凸块契合度的矛盾,即外形越大,契合度越难;外壳材质与声音的矛盾,即在杨氏模量一定的情况下,外壳的密度越小,声速越大、响度越大。利用TRIZ理论的39个通用工程参数和40个发明原理解决上述两对技术矛盾。结论提出了一种可行性方案,主要包括外形、内部构造与玩法3部分的设计,与目前市场上现有的视障儿童玩具相比该创新型玩具同时达到了锻炼视障儿童的记忆力、感知能力、认知能力和动手操作能力的效果。

副鸡禽杆菌外膜囊泡的生物学活性分析

为研究副鸡禽杆菌(Apg)外膜囊泡(OMVs)的生物活性,提取了A型副鸡禽杆菌的外膜囊泡。纯化后的OMVs用透射电镜观察其形态结构;将OMVs加入到鸡巨噬细胞(HD-11)培养液中,检测一氧化氮(NO)产生量的变化;用荧光定量PCR(qPCR)检测HD-11各炎症相关因子的表达量变化情况;将OMVs经肌肉注射接种SPF鸡,检测鸡血清IgG抗体产生情况,并用3种血清型的副鸡禽杆菌强毒菌株攻击免疫鸡,测定其免疫保护率。结果显示,电镜下的副鸡禽杆菌OMVs呈球形,直径在20~300 nm;OMVs可极显著提高HD-11中NO产量;qPCR结果显示,OMVs作用可显著上调鸡巨噬细胞IL-2、IL-6、 IL-1β、IL-10、iNOs等炎症相关因子的表达。免疫鸡可以产生特异性的IgG抗体。用A型副鸡禽杆菌攻毒,免疫保护率为70%,对异种血清型交叉保护性较弱,仅有10%~30%。本研究为深入研究副鸡禽杆菌外膜囊泡的功能奠定了基础。