基于Wnt/β-Catenin信号通路探讨吴门骨密葆方含药血清促进间充质干细胞成骨分化的效应机制

目的基于Wnt/β-连环蛋白(β-Catenin)信号通路研究吴门骨密葆方含药血清促进骨髓间充质干细胞成骨分化机制。方法将大鼠骨髓间充质干细胞为正常血清组、经典诱导剂[间充质干细胞成骨诱导分化培养基(OBM)]组、吴门骨密葆方含药血清低(10 g生药/kg)和高剂量(20 g生药/kg)组、抑制剂[分泌型蛋白Dickkopf-1(DKK-1),0.1 ng·mL-1]组以及吴门骨密葆方含药血清低、高剂量+抑制剂组,成骨诱导分化后干预7 d时采用CCK8法检测细胞活力,随后采用碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色法和ALP试剂盒检测不同剂量吴门骨密葆方含药血清及加入Wnt/β-Catenin信号通路特异性阻滞剂DKK-1干预的间充质干细胞ALP染色强度和活性,Western Blot测定间充质干细胞Wnt信号蛋白家族3alpha(Wnt3a)、β-Catenin、糖原合成酶激酶3β(glycogen synthase kinase 3β,GSK-3β)、破骨细胞抑制因子(osteoprotegerin,OPG)和核因子κB受体活化因子配体(receptor activator of NF-κB ligand,RANKL)蛋白表达水平。结果与正常组比较,吴门骨密葆方含药血清干预均可有效促进间充质干细胞增殖(P均<0.05),吴门骨密葆方含药血清可有效促进间充质干细胞ALP染色的强度和活性(P均<0.05),以及调控成骨分化相关的Wnt3a、β-Catenin、GSK3β、OPG和RANKL蛋白表达(P均<0.05),但是这些调控作用均可被DKK-1在一定程度上逆转。结论吴门骨密葆方含药血清诱导骨髓间充质干细胞的成骨分化,可能通过激活Wnt/β-catenin信号通路以及影响OPG/RANKL通路而实现。

滋肾通关方对糖尿病大鼠肾损伤的改善作用及其机制

目的:研究滋肾通关方对糖尿病大鼠肾损伤的改善作用及其机制。方法:将50只8周龄雄性SD大鼠随机分为5组(每组10只):对照组、模型组和滋肾通关方低剂量(7.0 g生药/kg)、中剂量(14.0 g生药/kg)、高剂量(28.0 g生药/kg)组。除对照组外,其余组大鼠高脂高糖喂养4周联合腹腔注射链脲佐菌素(STZ,35 mg/kg)构建糖尿病肾损伤大鼠模型。造模成功后,各组分别连续4周灌胃给予相应药物或生理盐水,1次/d。给药前和给药后第1、2、3、4周检测空腹血糖(FBG)、血清尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)含量,酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-1β(IL-1β)含量;苏木精-伊红(HE)染色法观察肾损伤情况,蛋白质印迹法检测肾组织转化生长因子-β_(1)(TGF-β_(1))/Smads通路相关蛋白的表达。结果:与对照组比较,模型组的大鼠FBG和血清BUN、Cr、TC、TG、TNF-α、IL-6、IL-1β均显著升高(均P<0.05);肾组织可见病理学损伤改变;TGF-β_(1)、Smad3、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和波形蛋白(Vimentin)的表达明显上调,而Smad7的表达明显下调。滋肾通关方低、中、高剂量组治疗4周后糖尿病肾损伤大鼠FBG和血清BUN、Cr、TC、TG、TNF-α、IL-6、IL-1β含量均明显降低(均P<0.05),肾组织病理学损伤明显改善,TGF-β_(1)、Smad3、α-SMA、Vimentin表达下调且Smad7表达上调,在不同剂量的滋肾通关方观察组中,其作用表现出一定的剂量依赖性。结论:肾通关方可通过抑制TGF-β_(1)/Smads信号通路改善糖尿病大鼠肾纤维化损伤。

任氏清胰汤治疗轻中度急性胰腺炎的临床效果

目的探讨任氏清胰汤治疗轻中度急性胰腺炎的临床效果。方法选取2020年1月至2021年12月苏州市中医医院收治的40例轻度及中度急性胰腺炎患者作为研究对象,按照随机数字表法将其分为治疗组(20例)及对照组(20例),治疗组采取常规西医综合治疗,对照组采取常规西医治疗联合任氏清胰汤治疗,比较两组临床综合疗效、中医证候评分、腹痛疼痛数字评分法(NRS)评分、腹胀视觉模拟评分法(VAS)评分、首次进食时间、首次排便/排气时间、肠鸣音恢复时间、淀粉酶(AMS)、C反应蛋白(CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1(IL-1)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)、急性胰腺炎严重程度床边指数(BISAP)评分。结果治疗后,治疗组的总有效率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,治疗组的首次进食时间、首次排便/排气时间、肠鸣音恢复时间均短于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,治疗组的中医证候积分、腹痛NRS评分、腹胀VAS评分、BISAP评分均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗组治疗3、5、7 d的AMS、CRP、TNF-α均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗组治疗3、5、7 d的IL-10均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);两组治疗3、5、7 d的IL-1及IL-6比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论任氏清胰汤联合西药治疗急性胰腺炎的疗效确切,可改善临床症状,缓解炎症反应程度,药物安全性良好。

祛瘀护膜法调控PI3K/Akt通路对反流性食管炎大鼠E-钙黏蛋白表达和食管黏膜修复的影响

目的基于磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(Akt)信号通路调控E-钙黏蛋白(E-cadherin)的表达,探讨祛瘀护膜法对反流性食管炎(RE)大鼠食管黏膜损伤的影响,进一步明确其作用机制。方法取68只雄性SD大鼠,随机选择10只大鼠作为假手术组,剩余大鼠采用4.2 mm幽门夹+2/3胃底结扎术方法建立RE模型。将56只造模成功的大鼠随机分为7组,每组8只。雷贝拉唑组给予雷贝拉唑0.0018 g/kg灌胃,铝镁加组给予铝镁加混悬液0.0135 g/kg灌胃,雷贝拉唑+祛瘀护膜剂组给予雷贝拉唑0.0018 g/kg+祛瘀护膜剂1.62 g/kg灌胃,雷贝拉唑+加味祛瘀护膜剂组给予雷贝拉唑0.0018 g/kg+加味祛瘀护膜剂2.97 g/kg灌胃,祛瘀护膜剂组给予祛瘀护膜剂1.62 g/kg灌胃,加味祛瘀护膜剂组给予加味祛瘀护膜剂2.97 g/kg灌胃,假手术组和模型组给予蒸馏水+淀粉灌胃,均1次/d,连续灌胃14 d。观察大鼠一般情况,末次灌胃结束后取出全胃计算胃内色素残留率,HE染色观察食管组织病理形态,透射电镜观察食管组织Cajal间质细胞结构,RT-PCR法检测食管组织中E-cadherin、锌指转录因子(Slug)mRNA表达情况,Western blot法检测食管组织中E-cadherin、半胱氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)、磷酸化PI3K(p-PI3K)、磷酸化Akt(p-Akt)、第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源基因(PTEN)、磷酸肌醇依赖性蛋白激酶-1(PDK1)蛋白表达情况,免疫组织化学法检测食管组织中E-cadherin、Caspase-1、PTEN、PDK1阳性表达情况,ELISA法检测血清中Caspase-1、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-17(IL-17)、白细胞介素-18(IL-18)、白细胞介素-23(IL-23)水平。结果与假手术组比较,模型组大鼠胃内色素残留率明显升高(P<0.05);食管组织可见炎性细胞浸润,黏膜层轻度增厚,Cajal间质细胞数量减少;食管组织中E-cadherin mRNA相对表达量和E-cadherin、PTEN蛋白相对表达量及E-cadherin、PTEN阳性表达面积率均明显降低(P均<0.05),Slug mRNA相对表达量和Caspase-1、p-PI3K、p-Akt、PDK1蛋白相对表达量及Caspase-1、PDK1阳性表达面积率均明显升高(P均<0.05);血清Caspase-1、IL-1β、IL-17、IL-18、IL-23水平均明显升高(P均<0.05)。与模型组比较,各药物组大鼠胃内色素残留率均明显降低(P均<0.05);食管组织损伤明显减轻;雷贝拉唑+祛瘀护膜剂组、雷贝拉唑+加味祛瘀护膜剂组食管组织中E-cadherin mRNA相对表达量和E-cadherin、PTEN蛋白相对表达量及E-cadherin、PTEN阳性表达面积率均明显升高(P均<0.05),Slug mRNA相对表达量和Caspase-1、p-PI3K、p-Akt、PDK1蛋白相对表达量及Caspase-1、PDK1阳性表达面积率均明显降低(P均<0.05);血清Caspase-1、IL-1β、IL-17、IL-18、IL-23水平均明显降低(P均<0.05)。与雷贝拉唑组比较,雷贝拉唑+祛瘀护膜剂组、雷贝拉唑+加味祛瘀护膜剂组食管组织中E-cadherin mRNA相对表达量和E-cadherin、PTEN蛋白相对表达量及E-cadherin、PTEN阳性表达面积率均明显升高(P均<0.05),Slug mRNA相对表达量和Caspase-1、p-PI3K、p-Akt蛋白相对表达量及Caspase-1、PDK1阳性表达面积率均明显降低(P均<0.05);雷贝拉唑+加味祛瘀护膜剂组食管组织中PDK1蛋白相对表达量和血清Caspase-1、IL-1β、IL-17、IL-18、IL-23水平均明显降低(P均<0.05)。雷贝拉唑+加味祛瘀护膜剂组食管组织中p-PI3K、p-Akt蛋白相对表达量和血清Caspase-1、IL-1β、IL-17、IL-18、IL-23水平均明显低于雷贝拉唑+祛瘀护膜剂组(P均<0.05)。结论祛瘀护膜法可通过抑制PI3K/Akt通路过度激活作用于E-cadherin、Slug转录因子,在下调Caspase-1、p-PI3K、p-Akt、PDK1蛋白表达的同时上调E-cadherin、PTEN蛋白的表达,进而降低血清中Caspase-1、IL-1β、IL-17、IL-18、IL-23水平,减轻上皮组织细胞的炎性病变和(或)抑制细胞的转移、浸润,促进食管黏膜损伤修复,其联合西药治疗效果更佳,且优化组方作用更明显。

全文本视角下的核心引文测度:概念界定、指标体系与识别模型

识别施引文献中的核心引文是深入开展科技成果评价的重要基础。为此,本文探讨了全文本视角下的核心引文测度,包括概念界定、指标体系构建及识别模型的优化,从而提供一个更为精准的科学评价工具。首先,明确核心引文的定义,构建包含题录信息和引用信息2个维度、8个子维度及33个引文特征指标的核心引文识别指标体系。其次,通过多种机器学习模型(如随机森林、支持向量机、逻辑回归)对引文特征指标进行遴选与优化,分析其相关性及信息增益,保留21个重要的引文特征指标,并验证识别模型的有效性。研究结果表明,基于引用信息的引文特征指标在识别核心引文时具有更高的重要性和贡献度。机器学习模型在核心引文识别中的表现优异,特别是随机森林、支持向量机、逻辑回归等模型,其ROC (receiver operating characteristic)曲线的AUC (area under curve)值均大于0.85,证明了模型的高效性和鲁棒性。核心引文测度方法及识别模型不仅为科学评价体系提供了更精准的工具,也为深入研究引文分析奠定了坚实的基础。

引文视角下的变革性研究早期识别模型构建方法与应用

[目的/意义]及时精准地识别变革性研究对探索前沿性科学问题发现和提出机制、面向国家高质量发展新格局具有重要意义。[方法/过程]基于变革性研究在广度、强度和速度维度的特征,借助机器学习方法,采用熵权法、因子分析法和回归分析法分别构建了引文视角下的变革性研究识别模型。将上述模型应用于基因靶标、磁阻效应、富勒烯领域以评估不同模型的早期识别效果,并将早期识别效果最高的模型应用于2017年分子生物学、聚合物科学和天体物理学领域。[结果/结论]从“排名”和“top%”指标看,基于回归分析法的变革性研究早期识别模型的识别效果优于其他两个模型,识别出的变革性研究排名更靠前,且在发表后第3年即可对变革性研究进行识别;该模型在基因靶标和富勒烯领域的识别准确率高于磁阻效应领域。基于回归分析法的变革性研究早期识别模型的准确率、召回率均为80%,十折交叉验证结果显示该模型的平均得分为0.764。

高质量论文使用次数与被引次数相关性的特征分析

[目的/意义]论文质量主要包括引文影响力和传播速度两个方面,探讨高质量论文引文影响力指标(被引次数)和传播速度指标(使用次数)在论文、期刊、学科、时间水平的分布特征,可以为科技论文评价提供参考。[方法/过程]收集2011-2015年Web of Science数据库中收录的"再生医学"领域的文献,根据二八定律将使用次数≥18的论文纳入数据集1,被引次数≥12次的论文纳入数据集2,抽取2个数据集中的交集论文作为高质量论文。对这部分论文在不同年份、期刊和学科中的使用和被引情况进行分析。[结果/结论](1)高质量论文的使用次数与被引次数的相关系数为0.643;(2)发表时间越早,高质量论文使用次数与被引次数的相关系数越高;(3)高质量论文的使用次数和被引次数在期刊水平的相关系数为0.893;(4)高质量论文的使用次数和被引次数在学科水平的相关系数为0.972。不考虑时间因素的影响,高质量论文的使用次数与被引次数的相关系数在论文、期刊、学科和时间水平呈中等以上相关性,这有利于该领域新发表论文的早期评价。

基于线粒体自噬途径探讨黄芪甲苷对阿霉素肾病大鼠的肾保护作用

目的从线粒体自噬角度探讨黄芪甲苷对阿霉素肾病大鼠的肾保护作用,进而阐释中药黄芪“扶补托毒”的护肾机理。方法SD大鼠尾静脉两次注射阿霉素(Adriamycin,ADR)建立ADR肾病大鼠模型。以随机数字法将模型大鼠分为模型组、西药组(洛丁新,0.9 mg·kg^(-1)·d^(-1)),黄芪甲苷低(20 mg·kg^(-1)·d^(-1))、中(40 mg·kg^(-1)·d^(-1))、高(80 mg·kg^(-1)·d^(-1))剂量组,每组8只。另选取8只同龄大鼠为正常组。各组大鼠灌胃给予相对应药物6周,每日1次,正常组与模型组予等容积生理盐水。给药干预后,生化法检测大鼠24 h定量尿蛋白及血清白蛋白(ALB)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)和血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)水平。苏木精-伊红染色法(HE)观察大鼠肾脏病理变化以及采用透射电镜观察肾组织线粒体结构、足细胞形态、数目的变化等。酶联免疫吸附剂法(ELISA)测定试剂盒检测肾组织白细胞介素-1β(IL-1β),活性氧(ROS)水平以及三磷酸腺苷(ATP)含量和线粒体膜电位(冰冻切片)采用化学荧光法检测。Real-time PCR法检测各组肾组织线粒体DNA(mitochondrial DNA,mt DNA)及核基因18srRNA的含量。Western blot法检测肾脏组织中线粒体自噬蛋LC3、Beclin-1和NLRP3、Caspase-1的蛋白表达。结果与正常组比较,模型组定量24 h尿蛋白,血清ALT、Scr和BUN水平,肾组织IL-1β水平以及LC3、Beclin-1和NLRP3、Caspase-1蛋白表达均显著性升高(P<0.05);血清ALB水平,肾组织ATP水平、mt DNA/18srRNA、膜电位显著降低(P<0.05);且病理结构检测结果显示其肾实质存在损伤病理变化,以及肾组织线粒体发生部分崩解和足细胞足突发生部分融合现象等。与模型组比较,西药组和黄芪甲苷中、高剂量组均能不同程度的改善相关指标,且黄芪甲苷高剂量减轻肾实质病理改变和线粒体微结构损伤最为明显。结论黄芪甲苷能够降低阿霉素肾病大鼠的蛋白尿,改善肾组织线粒体等病理损伤,并抑制炎症以及过度自噬的形成,其肾保护作用可能是通过降低肾脏组织中NLRP3和Caspase-1的表达,进而调控线粒体自噬途径而实现。

科学计量学常用工具的聚类算法分析

介绍聚类算法的过程以及聚类有效性指标的分类,分别评述科学计量学常用软件中的几种聚类算法,分析聚类算法的特性并采用基于类内紧密度和类间分离度对聚类结果的有效性进行探讨,总结各聚类算法的效果并对应软件分析的结果进行案例分析。

吴门三黄汤联合西药治疗类风湿关节炎湿热痹阻证

目的探讨吴门三黄汤联合西药治疗类风湿关节炎湿热痹阻证的效果观察。方法将73例类风湿关节炎湿热痹阻证患者随机分为2组,对照组采用西药治疗:服用甲氨蝶呤片,10 mg/次,每周1次,如果出现疼痛加重感加服美洛昔康片,7.5 mg/次。治疗组采用吴门三黄汤联合西药治疗:在对照组的基础上,服用吴门三黄汤,200 m L/次,2次/d。均7周为1个疗程,共2个疗程。对比2组治疗前后临床症状及实验室相关指标变化。结果治疗组显效率94.29%,明显高于对照组的65.79%;治疗组不良反应出现率2.9%,明显低于对照组的10.5%。2组治疗后晨僵时间、肿胀指数、压痛指数均显著低于治疗前,治疗组治疗后改善临床症状的程度显著优于对照组(P<0.05);2组治疗后各项实验室指标均低于治疗前(P<0.05),但治疗组血沉(ESR)、C反应蛋白(CRP)、白细胞介素-1(IL-1)、血尿酸(BUA)等指标改善情况与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论吴门三黄汤联合西药治疗类风湿关节炎湿热痹阻证病患,在西药治疗基础上,通过协同抑制炎症反应以及尿素的生成等,能显著改善患者临床症状,降低不良反应发生率。

白花蛇舌草不同提取液抗炎镇痛效应及化学成分比较研究

目的比较白花蛇舌草水提液和醇提液体内外抗炎效应及化学成分的差异。方法以二甲苯致耳肿胀和醋酸致扭体小鼠实验模型评价两种提取液的体内抗炎镇痛效应;以LPS诱导RAW264.7巨噬细胞模型评价其体外抗炎效应,ELISA法检测小鼠血清中IL-6、TNF-α和细胞上清液中IL-6、IL-1β、TNF-α的水平。应用高效液相色谱方法建立两种提取液的HPLC指纹图谱。结果两种提取液均可减轻小鼠耳肿胀和减少扭体次数,降低血清中IL-6、TNF-α水平,抑制细胞上清液中IL-6、IL-1β、TNF-α的浓度,且水提液总抗炎效应优于醇提液。白花蛇舌草水提液和醇提液分别标定了36个、40个共有峰;两者共有成分峰31个,且含量有差异;指认4个共有成分,分别为咖啡酸、对香豆酸、芦丁、槲皮素,水提液中咖啡酸、对香豆酸含量较高,芦丁和槲皮素含量在水醇液中明显。结论白花蛇舌草水提液和醇提液在抗炎效应和化学成分上有差异,水提液总抗炎药效优于醇提液,与醇提液的差异成分发挥着主要抗炎效应。

健脾合剂对腹泻型肠易激综合症大鼠结肠miRNA表达谱的影响

目的观察微小核糖核酸(Micro-ribonucleic acid,miRNA)在腹泻型肠易激综合征(Irritable bowel syndrome-diarrhea,IBS-D)大鼠和健脾合剂治疗后的大鼠结肠组织中表达的差异,预测健脾合剂治疗IBS-D过程中参与的miRNA及对应的基因,为寻找IBS-D的潜在治疗靶点提供基础。方法将大鼠随机分为空白组、模型组和中药组,每组8只。模型组与中药组均采用急慢性刺激法+番泻叶灌胃制造IBS-D模型,中药组于造模后予以健脾合剂灌胃,连续14天;观察并记录大鼠一般情况、体重及粪便Bristol积分;采用苏木精-伊红(Hematoxylin-eosin staining,HE)染色法观察各组大鼠结肠组织病理学变化;对各组大鼠结肠组织进行转录组测序,筛选差异表达的miRNA并进行映射;对筛选出的共同miRNA对应的靶基因进行GO(Gene oncology)功能富集分析和KEGG(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes)通路富集分析。结果与模型组相比,中药组大鼠体重显著增加(P<0.01),粪便Bristol积分明显下降(P<0.01),结肠组织病理损伤减轻。与空白组相比,模型组差异表达的基因共109个,其中80个上调,29个下调。与模型组相比,中药组差异表达的基因共109个,其中19个上调,90个下调。对两次比较的基因进行映射发现,模型组中有74个miRNA升高而7个降低,这些miRNA的变化均在中药干预后得到逆转。对靶基因进行GO功能富集分析显示健脾合剂作用于大鼠后主要参与突触囊泡定位与转运,胞质运输、生长性发育负调控、糖运输等过程。KEGG通路富集分析显示丝裂原活化蛋白激酶(Mitogen-activated protein kinase,MAPK)、Wnt、Hippo、肿瘤坏死因子(Tumor necrosis factor,TNF)、氧毒素、环磷酸腺苷(cyclic AMP,cAMP)等通路被富集。结论健脾合剂干预治疗后,IBS-D相关的miRNA表达谱发生了显著的变化;健脾合剂可能通过调控MAPK信号通路、Wnt信号通路等在治疗IBS-D过程中发挥保护作用。筛选核心基因和预测与之相互作用的miRNA为IBS-D发病机制和健脾合剂治疗靶点的研究提供了理论基础。

肾炎1号方治疗慢性肾炎大鼠的血清代谢组学研究

目的 研究肾炎1号方对慢性肾炎大鼠的治疗作用机制,探索具有治疗作用的药效标志物。方法 用阿霉素建立SD大鼠慢性肾病模型,模型评价成功后随机分为模型组及肾炎1号方低剂量、高剂量治疗组。肾炎1号方灌胃给药治疗,模型组及空白组给予等量的生理盐水,4周后末次给药2 h后采集大鼠血浆,用液质联用色谱技术检测分析大鼠血浆中内源性代谢物,对实验数据进行主成分分析和正交偏最小二乘判别分析,筛选出差异代谢物并对代谢途径进行分析。结果 大鼠进行慢性肾炎造模后,血浆中内源性代谢物发生紊乱,经肾炎1号方治疗后,高剂量组与模型组筛选,得出18种差异代谢物,其中5种下调、13种上调。分析得出肾炎1号方干预大鼠慢性肾炎代谢的途径涉及氨基酸代谢(羟脯氨酸、环亮氨酸和天冬氨酸代谢)、乙醛酸和二羧酸、泛酸盐及辅酶A、柠檬酸、丁酸甲酯及半乳糖等代谢途径。结论 肾炎1号方可使慢性肾炎大鼠的代谢物水平有不同程度的恢复,主要通过氨基酸、乙醛酸和二羧酸、泛酸盐及辅酶A、柠檬酸、丁酸甲酯和半乳糖等代谢途径对大鼠慢性肾炎进行调节。

吴门调脂颗粒方对非酒精性脂肪肝大鼠肝组织NF-κBp65/P38MAPK蛋白表达的影响

目的:探究吴门调脂颗粒方对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠肝组织核转录因子NF-κB(NF-κB)p65、P38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)蛋白表达的影响。方法:选用SD大鼠50只,随机分为空白组、模型组、西药组(灌服80mg/kg/d多烯磷脂酰胆碱)和中药低、高剂量组(灌服4g生药/kg/d、8g生药/kg/d剂量的吴门调脂颗粒方),每组10只大鼠。采用高脂饲料喂养8周复制大鼠脂肪肝实验动物模型后开始给药4周,空白组和模型组给予同体积生理盐水。给药结束后以对应的试剂盒检测血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、还原型谷胱甘肽(GSH)、血清白介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6),HE染色观察脊髓形态变化,应用免疫组化法(IHC)检测肝组织NF-κBp65、P38MAPK蛋白的表达。结果:吴门调脂颗粒方干预NAFLD大鼠4W后。与模型组比较,吴门调脂颗粒方大剂量血清TG、LDL-C、AST、IL-1β、IL-6明显下降(P<0.05或P<0.01或P<0.001)且GSH明显升高(P<0.05),肝组织NF-κBp65过表达明显下调(P<0.05),肝组织脂肪变性及炎症浸润情况亦有不同程度的改善。总体优于吴门调脂颗粒方小剂量且与西药组情况相当。结论:吴门调脂颗粒方能明显减轻NAFLD大鼠的病情,并推测与抑制大鼠肝组织NF-κBp65蛋白过表达密切相关。

易筋经结合穴位埋线治疗肥胖临床疗效观察

目的:观察易筋经结合穴位埋线治疗肥胖的临床疗效。方法:将肥胖患者90例随机分为训练组、治疗组和联合组3组,训练组采用易筋经训练,治疗组采用单纯穴位埋线治疗,联合组在训练组的基础上联合穴位埋线治疗。3组均治疗3个月,治疗前后以体脂率、生化指标、减肥疗效等指标进行测定。结果:训练组脱落1例。联合组体质量、体质量指数(BMI)、平均腰围、平均臀围、体脂率、脐周下脂肪厚度和血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(CHOL),以及满意度和总体减肥疗效均优于单纯训练组和治疗组(P<0.05)。结论:易筋经结合穴位埋线治疗优于单纯易筋经训练和单纯穴位埋线治疗,具有一定临床推广价值。

吴门芪藤汤对高脂饮食诱导的肥胖大鼠前交叉韧带横断和内侧半月板切除所致骨关节炎的影响

目的探讨吴门芪藤汤对肥胖膝骨关节炎(OA)大鼠膝软骨基质金属蛋白酶-3(MMP-3)和基质金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)蛋白表达的影响。方法建立高脂饮食诱导的肥胖大鼠前交叉韧带横断和内侧半月板切除所致OA模型,以随机数字法将模型大鼠分为模型组、吴门芪藤汤组[24 g生药/(kg·d)],黄芪组[12 g生药/(kg·d)],黄芪甲苷组[60 mg/(kg·d)],每组10只。另选取10只同龄大鼠为空白组。吴门芪藤汤组、黄芪组、黄芪甲苷组大鼠给予相对应的药物灌胃,1次/d,连续处理4周,空白组与模型组给予等容积的生理盐水。实验结束后,生化法检测大鼠血清TG、TC、HDL-C、LDL-C水平;ELISA法测定SOD活性、MDA、TNF-α、IL-1β水平;HE染色观察大鼠膝关节软骨的病理变化;Western Blot法检测软骨组织中MMP-3和TIMP-1蛋白的表达情况。结果与空白组比较,模型组血清TG、TC、LDL-C、MDA、TNF-α、IL-1β水平以及软骨组织MMP-3和TIMP-1蛋白表达均显著升高,血清HDL-C水平和SOD活性显著降低,差异具有统计学意义(P<0.05);病理组织学检测结果显示模型组大鼠软骨组织存在损伤的病理变化。与模型组比较,吴门芪藤汤组、黄芪组、黄芪甲苷组的相关指标均有不同程度改善,且吴门芪藤汤的效能最为明显。结论吴门芪藤汤能够改善肥胖大鼠前交叉韧带横断和内侧半月板切除所致OA软骨损伤,调节血脂相关指标,抑制炎症反应、氧化反应,其对肥胖性膝OA的改善作用可能是通过降低膝关节软骨组织中MMP-3和TIMP-1蛋白表达而实现。

“革命性论文”学科扩散的早期识别及影响因素分析:以诺奖论文为例

[目的/意义]革命性论文能够打破某一领域研究现状,促进研究范式的转移。有学者认为革命性论文超出了当前人们的认知范畴,需要经过较长时间才能被认可,并建议基于文献计量学指标的科研评价从更长时间窗口考察论文。这有利于对论文的革命性做出客观、科学的评价,却不利于追踪研究前沿和及时评价研究人员的工作。[方法/过程]以诺奖论文为例,对革命性论文学科扩散的早期特征与影响因素进行了研究,采用学科组合系数对1900-2017年生物医学领域的诺奖论文(革命性论文)与非诺奖论文(常规论文)进行比较,分析了两组论文发表后5年内的学科组合系数大小,并从团队规模、参考文献量、参考文献新旧三个方面对该系数的影响因素进行了分析。[结果/结论]研究发现:70%以上的革命性论文自发表后第2年其学科组合系数高于常规论文,这对追踪研究前沿、制定政府资助政策以及研究人员的评价具有重要启示。团队规模和参考文献量是影响该系数的因素,有待进一步探讨。

枳壳甘草汤抑制巨噬细胞M1极化延缓椎间盘退变的实验研究

目的基于巨噬细胞极化研究枳壳甘草汤延缓椎间盘退变的作用机制。方法将24只SD大鼠随机分为对照组、模型组、中药组,每组8只。模型组和中药组采用针头刺破大鼠尾椎椎间盘造模。中药组采用枳壳甘草汤灌胃,对照组和模型组予等量生理盐水灌胃。干预时间为20天。采用苏木精—伊红染色评估大鼠椎间盘组织的病理改变;免疫荧光检测椎间盘组织诱导型一氧化氮合成酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)表达;酶联免疫吸附测定检测血清白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)和肿瘤坏死因子-α(tumo rnecrosis factor-α,TNF-α)含量;蛋白质印迹法检测iNOS、基质金属蛋白酶-13(matrix metallo proteinase-13,MMP-13)、解聚蛋白样金属基质蛋白酶-5(a disintegrin-like and metalloprotease-5,ADAMTS-5)蛋白表达;实时荧光定量PCR检测MMP-13、ADAMTS-5基因表达。结果病理切片结果显示,模型组椎间盘组织纤维环排列紊乱,髓核与纤维环界限模糊,伴随大量炎性细胞侵袭,中药组椎间盘组织病理改变较模型组有所改善。与对照组比较,模型组大鼠椎间盘MMP-13、ADAMTS-5蛋白和基因的表达显著升高(P<0.05),M1巨噬细胞标记蛋白iNOS表达显著升高(P<0.05),血清促炎因子IL-6和TNF-α含量显著升高(P<0.05)。与模型组比较,中药组大鼠椎间盘MMP-13、ADAMTS-5蛋白和基因的表达降低(P<0.05),iNOS蛋白表达降低(P<0.05),血清促炎因子IL-6和TNF-α含量降低(P<0.05)。结论吴门枳壳甘草汤可以有效延缓椎间盘组织的退变,其机制可能与抑制巨噬细胞M1型极化、调控炎症微环境相关。

健脾合剂对脾虚腹泻型肠易激综合征小鼠肠道菌群的干预研究

目的通过观察健脾合剂对脾虚腹泻型肠易激综合征(IBS-D)模型小鼠的肠道菌群的干预作用,研究健脾合剂对脾虚型IBS-D肠道微生物的影响。方法将清洁级幼龄ICR雄性小鼠48只随机分为四组(n=12),并建立脾虚型IBS-D小鼠模型(3n=36),造模评价成功后,空白组和模型组分别予双蒸水(10ml·kg^(-1))、西药组予复合乳酸菌(0.26 g·kg-1)、中药组予健脾合剂(16 ml·kg^(-1))灌胃,治疗周期均为14天。治疗周期结束后,每组随机抽取5只小鼠,分别标记为B1、B2、B3、B4组,随后通过16SrDNA高通量基因测序法分析治疗前后小鼠肠道菌群的变化。结果本研究测序深度充分,样品均具有良好的丰富度与多样性。与B1组比较,B2组小鼠的肠道菌群多样性明显降低(P <0.05);与B2组比较,B3、B4组小鼠的肠道菌群多样性明显提高(P <0.05);与B1组比较,B3、B4组小鼠肠道菌群多样性无明显差异(P> 0.05),说明健脾合剂和复合乳酸菌的干预均能调节脾虚型IBS-D小鼠肠道菌群达到或接近健康小鼠的肠道菌群稳态;且B3与B4组间的小鼠肠道菌群多样性无明显差异(P> 0.05),推测健脾合剂有益生元样作用;健脾合剂干预后,在门水平,Tenericutes、Actinobacteria、Saccharibacteria丰度上调(P <0.05),Proteobacteria丰度下调(P <0.05);在属水平,Alistipes、Ruminiclostridium、Candidatus_Saccharimonas、Rikenella、Intestinimonas、Lachnoclostridium、Oscillibacter、Coprococcus、Faecalibaculum、Enterorhabdus、Peptococcus、Romboutsia、Papillibacter丰度上调(P <0.05), Lactobacillus、 Bacteroides、 Parasutterella、 Escherichia、 Erysipelatoclostridium、 Parabacteroides、Candidatus_Stoquefichus丰度下调(P <0.05)。结论健脾合剂干预可以增加脾虚型IBS-D小鼠肠道菌群多样性,并调节到与健康小鼠相似的平衡状态。

祛瘀护膜剂调控TGF-β_(1)/p38MAPK信号通路对反流性食管炎模型大鼠食管黏膜修复的影响

目的基于转化生长因子-β_(1)(TGF-β_(1))/p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)信号通路探讨祛瘀护膜剂对反流性食管炎(RE)模型大鼠食管黏膜的修复作用机制。方法取60只健康雄性SPF级大鼠,随机选择10只作为正常组,其余大鼠使用“4.2 mm幽门夹+2/3胃底结扎术”建立反流性食管炎大鼠模型,造模7 d后将大鼠随机分为模型组、西药组、祛瘀护膜剂低剂量组、祛瘀护膜剂中剂量组、祛瘀护膜剂高剂量组,每组10只。祛瘀护膜剂各组给予相应剂量祛瘀护膜剂灌胃,西药组给予铝镁加混悬液灌胃,正常组和模型组给予蒸馏水+淀粉灌胃,均连续灌胃14 d。观察灌胃过程中各组大鼠进食情况、行为状态、体重变化及死亡情况,灌胃结束后采用苏木素-伊红(HE)染色观察各组大鼠食管组织病理变化,运用ELISA法检测各组大鼠血清中TGF-β_(1)水平,采用Western blot法检测各组大鼠食管组织中p38MAPK、TGF-β_(1)蛋白表达情况。结果模型组和祛瘀护膜剂高剂量组各死亡1只,其余给药大鼠进食情况、行为状态均明显好于模型组,体重高于模型组。祛瘀护膜剂各组和西药组大鼠食管黏膜下层炎症明显较模型组轻,祛瘀护膜剂高剂量组黏膜上皮基本恢复。模型组大鼠血清TGF-β_(1)水平及食管组织中p38MAPK、TGF-β_(1)蛋白表达量均明显高于正常组(P均<0.05);祛瘀护膜剂各组和西药组血清TGF-β_(1)水平及食管组织中p38MAPK蛋白表达量均明显低于模型组(P均<0.05),且祛瘀护膜剂中、高剂量组均明显低于西药组和祛瘀护膜剂低剂量组(P均<0.05);祛瘀护膜剂各组和西药组食管组织中TGF-β_(1)蛋白表达量均明显高于模型组(P均<0.05),且祛瘀护膜剂低、中、高剂量组依次增高,各组间比较差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论祛瘀护膜剂可能通过抑制TGF-β_(1)/p38MAPK信号通路的过度激活,在食管黏膜修复的过程中调控TGF-β_(1)的表达,从而促进大鼠反流性食管炎的黏膜愈合。