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转基因抗虫耐除草剂玉米瑞丰125 Cry1Ab/Cry2Aj杀虫蛋白的时空表达分析 被引量:3
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作者 李东阳 肖冰 +3 位作者 王晨尧 杨现明 梁晋刚 吴孔明 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期31-39,共9页
玉米是我国最重要的粮食作物之一,虫害会造成严重的品质和产量损失,转Bacillus thuringiensis(Bt)基因抗虫玉米为玉米害虫的防治提供了新途径。转Bt基因抗虫玉米的抗虫性与外源杀虫蛋白表达量具有密切的关系,明确Bt杀虫蛋白在不同生育... 玉米是我国最重要的粮食作物之一,虫害会造成严重的品质和产量损失,转Bacillus thuringiensis(Bt)基因抗虫玉米为玉米害虫的防治提供了新途径。转Bt基因抗虫玉米的抗虫性与外源杀虫蛋白表达量具有密切的关系,明确Bt杀虫蛋白在不同生育期和不同器官中的表达量,对害虫的综合防治和农业转基因生物安全管理具有重要意义。连续两年采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定了9个地点种植的瑞丰125不同器官中Cry1Ab/Cry2Aj杀虫蛋白表达量,对比分析了玉米拔节期(V6-V8)叶片、抽雄期(VT)雄穗、吐丝期(R1)叶片和花丝、成熟期(R4)叶片和籽粒的Bt杀虫蛋白含量,结果表明Bt杀虫蛋白表达量在不同玉米器官中差异较大。2年9个地点的数据整体上呈现出叶片中Cry1Ab/Cry2Aj杀虫蛋白表达量较高,而籽粒中Cry1Ab/Cry2Aj杀虫蛋白表达量较低的规律。9个地点种植的瑞丰125的Cry1Ab/Cry2Aj杀虫蛋白表达量有所差异,但差异整体较小。 展开更多
关键词 转基因抗虫玉米 瑞丰125 Cry1Ab/Cry2Aj杀虫蛋白 时空表达
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转基因玉米MZIR098定量PCR检测方法的建立
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作者 温洪涛 杨洋 +6 位作者 丁一佳 关海涛 苑冉 张瑞英 李凌燕 梁晋刚 王晶 《计量学报》 CSCD 北大核心 2023年第3期430-439,共10页
利用转基因抗虫耐除草剂玉米MZIR098的5’端旁侧序列信息,设计引物及探针,随后通过qPCR和3D-dPCR平台,建立了玉米MZIR098的转化体特异性双重定量检测方法。经测试后显示,qPCR和3D-dPCR两种检测方法的重复性(相对标准差)均小于25%,符合... 利用转基因抗虫耐除草剂玉米MZIR098的5’端旁侧序列信息,设计引物及探针,随后通过qPCR和3D-dPCR平台,建立了玉米MZIR098的转化体特异性双重定量检测方法。经测试后显示,qPCR和3D-dPCR两种检测方法的重复性(相对标准差)均小于25%,符合转基因检测方法相关标准,并且检出限和定量限也无显著差异。上述结果说明2种方法均可满足转基因定量检测的基本需求,可为今后准确高效地检测玉米MZIR098及其产品提供新的参考方法。 展开更多
关键词 计量学 转基因玉米 MZIR098 定量检测 qPCR 3D-dPCR
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环介导等温扩增技术在转基因作物成分检测中的应用 被引量:3
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作者 梁晋刚 杜再慧 +3 位作者 黄春蒙 张飞燕 许文涛 张秀杰 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期51-55,共5页
转基因作物成分检测为农业转基因生物安全管理提供了重要技术支撑。环介导等温扩增(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)技术操作简便、灵敏度高、特异性强,在转基因作物成分检测中得到了广泛应用。本文针对近年来LAMP技术在... 转基因作物成分检测为农业转基因生物安全管理提供了重要技术支撑。环介导等温扩增(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)技术操作简便、灵敏度高、特异性强,在转基因作物成分检测中得到了广泛应用。本文针对近年来LAMP技术在转基因大豆、玉米和油菜成分检测中的应用情况进行了分析和总结,以期为LAMP技术在转基因作物成分检测中的应用和标准化提供科学参考。 展开更多
关键词 环介导等温扩增技术 转基因作物 成分检测 标准化
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Expression profiles of Cry1Ab protein and its insecticidal efficacy against the invasive fall armyworm for Chinese domestic GM maize DBN9936 被引量:7
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作者 liang jin-gang ZHANG Dan-dan +13 位作者 LI Dong-yang ZHAO Sheng-yuan WANG Chen-yao XIAO Yu-tao XU Dong YANG Yi-zhong LI Guo-ping WANG Li-li GAO Yu YANG Xue-qing YUAN Hai-bin LIU Jian ZHANG Xiu-jie WU Kong-ming 《Journal of Integrative Agriculture》 SCIE CAS CSCD 2021年第3期792-803,共12页
The fall armyworm(FAW)Spodoptera frugiperda,which originated in the Americas,is advancing across China and threatening the nation’s maize crops.Currently,one widely used tool for its control is genetically modified(G... The fall armyworm(FAW)Spodoptera frugiperda,which originated in the Americas,is advancing across China and threatening the nation’s maize crops.Currently,one widely used tool for its control is genetically modified(GM)Bacillus thuringiensis(Bt)maize.Sufficient content of Bt protein in appropriate plant parts is crucial for enhancing resistance against insect pests.In this study,we conducted a systematic investigation of Cry1 Ab levels in Chinese domestic GM maize DBN9936,which has recently obtained a biosafety certificate,and evaluated its efficacy against FAW.Quantification of expression levels of Cry1 Ab,via ELISA,indicated a spatio-temporal dynamic,with significant variation of mean Cry1 Ab,ranging from 0.76 to 8.48μg g-1 FW with the Cry1 Ab protein level ranked as:V6-V8 leaf>R1 leaf>R4 leaf>R1 silk>VT tassel>R4 kernel.Among the nine locations,the Cry1 Ab levels in DBN9936 of the Xinxiang,Langfang,and Harbin fields were significantly lower than those from Wuhan and Shenyang,and were slightly,but not significantly lower than those from the other four fields.Furthermore,the artificial diet-Cry1 Ab mixture and plant tissue feeding bioassays revealed that DBN9936 has high efficacy against FAW.The insecticidal efficacy of different tissues against FAW larvae reached 34-100%with a descending order of lethality as follows:VT leaf>R4 leaf>R1 husk>R1 silk>VT tassel>R4 kernel.Taken together,our results showed that Bt-Cry1 Ab maize DBN9936 has potential as a promising strategy to manage FAW. 展开更多
关键词 fall armyworm genetically modified maize DBN9936 Cry1Ab expression control efficacy
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中国农业转基因生物环境安全检测标准体系现状与展望 被引量:10
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作者 梁晋刚 张开心 +4 位作者 张旭冬 王颢潜 陈子言 刘鹏程 张秀杰 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期1-14,共14页
农业转基因生物环境安全检测标准是农业转基因生物安全管理必不可少的技术保障。截至2021年1月,农业部/农业农村部共发布了农业转基因生物环境安全检测标准47项。本文对我国农业转基因生物环境安全检测标准体系现状进行初步总结,对国内... 农业转基因生物环境安全检测标准是农业转基因生物安全管理必不可少的技术保障。截至2021年1月,农业部/农业农村部共发布了农业转基因生物环境安全检测标准47项。本文对我国农业转基因生物环境安全检测标准体系现状进行初步总结,对国内外农业转基因生物环境安全检测标准的发展现状进行比较,探讨了今后一段时间内农业转基因生物环境安全检测标准的发展方向,以期为我国农业转基因生物环境安全检测标准的进一步完善提供借鉴,使其更好地为农业转基因生物安全管理工作提供技术支撑。 展开更多
关键词 转基因植物 环境安全 标准体系
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转基因玉米成分定性检测能力验证结果与分析 被引量:5
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作者 李夏莹 肖晓琳 +4 位作者 张飞燕 梁晋刚 王顥潜 张旭冬 张秀杰 《食品安全质量检测学报》 CAS 2019年第16期5421-5426,共6页
目的提高检测实验室对转基因玉米成分的检测能力和检测人员专业技术水平,增强实验室竞争力。方法中心实验室依据能力验证作业指导书和农业部公告的要求,参与了ACAS-PT570(2018)粮食转基因检测能力验证测试,分别对编号18-F750和18-K388... 目的提高检测实验室对转基因玉米成分的检测能力和检测人员专业技术水平,增强实验室竞争力。方法中心实验室依据能力验证作业指导书和农业部公告的要求,参与了ACAS-PT570(2018)粮食转基因检测能力验证测试,分别对编号18-F750和18-K388样品进行PCR检测。结果 18-F750和18-K388待测样品中, CaMV35S启动子、FMV35S启动子、NOS终止子、Bt基因、CP4 EPSPS基因、bar/pat基因、59122转化体、MIR162转化体和Bt11转化体均为阳性。结论本次能力验证获得满意评价。 展开更多
关键词 玉米 转基因成分 定性检测 能力验证
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共治追求下的食品安全监管权转型之道 被引量:4
7
作者 梁金钢 秦国荣 《食品与机械》 北大核心 2022年第7期99-104,248,共7页
目的:探寻食品安全“社会共治”适宜的监管权转型路径。方法:分析了食品安全“社会共治”模式的应然状态以及全面将监管权“去中心化”可能面临的次生风险,以释明监管权合理的转型之道。结果:盲目将监管权“去中心化”会造成治理失位和... 目的:探寻食品安全“社会共治”适宜的监管权转型路径。方法:分析了食品安全“社会共治”模式的应然状态以及全面将监管权“去中心化”可能面临的次生风险,以释明监管权合理的转型之道。结果:盲目将监管权“去中心化”会造成治理失位和治理失序的政策性风险,引发更大的食品安全事故。结论:必须明确“严格监管向精细化、灵活化转变”,坚持“社会共治基础性权利的实现”和“主动培育和激发多元主体的治理理性”的食品安全监管权转型之道。 展开更多
关键词 食品安全 社会共治 转型风险 监管权转型之道
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基于多靶标质粒分子的转基因大豆快速筛查方案 被引量:1
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作者 史宗勇 刘璇 +8 位作者 许冬梅 李夏莹 陈子言 梁晋刚 王颢潜 张雨琪 温洪涛 张秀杰 高建华 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第11期1540-1554,共15页
随着我国批准进口和自主研制的转基因大豆转化体数量不断增加,亟需建立覆盖全面、检测靶标数量较少且符合国情的快速筛查方案。另外,为了控制检测工作量,还需构建对应的多靶标质粒(multi-targets plasmid,MTP)分子,作为大豆转基因成分... 随着我国批准进口和自主研制的转基因大豆转化体数量不断增加,亟需建立覆盖全面、检测靶标数量较少且符合国情的快速筛查方案。另外,为了控制检测工作量,还需构建对应的多靶标质粒(multi-targets plasmid,MTP)分子,作为大豆转基因成分检测的阳性物质。本文通过收集整理相关转化体的分子特征信息,获得了29种转基因大豆独立转化体的外源转化元件信息。全面分析其组成情况及使用频率,同时结合我国转基因检测相关标准方法,从而确定一套新的筛查方案。该方案包括8个检测靶标,CaMV 35S启动子(P-35S)、NOS终止子(T-nos)、耐除草剂基因pat、E9终止子(T-E9)、抗虫基因cry1Ac、AHAS启动子(P-AHAS)、pinⅡ终止子(T-pinⅡ)和DP305423转化体的特征序列,以及1个大豆内标准基因Lectin。通过这9个靶标序列的检测,可全面筛查上述29种转基因大豆独立转化体。本文将其称为转基因大豆筛查的"8+1"方案。将这9种靶标的检测序列串联并接入pUC18质粒,获得MTP分子pDDSC-1910。为了验证该分子作为阳性物质的适用性,以其为模板,对9种靶标进行定性PCR分析,结果均能获得预期的特异性扩增产物,且表现出较高的灵敏度。因此,本文建立了一个覆盖全面的转基因大豆筛查新方案,并成功构建了相应的MTP分子作为阳性物质,为转基因大豆的高效筛查和检测工作提供便利。 展开更多
关键词 转基因大豆 筛查 外源元件 阳性物质 质粒
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FAPAS转基因成分检测能力验证结果与分析 被引量:1
9
作者 李夏莹 单露英 +4 位作者 张飞燕 梁晋刚 王顥潜 张旭冬 张秀杰 《食品安全质量检测学报》 CAS 2020年第8期2367-2374,共8页
目的提高转基因成分检测实验室对转基因成分的检测能力和检测人员专业技术水平,增强实验室竞争力。方法依据能力验证作业指导书和标准方法的要求,参与了GeMMU77(2019)食品转基因检测能力验证计划,对玉米和大豆混合样品中的14个参数进行... 目的提高转基因成分检测实验室对转基因成分的检测能力和检测人员专业技术水平,增强实验室竞争力。方法依据能力验证作业指导书和标准方法的要求,参与了GeMMU77(2019)食品转基因检测能力验证计划,对玉米和大豆混合样品中的14个参数进行检测。结果待测样品中,CaMV35S启动子、NOS终止子、GTS40-3-2转化体和MON810转化体为阳性。结论本次能力验证获得满意评价,实验室具备开展转基因成分检测的技术能力。 展开更多
关键词 玉米 大豆 转基因成分 能力验证
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转基因抗虫玉米发展现状与展望 被引量:15
10
作者 梁晋刚 张旭冬 +2 位作者 毕研哲 王颢潜 张秀杰 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期98-104,共7页
转基因抗虫玉米的商业化种植,成为大幅提高农业生产力的主要推进器之一。近年来,转基因抗虫玉米产业化规模不断扩大,有效控制了靶标害虫的发生危害,降低了化学杀虫剂的施用,为粮食安全与农民增收提供了重要保障。介绍了全球转基因抗虫... 转基因抗虫玉米的商业化种植,成为大幅提高农业生产力的主要推进器之一。近年来,转基因抗虫玉米产业化规模不断扩大,有效控制了靶标害虫的发生危害,降低了化学杀虫剂的施用,为粮食安全与农民增收提供了重要保障。介绍了全球转基因抗虫玉米的发展现状,分析了与转基因抗虫玉米种植相关的生态问题,并提出了推进转基因抗虫玉米在我国产业化的相关建议。 展开更多
关键词 转基因玉米 抗虫 产业化
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转基因耐除草剂玉米C0010.2.2定性PCR检测方法的建立 被引量:4
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作者 董文凤 梁晋刚 +5 位作者 李夏莹 刘鹏程 张旭冬 王颢潜 陈子言 张秀杰 《玉米科学》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期57-64,共8页
转基因耐除草剂玉米C0010.2.2是北京大北农生物技术有限公司利用农杆菌介导法,将epsps基因和pat基因转到受体玉米DBN567获得的耐除草剂玉米转化体,具有耐除草剂草甘膦和草铵膦性状。研究建立转基因耐除草剂玉米C0010.2.2的检测方法,在... 转基因耐除草剂玉米C0010.2.2是北京大北农生物技术有限公司利用农杆菌介导法,将epsps基因和pat基因转到受体玉米DBN567获得的耐除草剂玉米转化体,具有耐除草剂草甘膦和草铵膦性状。研究建立转基因耐除草剂玉米C0010.2.2的检测方法,在外源基因插入位点的左、右边界分别设计引物,经过引物筛选、特异性测试、灵敏度测试、退火温度和引物浓度测试,建立转基因耐除草剂玉米C0010.2.2的定性PCR检测方法,该方法的检出限和灵敏度可达到0.1%。验证结果表明,该方法可以特异性检测到转化事件,具有很好的重复性和再现性。 展开更多
关键词 玉米 C0010.2.2 定性PCR
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