DNA条形码技术在快速鉴定石斛兰斑翅康瘿蚊(Contarinia maculipennis Felt)上的应用

石斛兰(Dendrobium nobile)因花形独特、色彩丰富,且植株具有很大药用价值,而深受国际市场喜受。石斛兰在热带、亚热带地区有广泛种植。斑翅康瘿蚊(Contarinia maculipennis Felt)的幼虫可藏于石斛兰花苞中,造成花苞畸形、变色,受到斑翅康瘿蚊危害的兰花的观赏性大大降低,影响其经济价值;斑翅康瘿蚊的老熟幼虫还可弹跳入土化蛹,随鲜花贸易进行远距离传播,目前斑翅康瘿蚊的传播已对日本的冲绳、福冈、宫崎和美国的夏威夷等地的石斛兰产业造成严重经济损失。传统瘿蚊科昆虫种类鉴定主要以形态学特征为依据,对于相近种,尤其是幼虫和卵在形态学鉴定上存在着很大局限性,故需寻找准确、快速鉴定斑翅康瘿蚊的方法,同进建议谨防其入侵我国其他的石斛兰种植区。本研究通过DNA条形码技术成功鉴定采自海南岛的样本为斑翅康瘿蚊,并详细描述了斑翅康瘿蚊的形态特征,为相关检疫部门准确、快速鉴定斑翅康瘿蚊提供科学依据。

检疫性害虫带木蠹象Pissodes castaneus(DeGeer)的鉴定

带木蠹象(Pissodes castaneus)是一种重要的林木入侵害虫,是我国进境植物检疫性有害生物。该虫原产欧洲各国,现已传入非洲和南美洲。国内尚无该虫的分布记录,2017年8月首次在海南洋浦口岸截获。带木蠹象主要为害松科植物的形成层和韧皮部,并在树皮下形成蛹室,可通过进境木材贸易进行远距离传播。笔者利用DNA条形码技术扩增目标样本线粒体CO I基因,与GenBank数据库以及BOLD数据库对比分析,并使用邻接法构建该类昆虫支序图,结果表明试验样品与带木蠹象P. castaneus聚为一支且99%以上同源性。DNA条形码技术为口岸快速检疫通关和入侵林业害虫的检测提供了便捷可能。

危险性潜在入侵害虫角胸长蠹的检疫鉴定

角胸长蠹(Bostrychoplites cornutus(Olivier,1790))分布于非洲、亚洲、欧洲、北美洲等地区,主要为害白梧桐(Triplochiton scleroxylon)、墨西哥丁香(Gliricidia sepium)、罂粟尼索桐(Nesogordonia papaverifera)等经济植物,我国口岸曾多次截获该虫,该虫在我国存在潜在的入侵威胁。本研究对角胸长蠹的分类地位、形态特征、分布、寄主等方面进行介绍,同时列出角胸长蠹与其近似种的形态区别,简化其检疫、鉴定难度,为口岸鉴定提供一定参考价值。

强化手术室护理干预应用于腹腔镜卵巢囊肿切除术中的效果观察

目的探究强化手术室护理干预应用于腹腔镜卵巢囊肿切除术中的效果。方法选取32例行腹腔镜卵巢囊肿切除术患者,按照护理方法不同将其分为对照组与观察组,每组16例。对照组采取手术室常规护理,观察组采取强化手术室护理干预。比较两组患者手术指标和术后并发症发生率。结果观察组患者胃肠道恢复时间、下床活动时间及平均住院时间均明显短于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组、对照组患者术后并发症发生率分别为0、25.00%,观察组患者术后并发症发生率明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论在腹腔镜卵巢囊肿手术中强化手术室护理干预能够有效缩短术后康复时间,降低并发症发生率,具有临床推广价值。

濒危兰科植物DNA的提取方法

濒危兰科植物组织富含多糖和多酚类物质,提取高质量的DNA较困难。为优化濒危兰科植物基因组DNA提取方法,采用改良CTAB法、改良SDS法和试剂盒法对多种濒危兰科植物基因组DNA进行提取,对获得的DNA质量、浓度和纯度进行比较。结果表明,用改良CTAB法和试剂盒法可有效去除多糖类和多酚类物质的干扰,DNA提取效果较理想,改良SDS法较差;CTAB法获得的DNA浓度高于试剂盒法,且后续PCR扩增效果也优于试剂盒法。

濒危兰科植物DNA条形码鉴定体系的建立与优化

通过设计濒危兰科植物DNA条形码ITS,matK和psbA-trnH序列的通用引物并对其PCR反应体系进行优化,对16种有代表性的濒危兰科植物进行PCR扩增和测序,比较各序列的扩增和测序效率。结果表明:ITS,matK和psbA-trnH序列引物对濒危兰科植物的扩增和测序成功率均较高,PCR反应的最佳退火温度分别为ITS 54℃,matK和psbA-trnH 50℃。在上述反应体系和条件下获得的目的条带清晰、明亮,可作为鉴别濒危兰科植物物种的DNA条形码组合。

Suppressor of RNA silencing encoded by Rice gall dwarf virus genome segment 11

Rice gall dwarf virus(RGDV)is an important rice pathogen in China and Southeast Asia.However,little is known about the molecular mechanisms of RGDV interactions with plant cells.Here,we have identi-fied an RGDV protein,Pns11,which acts as a suppressor of RNA silencing in coinfiltration assays with the reporter,green fluorescent protein(GFP)in transgenic Nicotiana benthamiana line 16c carrying GFP.Pns11 suppressed local and systemic silencing induced by sense RNA.The spread of mobile RNA si-lencing signals was blocked or inactivated by Pns11.Expression of Pns11 also enhanced Potato virus X pathogenicity in N.benthamiana.This suppressor could reduce,but not eliminate,siRNA in the local and systemic RNA silencing suppression assays,suggesting that Pns11 functions by interfering with initial stages of RNA silencing.

多巴酚丁胺负荷超声造影诊断冠心病的初步研究

目的探讨多巴酚丁胺负荷超声造影(DESC)在冠心病(CAD)诊断中的应用价值。方法选取2015年11月至2019年6月于东莞康华医院心血管中心行DSEC,并完成了冠状动脉造影(CAG)或冠状动脉CT血管造影(CTA)的患者375例。分别以冠状动脉狭窄≥50%、≥75%为CAD诊断标准,以CAG或CTA结果为对照标准,应用四格表计算DSEC诊断CAD的敏感度、特异度和准确性。结果冠状动脉狭窄≥50%为CAD诊断标准时,以CAG或CTA结果为对照标准,DSEC诊断CAD的敏感度为43%,特异度为95%,准确性为67%。冠状动脉狭窄≥75%为CAD诊断标准时,以CAG或CTA结果为对照标准,DSEC诊断CAD的敏感度为71%,特异度为96%,准确性为88%,较≥50%时的敏感度、特异度和准确性均有提高。2015年11月至2019年6月行DSEC检查的1300例患者中,因发生不良反应导致检查失败16例,心律失常发生率为25%,其中室性早搏最常见。结论DSEC对CAD有较好的诊断和指导治疗价值,药物和运动协同负荷是对传统负荷超声造影的改良,方法简易可行,多巴酚丁胺不良反应可防可治。

三磷酸腺苷和多巴酚丁胺负荷超声造影在冠心病诊断中的对比研究

目的对比研究三磷酸腺苷和多巴酚丁胺负荷超声造影在冠心病诊断中的应用价值。方法纳入2018年11月至2019年6月就诊于东莞康华医院心血管中心、可疑或确诊冠心病的患者86例,所有患者均行三磷酸腺苷和多巴酚丁胺负荷超声造影连续试验,并进行了冠状动脉造影(CAG)或冠状动脉CT血管造影(CTA)检查。分别以冠状动脉狭窄≥50%、≥75%为冠心病诊断标准,以CAG或CTA结果为对照标准,应用四格表计算三磷酸腺苷和多巴酚丁胺负荷超声造影诊断冠心病的敏感度、特异度和准确性。结果冠状动脉狭窄≥50%为冠心病诊断标准时,以CAG或CTA结果为对照标准,三磷酸腺苷负荷超声造影诊断冠心病的敏感度、特异度、准确性分别为56%、96%、77%;多巴酚丁胺负荷超声造影的诊断敏感度、特异度、准确性分别为76%、96%、86%。多巴酚丁胺负荷超声造影的诊断敏感度和准确性均高于三磷酸腺苷负荷超声造影。冠状动脉狭窄≥75%为冠心病诊断标准时,以CAG或CTA结果为对照标准,三磷酸腺苷负荷超声造影诊断冠心病的敏感度、特异度、准确性分别为81%、97%、94%;多巴酚丁胺负荷超声造影的诊断敏感度、特异度、准确性分别为88%、98%、95%。多巴酚丁胺负荷超声造影的诊断敏感度、特异度和准确性均高于三磷酸腺苷负荷超声造影。结论多巴酚丁胺负荷超声造影诊断冠心病的效能优于三磷酸腺苷负荷超声造影,两者联合应用既增加了检查的安全性又提高了诊断阳性率。