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基于用户均衡的双模式接驳公交一体化布局优化 被引量:3
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作者 陈坚 李兆康 +2 位作者 周涛 刘柯良 孙琴梅 《交通运输系统工程与信息》 EI CSCD 北大核心 2023年第3期56-65,共10页
接驳公交是城市公共交通系统的重要部分,用于解决轨道交通乘客“最后一公里”出行难题。针对固定线路接驳公交中边缘地区乘客步行前往公交站时间较长的问题,提出在固定线路公交服务范围边缘处布置需求响应公交,从而实现双模式接驳公交... 接驳公交是城市公共交通系统的重要部分,用于解决轨道交通乘客“最后一公里”出行难题。针对固定线路接驳公交中边缘地区乘客步行前往公交站时间较长的问题,提出在固定线路公交服务范围边缘处布置需求响应公交,从而实现双模式接驳公交一体化布局。为科学且人性化地划分不同模式接驳公交的服务范围,基于用户均衡理论,提出以乘客出行时间均衡为目标的双模式接驳公交一体化布局模型;为在多个达到均衡条件的布局方案中进一步挑选出最优布局方案,建立以乘客出行时间最小为目标的优化模型,并设计遗传算法求解。最后,以重庆东站站前片区为研究案例验证模型与算法的可行性与有效性,求解结果证明双模式接驳公交一体化布局可以在不增加投入车辆数的前提下相比单一固定线路运营模式降低乘客出行时间成本32%;但需求响应模式的加入也会导致公交人均能耗上升83%。 展开更多
关键词 城市交通 公共交通规划 用户均衡 接驳公交 需求响应公交
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成渝地区双城经济圈交通与经济发展空间格局及耦合协调水平研究 被引量:1
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作者 王才雪 陈坚 +3 位作者 万宇 苗国厚 刘柯良 易彤 《交通运输研究》 2023年第2期82-90,99,共10页
为定量测度和优化成渝地区双城经济圈交通与经济发展的关系,利用2014—2018年区域高速公路网络与经济社会发展数据,结合加权时空距离分析法及熵权法,量化测算成渝地区双城经济圈36个行政区的交通可达性与经济发展水平,构建耦合协调度模... 为定量测度和优化成渝地区双城经济圈交通与经济发展的关系,利用2014—2018年区域高速公路网络与经济社会发展数据,结合加权时空距离分析法及熵权法,量化测算成渝地区双城经济圈36个行政区的交通可达性与经济发展水平,构建耦合协调度模型解析两者互动关系。结果表明:成渝地区双城经济圈交通可达性与经济发展水平整体呈上升趋势,但空间分布特征各不相同;研究区域中部与东北部地区耦合协调水平较差;重庆主城区与成都市的辐射效能初步显现,交通可达性与经济发展水平呈以中心城市为核心向外部扩散的“核心-外围”分布格局。因此,交通可达性高不等同于经济发展良好,两者协同发展普遍存在错位现象,促进交通与经济的协调发展仍是成渝地区区域一体化面临的主要任务。 展开更多
关键词 双城经济圈 交通可达性 区域经济 空间格局 耦合协调度
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四川省一些实验动物养殖场SPF大鼠和小鼠肠内容物中金黄色葡萄球菌的检测 被引量:4
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作者 黄伟峰 刘科亮 +4 位作者 刘理达 刘丽 黄玉兰 雷高鹏 杨小蓉 《动物医学进展》 北大核心 2019年第6期130-135,共6页
调查四川省一些实验动物养殖场的实验动物中金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,SA)携带情况,找出传播途径和进化规律,分析其污染原因,为保障实验动物质量提供技术支撑。按照GB/T 14926.14-2001《实验动物金黄色葡萄球菌检测方法》对... 调查四川省一些实验动物养殖场的实验动物中金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,SA)携带情况,找出传播途径和进化规律,分析其污染原因,为保障实验动物质量提供技术支撑。按照GB/T 14926.14-2001《实验动物金黄色葡萄球菌检测方法》对2011年-2017年四川省部分实验动物中SA进行检测,对分离的SA菌株进行PCR耐药基因mecA检测,并应用金黄色葡萄球菌A蛋白(Staphylococcus protein A,SPA)和脉冲场电泳(pulsed field gel electrophoresis,PFGE)进行分子分型。结果显示,2011年-2017年共从7家实验动物养殖场采集并完成370只实验动物中SA的检测,共检出SA 31株,总分离率为12.16%,且均从SPF大鼠中分离所得。31株SA的mecA基因均为阴性。SPA可分成5个型别,其中T2360为优势型别,PFGE型别有10个带型。四川省养殖实验动物中仅SPF大鼠携带SA,不同年份检出SA基因型别基本不同,不同养殖场同一年检出的SA具有相同基因型,说明不同养殖场中的SA可能来自同一污染源,应加强SPF大鼠监控,以确保实验动物的质量。 展开更多
关键词 实验动物 金黄色葡萄球菌 SPA分型 PFGE分型
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社区建成环境对机动车行驶里程影响的空间异质性模型 被引量:3
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作者 陈坚 刘柯良 +2 位作者 李武 邸晶 彭涛 《交通运输系统工程与信息》 EI CSCD 北大核心 2022年第6期124-133,共10页
为指导社区生活圈打造绿色出行环境,定量解析社区建成环境对居民小汽车行驶里程(VMT)影响的空间异质性。基于建成环境的5D维度选取人口密度、土地利用多样性及公交站点密度等6个指标刻画建成环境,在《社区生活圈规划技术指南》的基础上... 为指导社区生活圈打造绿色出行环境,定量解析社区建成环境对居民小汽车行驶里程(VMT)影响的空间异质性。基于建成环境的5D维度选取人口密度、土地利用多样性及公交站点密度等6个指标刻画建成环境,在《社区生活圈规划技术指南》的基础上,结合步行速度和非直线系数等指标差异化界定社区生活圈尺度,利用POI数据和道路网络等地理空间数据测度建成环境。以保定市居民出行行为调查数据作为实证研究数据来源,构建考虑自变量尺度变异的多尺度地理加权回归模型(MGWR)。研究结果表明:对比最小二乘回归(OLS)模型与传统的地理加权回归(GWR)模型,纳入变量尺度异质性的MGWR模型降低了残差的自相关性,且调整后R2相比于GWR模型与OLS模型分别提高了1.8倍与6.0倍;从标准化系数来看,社区建成环境指标中,土地利用混合度和公交服务水平对VMT影响最大;社区建成环境指标中,路网密度与交叉口密度接近全局尺度,空间异质性较弱,其余建成环境变量均具有较强的空间异质性,需要进行差异化的空间设计;社区建成环境指标局部回归系数的空间分布模式呈现“中心-外围”变化趋势,与城市形态有较强的耦合。 展开更多
关键词 城市交通 空间异质性 多尺度地理加权回归 机动车行驶里程 建成环境
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建成环境对城市停车需求影响的非线性模型 被引量:16
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作者 陈坚 刘柯良 +1 位作者 邸晶 彭涛 《交通运输系统工程与信息》 EI CSCD 北大核心 2021年第4期197-203,共7页
为精细化把握城市建设项目在微观空间尺度下的停车需求规律,从空间视角探究停车需求与建成环境之间的关系。通过高峰小时建筑物单位面积的停车生成数表征停车需求,以土地利用混合度、路网密度、公交服务水平等9个因子描述建成环境,分别... 为精细化把握城市建设项目在微观空间尺度下的停车需求规律,从空间视角探究停车需求与建成环境之间的关系。通过高峰小时建筑物单位面积的停车生成数表征停车需求,以土地利用混合度、路网密度、公交服务水平等9个因子描述建成环境,分别构建建成环境对停车需求影响的普通最小二乘(Ordinary Least Squares,OLS)模型与梯度提升迭代决策树(Gradient Boosting Decision Tree,GBDT)模型。以保定市主城区停车调查数据中的商业类配建停车场为对象,基于停车调查数据、兴趣点数据(Point of Interst,POI)、道路网络数据等多源异构数据进行模型实证分析。结果表明,考虑非线性效应的GBDT模型比OLS模型具有更好的拟合度。从影响贡献度来看,配建指标(18.92%)与区位(15.23%)是影响停车需求的最重要建成环境因素,交叉口密度(5.19%)贡献度最小;在非线性关系方面,建成环境因子与停车需求均具有非线性关系与阈值效应,除交叉口密度及人口密度与停车需求呈现U型关系,其余因素与停车需求的关系整体上保持正相关或负相关。 展开更多
关键词 城市交通 建成环境 停车需求 梯度提升迭代决策树 非线性关系
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特高压换流变压器网侧出线装置研究与试制 被引量:13
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作者 刘科良 唐涛 +3 位作者 李金忠 王健 王琳 孙建涛 《变压器》 2021年第2期19-23,共5页
本文中作者介绍了一种1000kV特高压换流变压器网侧出线装置,对其电场进行了仿真分析计算,并通过试验验证了该结构的可行性。
关键词 特高压 换流变压器 网侧出线装置
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龙安柚花毒理学安全性评价 被引量:2
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作者 李蕊瑞 刘科亮 +2 位作者 吴德举 陈锦瑶 张立实 《食品安全质量检测学报》 CAS 北大核心 2021年第16期6586-6593,共8页
目的评估龙安柚花的食用安全性。方法按现行食品安全国家标准进行急性经口毒性试验、细菌回复突变(Ames)试验、哺乳动物红细胞微核试验、体外哺乳类细胞染色体畸变试验、90 d经口毒性试验和致畸试验,并进行统计分析。结果在本试验条件下... 目的评估龙安柚花的食用安全性。方法按现行食品安全国家标准进行急性经口毒性试验、细菌回复突变(Ames)试验、哺乳动物红细胞微核试验、体外哺乳类细胞染色体畸变试验、90 d经口毒性试验和致畸试验,并进行统计分析。结果在本试验条件下,SD大鼠和KM小鼠摄入龙安柚花后均未表现出急性经口毒效应,急性经口半数致死量(lethaldose50,LD50)大于10g/(kg·BW),该花属实际无毒级;龙安柚花未引起TA97a、TA98、TA100、TA102、TA1535菌种发生回复突变;哺乳动物红细胞微核试验与体外哺乳类细胞染色体畸变试验结果均为阴性;90 d经口毒性试验中,与对照组相比,各剂量组各性别动物的体重、摄食量、食物利用率、血液学指标、血生化指标和组织病理学检查均未见特异的毒性改变,龙安柚花的未观察到有害作用剂量(no observed adverse effect level,NOAEL)为8 g/(kg·BW);未观察到致畸作用。结论龙安柚花属实际无毒级,本试验条件下龙安柚花无急性毒性、遗传毒性、致畸性和亚慢性毒性。 展开更多
关键词 龙安柚 柚花 毒理学试验 安全性评价
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特高压阀侧出线装置独立试验系统设计 被引量:1
8
作者 李明 石岩 +3 位作者 李桂苹 刘科良 唐涛 王健 《变压器》 北大核心 2019年第11期49-52,共4页
本文中作者设计了一种阀侧出线装置独立试验系统,对其基本结构和功能进行了介绍,并对试验系统的内部绝缘结构进行了计算和验证。
关键词 特高压 换流变压器 试验
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基于压路机多角度判别的倾轧轨迹面检测算法
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作者 范荣全 林明星 +3 位作者 刘克亮 张劲 刘俊勇 刘友波 《计算机工程与设计》 北大核心 2021年第8期2324-2333,共10页
为实时监控压路机的填压覆盖情况,提出一种基于压路机多角度判别的倾轧轨迹面自动检测算法。提出BOF-MCF(bag-of-feature-matched correlation filter)特征参数,实现压路机角度的自动检测。针对不同角度下的压路机,提出多角度压路机ROI... 为实时监控压路机的填压覆盖情况,提出一种基于压路机多角度判别的倾轧轨迹面自动检测算法。提出BOF-MCF(bag-of-feature-matched correlation filter)特征参数,实现压路机角度的自动检测。针对不同角度下的压路机,提出多角度压路机ROI粗定位及其轮廓二级自动分割算法,结合LSD(line segment detector),自动检测压路机碾轮轴长/架长,将帧间图像的碾轮轴长/架长进行叠加计算,得到压路机倾轧轨迹面。实验对国家电网施工现场的视频数据进行测试,其结果表明,该算法对压路机的角度识别正确率达到90%以上,对倾轧轨迹面识别的正确率为83.00%-92.72%。 展开更多
关键词 压路机 bag-of-feature 角度判别 相关滤波器 轨迹检测
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基于环境项目教学的预防医学课程改革 被引量:1
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作者 陈路路 张建华 +2 位作者 孙林清 刘科良 田玉慧 《教育教学论坛》 2020年第51期229-230,共2页
运用项目驱动教学法,根据预防医学课程特点,以学生参与项目为研究对象,探索适合临床专业学生的教学模式。在项目驱动教学应用过程中,学生参与项目的主动性与关切度很高,30.67%的学生选择多地点学习模式,现场检测、课堂操作、现场实习的... 运用项目驱动教学法,根据预防医学课程特点,以学生参与项目为研究对象,探索适合临床专业学生的教学模式。在项目驱动教学应用过程中,学生参与项目的主动性与关切度很高,30.67%的学生选择多地点学习模式,现场检测、课堂操作、现场实习的学生分别占24.68%、20.08%、24.68%。研究结果显示,项目教学法具有良好的教学效果,有一定的借鉴和指导意义。 展开更多
关键词 预防医学 项目驱动 教学改革
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肠内微生态营养对RICU中老年COPD呼吸衰竭患者营养及免疫功能的影响
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作者 贾小青 戈娜 +2 位作者 李晓燕 刘克亮 高龙 《医学食疗与健康》 2020年第8期21-22,24,共3页
目的:探讨肠内肠内微生态营养营养治疗对RICU重度慢性阻塞性肺疾病并呼吸衰竭患者营养状态、免疫功能、血气分析等的影响。方法:采取随机对照试验方法,将60例COPD急性加重期患者分为肠内微生态营养组(EIEN组)(n=30)和普通肠内营养对照组... 目的:探讨肠内肠内微生态营养营养治疗对RICU重度慢性阻塞性肺疾病并呼吸衰竭患者营养状态、免疫功能、血气分析等的影响。方法:采取随机对照试验方法,将60例COPD急性加重期患者分为肠内微生态营养组(EIEN组)(n=30)和普通肠内营养对照组(n=30)疗程10~14天。比较两组患者治疗前后患者NRS2002-1评分、体质量指数(BMI)、肱三头肌皮褶厚度(TSF)、上臂肌围(MAMC)、血清白蛋白(ALB)、前白蛋白(PA)浓度及感染指标PCT、免疫球蛋白、细胞亚群、血气分析等指标的变化。结果:治疗10~14天后,两组患者营养状况改善无显著差异(P>0.05),但治疗后两组患者营养状况较治疗前均有改善。营养组治疗后免疫功能改善高于对照组(P<0.05)。营养组治疗后血气分析改善高于对照组,营养组治疗的感染指标改善高于对照组。营养组腹泻及腹胀发生率低于对照组,平均住院天数及死亡率低于对照组(P值均<0.05)。结论:肠内微生态营养能明显改善慢性阻塞性肺疾病急性加重期合并呼吸衰竭患者的免疫功能和营养状况,同时能减轻全身炎性反应,促进疾病恢复。 展开更多
关键词 肠内微生态营养 慢性阻塞性肺疾病急性加重期 呼吸衰竭
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Parallel DNA Constrained by“CC^+Clamps”
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作者 liu ke-liang H.Todd Miles +2 位作者 Frank B.Howard Joe Frazier V.Sasisekharan 《Chemical Research in Chinese Universities》 SCIE CAS CSCD 1999年第2期42-47,共6页
Parallel DNA helices with reverse WatsonCrick pairing have been described in several papers.It has been pointed out,however,that the parallel structures may also be in equilibrium with antiparallel WatsonCrick helices... Parallel DNA helices with reverse WatsonCrick pairing have been described in several papers.It has been pointed out,however,that the parallel structures may also be in equilibrium with antiparallel WatsonCrick helices due to their closely similar properties.To avoid the problem we have prepared and characterized DNA helices which are constrained to possess parallel polarity by two dC residues,or CC+clamps,at both the ends of AT oligomer chains.The residues are hemiprotonated below neutral pH,forming two stable CC+base pairs with three hydrogen bonds at each end of the helix.The physical properties of these constructs can then be used to calibrate those of duplexes having the same sequences but lacking the terminal C residues.Though recent studies indicate that dC acid selfstructures are fourstranded with intercalated bases,gel electrophoresis indicates that these structures are not present in the molecules described here. 展开更多
关键词 Parallel DNA helices Reverse Watson-Crick pairing CC+ base pair Oligonucleotide helices Reverse WatsonCrick pairing CC+ base pair Oligonucleotide
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破壁灵芝孢子粉的急性和亚急性毒性评价 被引量:2
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作者 林黎 刘科亮 +2 位作者 兰祎婷 兰真 郭艳 《职业与健康》 CAS 2022年第1期23-26,31,共5页
目的评价破壁灵芝孢子粉的食用安全性。方法进行大鼠和小鼠急性经口毒性试验和大鼠28天喂养试验。选用SPF级KM小鼠和SD大鼠,急性经口毒性试验设15000 mg/(kg·bw)一个剂量组,大、小鼠分别随机分成两组,共4组,每组同系同性10只动物。... 目的评价破壁灵芝孢子粉的食用安全性。方法进行大鼠和小鼠急性经口毒性试验和大鼠28天喂养试验。选用SPF级KM小鼠和SD大鼠,急性经口毒性试验设15000 mg/(kg·bw)一个剂量组,大、小鼠分别随机分成两组,共4组,每组同系同性10只动物。按20 mL/(kg·bw)经口灌胃,首次染毒后观察14天。28天喂养试验设750、1500、3000 mg/(kg·bw)3个剂量组(分别相当于人体推荐摄入量的25、50、100倍)和对照组(全价颗粒饲料),每组同系同性10只动物。第一次染毒后观察28天。每周测量体质量和进食量,染毒结束后测定血常规和血生化指标,解剖大鼠称量脏器,观察有无病理改变。结果大、小鼠急性经口最大耐受剂量(maximum tolerated dose,MTD)值均大于15000 mg/(kg·bw),属于无毒级。大鼠28天喂养试验设750、1500、3000 mg/(kg·bw)3个剂量组和对照组,结果显示,没有发现试验动物在试验过程中出现中毒和死亡情况,每个剂量组的进食量、食物利用率、体质量增重、脏体比值、血常规及末期血生化指标检测结果与阴性对照组比较,除雌鼠高剂量第1周进食量、白细胞计数、血糖显著降低,低中剂量组总蛋白和白蛋白升高,雄鼠高剂量组血糖升高外(均P<0.05),其余指标差异均无统计学意义(均P>0.05)。大鼠脏器和组织都没有发现异常。结论在本次实验条件下,破壁灵芝孢子粉没有显示有急性和亚急性毒性。 展开更多
关键词 破壁灵芝孢子粉 安全性 毒理学
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尘肺患者外周血胸腺细胞分化抗原-1 DNA甲基化的改变及意义 被引量:8
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作者 王宇欣 周慈 +7 位作者 王和静 王凯 张娜 车双双 刘科良 蔺文轩 李思睿 刘志宏 《环境与职业医学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期242-247,共6页
[目的 ]尘肺是严重影响我国职业人群健康的一种发病率较高的职业病。通过检测尘肺患者外周血胸腺细胞分化抗原-1(Thy-1)DNA甲基化水平,旨在探讨其与尘肺发病的关系。[方法 ]对84例确诊为尘肺病的男性患者以及具有相同接尘史且同地点工作... [目的 ]尘肺是严重影响我国职业人群健康的一种发病率较高的职业病。通过检测尘肺患者外周血胸腺细胞分化抗原-1(Thy-1)DNA甲基化水平,旨在探讨其与尘肺发病的关系。[方法 ]对84例确诊为尘肺病的男性患者以及具有相同接尘史且同地点工作的75例健康男性工人进行调查。尘肺患者分为煤工尘肺组(40人)和矽肺组(44人),健康工人作为对照组。在知情同意的情况下收集血液样本进行研究。采用ELISA法检测人胶原蛋白Ⅰ(COL-Ⅰ)、胶原蛋白Ⅱ(ICOL-Ⅲ)、Smad蛋白2/3(Smad2/3)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)蛋白的表达,qRT-PCR法检测DNA甲基转移酶1(DNMT1)、DNA甲基转移酶3A(DNMT3A)、DNA甲基转移酶3B(DNMT3B)及甲基结合蛋白-2(MeCP2)基因mRNA的表达,巢式降落式甲基化特异性PCR法检测Thy-1 DNA甲基化水平。[结果 ]矽肺组工人COL-Ⅰ、COL-Ⅲ蛋白表达水平高于煤工尘肺组和对照组(P <0.05),后两者间差异无统计学意义(P> 0.05)。矽肺组工人Smad2/3、TGF-β1、TNF-α,煤工尘肺组工人TGF-β1、TNF-α蛋白表达水平均较对照组提高(P <0.05),且矽肺组Smad2/3、TGF-β1蛋白表达水平也高于煤工尘肺组(P <0.05)。甲基转移酶中:DNMT1、DNMT3A基因mRNA表达水平3组间未呈现差异(P> 0.05),但煤工尘肺组、矽肺组DNMT3B基因mRNA表达较对照组升高(P <0.05)。矽肺组MeCP2基因的mRNA表达也较对照组升高(P <0.05)。与对照组相比,煤工尘肺组、矽肺组工人Thy-1 DNA甲基化水平均升高(P <0.05)。Thy-1 DNA甲基化水平与TGF-β1、Smad2/3、TNF-α蛋白表达呈正相关关系(r=0.25、0.17、0.31,均P <0.05)。[结论]基于尘肺患者Thy-1 DNA甲基化的表达检测,本研究认为Thy-1 DNA甲基化水平发生变化,可能是调控尘肺病发展进程中表观遗传学机制之一。 展开更多
关键词 尘肺 胸腺细胞分化抗原-1 DNA甲基化 肺纤维化
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西藏边坝县3~5岁儿童龋病与体重指数的关系研究 被引量:5
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作者 刘科良 伏学峰 +2 位作者 郝雪琦 王耀峰 孙林清 《中国儿童保健杂志》 CAS CSCD 2021年第6期682-684,693,共4页
目的分析西藏边坝县3~5岁儿童的体重指数(BMI)与龋失补指数(DMFT)之间的关系,为制定儿童牙齿健康的预防措施提供科学依据。方法 2019年5-8月随机抽取昌都市边坝县所辖11个乡镇卫生院登记在册的265例3~5岁儿童,其中男性136例,女性129例... 目的分析西藏边坝县3~5岁儿童的体重指数(BMI)与龋失补指数(DMFT)之间的关系,为制定儿童牙齿健康的预防措施提供科学依据。方法 2019年5-8月随机抽取昌都市边坝县所辖11个乡镇卫生院登记在册的265例3~5岁儿童,其中男性136例,女性129例。选取经过统一培训的具有执业医师资格的口腔专业儿科医生,使用统一的探针和口镜等检查设备对儿童进行口腔检查并记录龋失补牙数,计算DMFT值。运用校正过的同一身高体重测量仪,对儿童的身高体重在同一时间段内进行测量,计算BMI,采用SPSS 22.0统计软件进行统计分析龋病与BMI之间的关系。结果不同组间儿童BMI、DMFT比较,差异均有统计学意义(F=14.824,P<0.001;H=33.125,P=0.002)。通过散点图分析显示龋失补指数与BMI呈负相关,Spearman相关系数结果显示呈中等相关(rs=-0.68,P=0.001),且差异有统计学意义。结论 3~5岁儿童DMFT与BMI关系密切,应定期对儿童的口腔卫生进行检查,提高儿童的生活质量。 展开更多
关键词 体重指数 龋失补指数 儿童龋病
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5-Aza-dC对硫酸铍诱导A549细胞中TβRⅡDNA甲基化的作用
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作者 刘科良 孙林清 +3 位作者 王耀峰 李思睿 徐海明 刘志宏 《毒理学杂志》 CAS CSCD 2022年第6期485-489,共5页
目的探讨5-氮杂-2’-脱氧胞苷(5-Aza-2’-deoxycytidine,5-Aza-dC)对BeSO_(4)诱导人肺腺癌A549细胞中转化生长因子-βⅡ型受体(TβRⅡ)DNA甲基化的作用。方法建立BeSO_(4)染毒的A549细胞培养实验模型,采用CCK-8法检测细胞增殖活性,荧光... 目的探讨5-氮杂-2’-脱氧胞苷(5-Aza-2’-deoxycytidine,5-Aza-dC)对BeSO_(4)诱导人肺腺癌A549细胞中转化生长因子-βⅡ型受体(TβRⅡ)DNA甲基化的作用。方法建立BeSO_(4)染毒的A549细胞培养实验模型,采用CCK-8法检测细胞增殖活性,荧光定量聚合酶链反应(Quantitative Real-time PCR)检测TβRⅡ、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、胶原蛋白Ⅲ(COL-Ⅲ)和胶原蛋白Ⅰ(COL-Ⅰ)的mRNA表达;用5-Aza-dC进行干预,采用巢式降落式甲基化特异性PCR法检测TβRⅡDNA甲基化水平,用蛋白质印迹法(Western blot)检测TβRⅡ蛋白相对表达水平。结果根据细胞增殖结果建立低、中、高剂量组(终浓度分别为1、10和100μmol/L);BeSO_(4)可以诱导细胞形态变化,从椭圆形紧密连接的上皮细胞到纺锤形松散连接的间质细胞,并且随着暴露时间的延长,形态变化更加明显,BeSO_(4)在不同时间内诱导的细胞存活率随暴露时间延长而降低,最终选用细胞存活相对较多且低、中、高剂量组差异均有统计学意义的48 h作为干预时间;PCR结果显示:与对照组相比,BeSO_(4)各剂量组α-SMA、COL-Ⅲ和COL-Ⅰ的mRNA表达水平升高,这提示A549细胞胶原过量形成;与对照组相比,BeSO_(4)中、高剂量组的TβRⅡDNA甲基化水平分别增加77.52%和96.71%(P<0.05),5-Aza-dC干预组TβRⅡDNA甲基化水平较中剂量组降低28.60%(P<0.05);与对照组相比,BeSO_(4)低、中剂量组TβRⅡmRNA表达水平升高,中、高剂量组TβRⅡ蛋白相对表达水平分别升高117.49%、203.08%(P<0.05);5-Aza-dC干预后,TβRⅡ蛋白的表达水平较中剂量组降低15.22%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论5-Aza-dC干预可导致BeSO_(4)诱导的A549细胞TβRⅡDNA甲基化程度降低。 展开更多
关键词 转化生长因子-βⅡ型受体 DNA甲基化 5-AZA-DC
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