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水稻线粒体基因orf290功能的初步研究 被引量:2
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作者 杨梦醒 姜慧 +3 位作者 田泽 刘学群 谭艳平 王春台 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期1-6,共6页
从红莲型不育系粤泰A(YTA)线粒体基因组中克隆并鉴定了一个6.7kb的CMS相关片段HLsp1,序列预测发现了2个orf,其中一个编码290个氨基酸,暂命名为orf290。构建带有线粒体信号肽的超表达载体35S::Rf1b5'::orf290,通过农杆菌介导转化受... 从红莲型不育系粤泰A(YTA)线粒体基因组中克隆并鉴定了一个6.7kb的CMS相关片段HLsp1,序列预测发现了2个orf,其中一个编码290个氨基酸,暂命名为orf290。构建带有线粒体信号肽的超表达载体35S::Rf1b5'::orf290,通过农杆菌介导转化受体保持系粤泰B(YTB),以水稻的单拷贝基因蔗糖磷酸合成酶基因(SPS)作为内参基因,以潮霉素抗性基因(hpt)作为目的检测基因,基于实时荧光定量PCR鉴定转基因T0代植株中外源基因的拷贝数,并对阳性植株进行花粉镜检和结实率统计。结果显示获得了2株单拷贝转35S::Rf1b5′::orf290植株,并且都有orf290的表达。单拷贝超表达orf290植株的平均花粉可育度30.8%,平均套袋结实率41.6%。这些结果初步证实,线粒体基因orf290可能与水稻细胞质雄性不育相关。 展开更多
关键词 水稻 细胞质雄性不育 线粒体 orf290 超表达
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鄂西南地区稻瘟病菌AVR-Pia动态变化研究 被引量:2
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作者 韩旭晨 董岩 +6 位作者 韩豪杰 谭艳平 刘学群 刘新琼 徐鑫 李开 王春台 《中国农学通报》 2022年第21期112-121,共10页
为了解鄂西南地区稻瘟病菌AVR-Pia的分布和动态变化,于2017—2020年在鄂西南9个地点同时种植特定100个水稻品种,采集感病稻杆并分离稻瘟病菌;利用水稻单基因系IRBLa-A进行致病性鉴定,设计无毒基因AVR-Pia特异性引物进行PCR扩增和序列分... 为了解鄂西南地区稻瘟病菌AVR-Pia的分布和动态变化,于2017—2020年在鄂西南9个地点同时种植特定100个水稻品种,采集感病稻杆并分离稻瘟病菌;利用水稻单基因系IRBLa-A进行致病性鉴定,设计无毒基因AVR-Pia特异性引物进行PCR扩增和序列分析。结果表明2017—2020年分离保存的661株稻瘟病菌菌株中,有49株含有无毒基因AVR-Pia(占7.4%),不同年份及不同地点AVR-Pia出现频率差异明显,2017—2020年分别为7.5%、16.0%、3.1%、5.0%,AVR-Pia出现频率最高的是野三关(15.8%),其次是柏杨和来凤(都是14.6%),咸丰、建始和太平未出现。含Pia的单基因系IRBLa-A对其中91个菌株(13.8%)具有抗性。49个菌株能扩增出463 bp的特异性条带,序列分析发现其CDS区域未发现突变,起始密码子上游109 bp位点发生碱基突变G/T,该位点变异是否与表达相关有待进一步研究。说明鄂西南地区无毒基因AVR-Pia存在较少,抗性基因Pia不适合在鄂西南地区作为主效抗病基因来选择育种。 展开更多
关键词 稻瘟病菌 AVR-Pia 动态变化 鄂西南地区 变异机理
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鄂西南地区24个水稻品种稻瘟病发病比较 被引量:2
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作者 韩豪杰 韩旭晨 +5 位作者 谭艳平 刘学群 刘新琼 徐鑫 李开 王春台 《中国农学通报》 2020年第16期115-119,共5页
为比较24个水稻品种在鄂西南不同地区稻瘟病发病情况,筛选适合鄂西南种植的水稻品种,在2018、2019年分别在鄂西南10个地点(忠路、来凤、巴东、建始、长阳、鹤峰、宣恩、柏杨和咸丰,以武汉黄陂作对照)种植24个水稻品种,调查叶瘟和穗颈瘟... 为比较24个水稻品种在鄂西南不同地区稻瘟病发病情况,筛选适合鄂西南种植的水稻品种,在2018、2019年分别在鄂西南10个地点(忠路、来凤、巴东、建始、长阳、鹤峰、宣恩、柏杨和咸丰,以武汉黄陂作对照)种植24个水稻品种,调查叶瘟和穗颈瘟发病情况。结果表明,2019年各地点的发病情况明显高于2018年,10个地点中发病最严重是宣恩,而咸丰2年都没有品种发生稻瘟病。在实验的24个品种中’荣优华占’抗性最好,适合在鄂西南推广种植。 展开更多
关键词 水稻 叶瘟 穗颈瘟 鄂西南 品种
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不同水稻品种OsVDAC3及3个互作蛋白基因OsV3IP1-3表达模式分析
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作者 王亚楠 程钢 +5 位作者 覃永华 谭艳平 刘学群 徐鑫 刘新琼 王春台 《中国农学通报》 2019年第6期101-107,共7页
为研究OsVDAC3及互作蛋白基因OsV3IP1-3的表达模式,用生物信息学和定量PCR方法分析了水稻不育系‘粤泰A’(YTA)、保持系‘粤泰B’(YTB)和‘日本晴’(NIP)不同发育时期幼穗,四叶期根、鞘和叶中OsVDAC3和OsV3IP1-3的表达量。生物信息学分... 为研究OsVDAC3及互作蛋白基因OsV3IP1-3的表达模式,用生物信息学和定量PCR方法分析了水稻不育系‘粤泰A’(YTA)、保持系‘粤泰B’(YTB)和‘日本晴’(NIP)不同发育时期幼穗,四叶期根、鞘和叶中OsVDAC3和OsV3IP1-3的表达量。生物信息学分析表明在ATG上游含有21个与水稻生长发育及胁迫应答相关的顺式作用元件;RiceXPro和MSU Rice Genome Annotation Project水稻基因表达数据库分析结果表明在NIP中OsV3IP1只在幼苗表达,而OsVDAC3、OsV3IP2和OsV3IP3在整个生活周期都表达,但OsVDAC3在花药表达水平最高,OsV3IP2在生殖器官表达水平最高,OsV3IP3在嫩芽中表达量最高。定量PCR结果表明OsVDAC3和OsV3IP1-3基因在NIP、YTA和YTB 3个水稻品种中表达模式不同。OsVDAC3在YTB的1.5~4.0 cm幼穗表达水平非常高,OsV3IP1在3个品种的四叶期地上部都有非常高的表达,OsV3IP2和OsV3IP3在YTB和NIP中表达模式相似,而与YTA中差异明显。这些基因的表达模式与功能的关系有待进一步研究。 展开更多
关键词 水稻 OsVDAC3 OsV3IP1-3 表达模式
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CRISPR/Cas9敲除恢复基因Rf6降低其近等基因系的育性
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作者 田泽 李佳洋 +2 位作者 王春台 刘学群 谭艳平 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2018年第24期8034-8040,共7页
利用CRISPR/Cas9系统的特异性及定位编辑的特性对近等基因恢复系L-Rf6中的Rf6进行基因编辑,以验证恢复基因敲除后该近等基因系的育性是否降低。本研究利用CRISPR/Cas9系统对水稻恢复基因Rf6的序列构建了pC1300-Cas9-Rf6载体,通过农杆菌... 利用CRISPR/Cas9系统的特异性及定位编辑的特性对近等基因恢复系L-Rf6中的Rf6进行基因编辑,以验证恢复基因敲除后该近等基因系的育性是否降低。本研究利用CRISPR/Cas9系统对水稻恢复基因Rf6的序列构建了pC1300-Cas9-Rf6载体,通过农杆菌介导转化近等基因恢复系L-Rf6 (具有红莲型不育系的细胞质和保持系的细胞核背景),得到转基因阳性植株,完成转基因植株中的目的基因的序列分析和育性统计。结果表明,T0-Cas9-L-Rf6转基因的编辑率为79.17%。T0-Cas9-L-Rf6育性统计显示,T0-Cas9-L-Rf6的植株的花粉育性和小穗结实率均明显降低。本研究为进一步探究恢复基因对不育基因的作用机理提供了实验材料和新的研究途径。 展开更多
关键词 近等基因系 水稻 恢复基因 CRISPR/Cas系统
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The effect of the rice blast resistance gene Pi36 on the expression of disease resistance-related genes 被引量:3
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作者 liu XinQiong LI YuanYuan +4 位作者 WANG LiYuan liu xuequn WANG ChunTai WANG Ling PAN QingHua 《Chinese Science Bulletin》 SCIE EI CAS 2010年第18期1881-1888,共8页
The resistance gene Pi36 confers a stable and high level of resistance against Chinese isolates of the rice blast pathogen Mag-naporthe oryzae.Quantitative real time RT-PCR was used to investigate the expression profi... The resistance gene Pi36 confers a stable and high level of resistance against Chinese isolates of the rice blast pathogen Mag-naporthe oryzae.Quantitative real time RT-PCR was used to investigate the expression profiles of various resistance-related genes in both the Pi36/AvPi36 incompatible interactions.Among 17 members of the OsMAPK family,OsMAPK2,OsMAPK4,OsMAPK8 and OsMAPK15 were differentially expressed,as were OsWRKY30,OsWRKY32,OsWRKY64 and OsWRKY67 among the 13 OsWRKY members studied.The induction of the expression of genes from both of these families suggests that both the JA and SA pathways are involved in Pi36-mediated defence.Other genes differentially expressed included the OsbZIP transcription factors,OsNIF1 and OsNIF2,and the NPR1 homologue OsNH2,all of which were reported in the rice blast pathosystem.The in-volvement of these genes illustrates the complexity of the downstream signalling pathways involved in the Pi36/AvrPi36 interaction. 展开更多
关键词 抗病相关基因 水稻稻瘟病 抗稻瘟病基因 基因差异表达 NPR1基因 PCR技术 抗性基因 稻瘟病菌
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水稻OsVDAC6的表达及亚细胞定位
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作者 龚秋涵 覃永华 +3 位作者 刘学群 刘新琼 李开 王春台 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2020年第13期4164-4169,共6页
VDAC(Voltage-dependent anion channel)是位于线粒体外膜上参与细胞质和线粒体膜间物质及能量交换的主要通道,在细胞程序性死亡、能量代谢、物质运输以及信号转导过程中起着重要的作用。前期实验室在水稻基因组中鉴定出8个OsVDAC基因... VDAC(Voltage-dependent anion channel)是位于线粒体外膜上参与细胞质和线粒体膜间物质及能量交换的主要通道,在细胞程序性死亡、能量代谢、物质运输以及信号转导过程中起着重要的作用。前期实验室在水稻基因组中鉴定出8个OsVDAC基因。为研究OsVDAC6的功能,本研究根据水稻OsVDAC6的ORF序列设计引物,将相应编码区克隆至原核表达载体pET-32a(+)中,通过IPTG诱导Os VDAC6融合蛋白表达,利用Western Blot检测目的蛋白。构建了pM999-OsVDAC6-GFP瞬时表达载体,转化水稻原生质体后用激光共聚焦显微镜观察荧光信号。结果表明OsVDAC6被成功克隆到pET-32a(+)和pM999-GFP载体,0.5mmoL/L IPTG 16℃诱导8 h可大量表达49 kD可溶性目的蛋白,并且Os VDAC6定位于线粒体。本试验结果为进一步研究OsVDAC6的功能提供了科学依据。 展开更多
关键词 水稻 OsVDAC6 克隆 表达 亚细胞定位
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水稻胞质不育相关蛋白ORF290及互作蛋白对酵母生长的影响
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作者 夏栋 谭艳平 +3 位作者 刘学群 刘新琼 李开 王春台 《分子植物育种》 CAS 北大核心 2023年第9期2933-2940,共8页
orf290是本实验室从红莲型水稻细胞质雄性不育品种‘粤泰A’(YTA)中克隆的一个与雄性不育相关的线粒体基因,前期通过膜蛋白酵母双杂交获得了2个与ORF290互作的蛋白APX8和E37。为探讨ORF290与APX8和E37发生相互作用时对酿酒酵母NMY51生... orf290是本实验室从红莲型水稻细胞质雄性不育品种‘粤泰A’(YTA)中克隆的一个与雄性不育相关的线粒体基因,前期通过膜蛋白酵母双杂交获得了2个与ORF290互作的蛋白APX8和E37。为探讨ORF290与APX8和E37发生相互作用时对酿酒酵母NMY51生长的影响,本实验利用膜蛋白酵母双杂交DUAL membrane系统,分别将诱饵蛋白和互作蛋白基因构建到pBT3-SUC-和pPR3-N-载体上,获得pBT3-SUC-orf290、pPR3-N-APX8和p PR3-N-E37质粒,然后分别单转和共转(pBT3-SUC-orf290与pPR3-N-APX8,pBT3-SUCorf290与pPR3-N-E37)酵母NMY51菌株。在RNA和蛋白水平分别证实相关基因在转化酵母中高效表达,并且相关蛋白以膜蛋白的形式存在。含不同质粒酵母生长曲线测定结果表明,宿主菌NMY51、单独转化pBT3-SUC-orf290、p PR3-N-APX8和pPR3-N-E37的NMY51酵母生长曲线相近,体内ATP含量无明显差异,而共表达ORF290与APX8或E37的酵母菌株的生长明显低于对照组,ATP含量也明显降低。这表明ORF290与APX8或E37互作后通过降低体内ATP水平导致酵母生长受到抑制。 展开更多
关键词 细胞质雄性不育 线粒体 orf290 互作蛋白 酵母生长
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