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加味独活寄生合剂及含药血清主要成分超高效液相色谱-四级杆-时间飞行质谱仪分析 被引量:4
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作者 邝高艳 严可 +3 位作者 卢敏 卢芳国 谭旭仪 沈浮 《中医药导报》 2020年第15期70-74,共5页
目的:通过超高效液相色谱-四级杆-时间飞行质谱仪(UPLC-Q-TOF)分析加味独活寄生合剂及含药血清,筛选出其主要物质成分及入血清成分。方法:采用Agilent Extend C18(2.1 mm×50 mm,1.8μm)色谱柱,流动相:乙腈-水(水中含0.1%甲酸,质谱... 目的:通过超高效液相色谱-四级杆-时间飞行质谱仪(UPLC-Q-TOF)分析加味独活寄生合剂及含药血清,筛选出其主要物质成分及入血清成分。方法:采用Agilent Extend C18(2.1 mm×50 mm,1.8μm)色谱柱,流动相:乙腈-水(水中含0.1%甲酸,质谱级)按规定条件进行梯度洗脱,流速:0.4 mL/min,进样量:2μL,质谱检测条件:离子化方式为电喷雾离子化(ESI),准确质量数用ESI-L Low Concentration Tuning Mix(G1969-85000)校正,正离子分析模式,通过比较样品峰、保留时间等质谱信息,并结合提取离子流图及与对照品、相关文献数据对比进行化学成分确认。结果:(1)加味独活寄生合剂UPLC-Q-TOF分析确认了47个共有峰,通过分析比对主要包括亚麻酸甲酯、腺苷、邻苯二甲酸二异丁酯、金合欢基丙酮、十二酸甘油酯等47个化合物,主要来源为加味独活寄生合剂处方中的独活、桑寄生、杜仲、秦艽等,当前的条件分析尚未检测到细辛的药物成分。(2)加味独活寄生合剂含药血清UPLC-Q-TOF分析指认33个共有峰,通过分析比对主要包括邻苯二甲酸二异丁酯、金合欢基丙酮、十二酸甘油酯、邻苯二甲酸丁辛酯、桃叶珊瑚苷等33个化合物,主要来源为加味独活寄生合剂处方中的独活、桑寄生、杜仲、制天南星、黄芩、木瓜、威灵仙等。当前的条件分析加味独活寄生合剂含药血清中尚未检测到细辛、肉桂、秦艽、当归4味药物成分。结论:UPLC-Q-TOF指认了加味独活寄生合剂47个共有峰,含药血清33个共有峰,从整体上系统地反映加味独活寄生合剂的物质化学信息,初步确认了33个入血化学成分,以提示加味独活寄生合剂的药效物质基础,为药效实验提供了参考和依据。 展开更多
关键词 加味独活寄生合剂 含药血清 超高效液相色谱-四级杆-时间飞行质谱仪分析 主要成分
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基于“互联网+”医学微生物学双语教学模式的构建与探索 被引量:4
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作者 宁毅 卢芳国 +4 位作者 魏科 胡珏 陈伶利 高强 向琴 《教育教学论坛》 2018年第16期103-104,共2页
随着医学高等教育与国际接轨,更好地培养高级医学人才,在医学微生物学教学中开展双语教学是适应当代医学高等教育发展的根本需要。以互联网为平台,结合中医药高等院校医学微生物学教学特点,本文从网络平台搭建、采用循序渐进、重点章节... 随着医学高等教育与国际接轨,更好地培养高级医学人才,在医学微生物学教学中开展双语教学是适应当代医学高等教育发展的根本需要。以互联网为平台,结合中医药高等院校医学微生物学教学特点,本文从网络平台搭建、采用循序渐进、重点章节讲解、多元方法教学等几个方面对开展微生物学双语教学进行了探索,并提出了双语教学所面临的问题。 展开更多
关键词 互联网+ 微生物学 双语教学 教学改革
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A型流感病毒对肺巨噬细胞自噬的影响及麻杏石甘汤含药血清的干预作用 被引量:13
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作者 李玲 张波 +5 位作者 卢芳国 蔡亮 高强 胡珏 何谷良 吴涛 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期878-883,共6页
目的探讨麻杏石甘汤含药血清对A型流感病毒诱导的肺巨噬细胞自噬的干预作用。方法以A型流感病毒感染的RAW264. 7细胞为研究对象,分为麻杏石甘汤含药血清低、中、高剂量组、奥司他韦组、3-MA+流感病毒组、流感病毒组、3-MA组、雷帕霉素... 目的探讨麻杏石甘汤含药血清对A型流感病毒诱导的肺巨噬细胞自噬的干预作用。方法以A型流感病毒感染的RAW264. 7细胞为研究对象,分为麻杏石甘汤含药血清低、中、高剂量组、奥司他韦组、3-MA+流感病毒组、流感病毒组、3-MA组、雷帕霉素组、空白组,干预12 h后,分别用激光共聚焦显微镜和透射电镜技术检测细胞自噬情况;Western blot法检测自噬标志蛋白LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ表达。结果麻杏石甘汤含药血清能不同程度抑制流感病毒诱导的细胞自噬标志蛋白LC3的膜聚集,抑制细胞内自噬小体和自噬溶酶体的增加,以及LC3-Ⅱ的表达和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值,且呈现一定的量效关系。结论麻杏石甘汤可能通过抑制A型流感病毒诱导的细胞自噬,最终调控A型流感病毒的致病作用。 展开更多
关键词 流感病毒 肺巨噬细胞 自噬 麻杏石甘汤含药血清 雷帕霉素 LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值
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流感病毒诱导的小鼠肺上皮细胞损伤及外泌体miRNA差异表达谱研究 被引量:10
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作者 马心悦 朱梦晨 +5 位作者 卢芳国 陈雨露 王平 赵澄 黄家望 李玲 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期40-49,共10页
目的:通过研究甲型流感病毒刺激后小鼠肺上皮细胞源性外泌体的微小RNA(miRNA)差异表达谱,探讨流感病毒诱导肺上皮细胞损伤的机制。方法:采用甲型流感病毒(MOI=0.2)诱导小鼠肺上皮MLE-12细胞,同时设空白对照组,通过CCK-8法检测不同诱导... 目的:通过研究甲型流感病毒刺激后小鼠肺上皮细胞源性外泌体的微小RNA(miRNA)差异表达谱,探讨流感病毒诱导肺上皮细胞损伤的机制。方法:采用甲型流感病毒(MOI=0.2)诱导小鼠肺上皮MLE-12细胞,同时设空白对照组,通过CCK-8法检测不同诱导时间下的细胞活力,明确甲型流感病毒诱导细胞损伤的最佳条件。通过流式细胞术检测细胞凋亡水平,RT-qPCR和Western blot检测炎症反应相关因子的表达水平。采用超速离心法提取甲型流感病毒诱导的MLE-12细胞上清液中的外泌体,并通过透射电镜、纳米颗粒跟踪分析、Western blot及高通量单细胞测序检测外泌体形态、粒径、浓度、膜标志蛋白表达及其miRNA差异表达谱。结果:CCK-8实验结果显示,MOI=0.2的甲型流感病毒干预8 h的MLE-12细胞活力抑制率最为符合本研究需要。以该条件干预细胞,凋亡率(24.11%±0.17%)显著升高;甲型流感病毒核蛋白(NP)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)的mRNA和蛋白表达水平均显著升高。透射电镜观察到提取的外泌体为圆形的囊泡状;纳米颗粒跟踪分析检测到甲型流感病毒感染的细胞上清液中外泌体的粒径分布发生明显改变;Western blot检测到外泌体膜标志蛋白(CD63、CD81和TSG101)的表达。细胞测序结果共检测出154个差异表达的miRNAs,其中82个呈上调趋势,72个呈下调趋势;挑选出10个进行RT-qPCR验证,有6个与测序结果一致。结论:流感病毒诱导小鼠肺上皮细胞损伤的机制可能与外泌体特异性miRNA有关。 展开更多
关键词 肺上皮细胞 甲型流感病毒 外泌体 微小RNA 高通量单细胞测序
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免疫抑制剂对小鼠流感病毒性肺炎模型建立的影响 被引量:5
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作者 吴佳敏 张晨阳 +5 位作者 卢芳国 魏科 邓雅琪 李博杨 吴肖男 李玲 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第10期1446-1450,共5页
目的:将免疫学原理应用于流感病毒性肺炎小鼠模型的制备,并筛选出适宜浓度的免疫抑制剂浓度,从而建立一个稳定的流感病毒性肺炎小鼠模型。方法:(1)设免疫抑制剂环磷酰胺高[100 mg/(kg·d)]、中[75 mg/(kg·d)]、低[50 mg/(kg... 目的:将免疫学原理应用于流感病毒性肺炎小鼠模型的制备,并筛选出适宜浓度的免疫抑制剂浓度,从而建立一个稳定的流感病毒性肺炎小鼠模型。方法:(1)设免疫抑制剂环磷酰胺高[100 mg/(kg·d)]、中[75 mg/(kg·d)]、低[50 mg/(kg·d)]剂量组、对照组和正常组,各组腹腔注射相对应浓度的环磷酰胺或等量的生理盐水,1次/2 d,除正常组外其余各组于4 d后进行A型流感病毒滴鼻感染,于7 d后取材。检测小鼠体重、脾指数、肺病理变化、脾病理变化以及白介素4(IL-4)表达情况。(2)实验设环磷酰胺单用组、病毒单用组、环磷酰胺+病毒组、正常组。用筛选出的适宜浓度的免疫抑制剂及同上一部分造模方式进行造模,分别于滴鼻当天与第1、3、5、7天取材,检测小鼠体重、脾指数、肺病理变化、当天与第7天脾病理变化以及IL-4表达情况。结果:(1)免疫抑制剂适宜剂量的筛选结果显示:免疫抑制剂环磷酰胺高、中剂量均可使小鼠免疫功能显著抑制,而感染病毒,而高剂量组小鼠死亡率明显高于中剂量组,故本研究拟以中剂量组[75 mg/(kg·d)]作为适宜剂量。(2)流感病毒性肺炎小鼠模型建立结果显示:肺部损伤以抑制剂+病毒组最为严重,模型稳定。结论:环磷酰胺中剂量组的用药剂量75 mg/(kg·d)为造模的免疫抑制剂适宜剂量,并且免疫抑制剂有利于建立稳定的流感病毒性小鼠肺炎模型。 展开更多
关键词 环磷酰胺 A型流感病毒 病毒性肺炎 免疫抑制剂
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精品在线开放课程免疫学基础与病原生物学的推广与应用研究 被引量:4
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作者 魏科 卢芳国(指导) +5 位作者 陈伶利 胡珏 宁毅 熊涛 高强 李珊 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第17期2148-2151,2155,共5页
春季延期开学,高校如何整合和利用已有的线上优质精品课程开展在线教学,确保疫情期间的教学质量是值得积极探索,也是助力教育现代化的重大机遇。本教学团队从2月5日起启动省级精品在线开放课程免疫学基础与病原生物学的在线运行,开课1个... 春季延期开学,高校如何整合和利用已有的线上优质精品课程开展在线教学,确保疫情期间的教学质量是值得积极探索,也是助力教育现代化的重大机遇。本教学团队从2月5日起启动省级精品在线开放课程免疫学基础与病原生物学的在线运行,开课1个月,在线学习人数已达15687人,学生来自全国33所高等院校。本文从免疫学基础与病原生物学课程前期基础、在线推广应用措施、在线推广应用初步成效、问题和展望等部分探讨“抗疫”时期精品在线开放课程的推广和应用策略。 展开更多
关键词 精品在线开放课程 免疫学基础与病原生物学 教育现代化 课程建设
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Systematic Pharmacological Strategies to Explore the Regulatory Mechanism of Ma Xing Shi Gan Decoction on COVID-19 被引量:3
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作者 ZHANG Shi-Ying LI Ling +3 位作者 ZHANG Ning XIA Hong-Tao lu fang-guo LI Wei-Qing 《Digital Chinese Medicine》 2020年第2期96-115,共20页
Objective To use systematic pharmacological strategies to explore the regulatory mechanisms of Ma Xing Shi Gan Decoction(MXSGD)against the coronavirus disease 2019(COVID-19).Methods Data on the compounds and targets o... Objective To use systematic pharmacological strategies to explore the regulatory mechanisms of Ma Xing Shi Gan Decoction(MXSGD)against the coronavirus disease 2019(COVID-19).Methods Data on the compounds and targets of MXSGD were collected from the Traditional Chinese Medicene Systems Parmacology Database and Analysis Platform(TCMSP)and TCM Databases@Taiwan.Data on ACE2-related targets and the protein-protein interaction(PPI)were collected from the String database.The Cytoscape 3.7.2 was used to construct and analyze the networks.The DAVID platform was used for Gene Ontology(GO)and pathway enrichment analyses.Results Data on 272 MXSGD targets and 21 SARS-CoV-2 potential targets were collected.Four networks were constructed and analyzed based on the data:(1)compound-target network of MXSGD;(2)MXSGD-SARS-CoV-2-PPI network;(3)cluster of MXSGD-SARS-CoV-2-PPI network;(4)Herb-Pathway-Target network.The core targets included AKT1,MAPK3,IL-6,TP53,VEGFA,TNF,CASP3,EGFR,EGF and MAPK1.The antiviral biological processes were inflammatory responses(inflammatory cells,inflammatory cytokines and their signaling pathways),immune responses(T cells,monocytes,B cells and other immune cells),immune factors(IFN-γ,TNF-αand so on),virus defense,humoral immunity and mucosal innate immune response.The antivirus-related signaling pathways included TNF,NOD-like receptor,FoxO,PI3K-AKT and Toll-like receptor signaling pathways.Conclusions MXSGD can control disease progression by regulating multiple compounds and targets;it can reduce inflammation and balance immunity by regulating several proteins that interact with ACE2 and signaling pathways closely related to disease development. 展开更多
关键词 Coronavirus disease 2019(COVID-19) Ma Xing Shi Gan Decoction(MXSGD) Network pharmacology Mechanism ACE2 receptor
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Discussion on Etiology and Pathogenesis of Corona Virus Disease 2019 from“Cold-dampness and Insidious Dryness” 被引量:1
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作者 lu fang-guo WU TAO +2 位作者 XIAO Wen-Ming WANG Ping ZHAO Cheng 《Digital Chinese Medicine》 2020年第1期50-54,共5页
Based on the characteristics of the epidemic situation and the authors’understanding of the related ancient books and documents,this paper explores the etiology and pathogenesis of Corona Virus Disease 2019(COVID-19)... Based on the characteristics of the epidemic situation and the authors’understanding of the related ancient books and documents,this paper explores the etiology and pathogenesis of Corona Virus Disease 2019(COVID-19)from 5 aspects:abnormal climate in"warm winter",unique geographical location,pathogenesis evolution of cold and dampness mixed with insidious dryness,transmission and change of"triple energizer"of toxic pathogens,and game between healthy Qi and toxic pathogens.Combined with the special treatment of traditional Chinese medicine(TCM),the purpose is to make a modest contribution to curbing the epidemic situation with TCM. 展开更多
关键词 2019 novel corona virus(2019-nCoV) Pneumonia Pathogenic pathogens of cold and dampness Game between healthy Qi and toxic pathogen Hubei Province Hunan Province
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麻杏石甘汤通过外泌体miR-1249-5p靶向SLC4A1抑制流感病毒细胞级联损伤效应研究 被引量:1
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作者 马心悦 黄家望 +5 位作者 冯芷莹 刘卓琳 王康宇 卢芳国 朱梦晨 李玲 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期2832-2840,共9页
目的探究麻杏石甘汤通过外泌体miR-1249-5p靶向溶质载体家族4成员A1(solute carrier family 4 member 1,SLC4A1)抑制流感病毒诱导的肺上皮细胞损伤-巨噬细胞极化的级联损伤效应的作用机制。方法以肺上皮细胞为研究对象,采用CCK-8检测麻... 目的探究麻杏石甘汤通过外泌体miR-1249-5p靶向溶质载体家族4成员A1(solute carrier family 4 member 1,SLC4A1)抑制流感病毒诱导的肺上皮细胞损伤-巨噬细胞极化的级联损伤效应的作用机制。方法以肺上皮细胞为研究对象,采用CCK-8检测麻杏石甘汤含药血清的安全剂量和对流感病毒刺激肺上皮细胞治疗剂量,NanoSight鉴定肺上皮细胞源外泌体的粒径和浓度,qRT-PCR检测外泌体中miR-1249-5p基因表达。以与肺上皮细胞源外泌体共培养的巨噬细胞为研究对象,采用qRT-PCR检测巨噬细胞中miR-1249-5p、SLC4A1和核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)通路相关基因表达;Western blotting检测巨噬细胞中SLC4A1和NF-κB通路相关蛋白表达;流式细胞术和qRT-PCR检测巨噬细胞M1/M2极化表型。结果CCK-8结果显示,10%和20%的麻杏石甘汤含药血清对肺上皮细胞无细胞毒性,显著抑制流感病毒诱导的肺上皮细胞损伤(P<0.05、0.01);NanoSight检测各组肺上皮细胞源外泌体大小无明显变化,外泌体浓度有所改变;qRT-PCR结果显示流感病毒刺激的肺上皮源外泌体miR-1249-5p基因表达明显降低(P<0.01),各给药组miR-1249-5p基因表达显著升高(P<0.05、0.001)。肺上皮源外泌体共培养后的巨噬细胞中miR-1249-5p基因表达与外泌体相一致(P<0.05、0.001);qRTPCR和Western blotting结果显示,模型组巨噬细胞SLC4A1和NF-κB通路基因和蛋白表达显著升高(P<0.01、0.001),各给药组SLC4A1和NF-κB通路基因和蛋白表达显著下降(P<0.05、0.01);流式细胞术结果显示模型组巨噬细胞CD86+比例明显增高(P<0.01),各给药组巨噬细胞CD86+比例显著降低(P<0.05);qRT-PCR结果显示共培养后模型组巨噬细胞肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)和IL-1β的表达显著升高(P<0.01、0.001),IL-10和转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)的表达显著下降(P<0.05、0.01),各给药组以上因子表达趋势与之相反(P<0.05、0.01、0.001)。结论麻杏石甘汤可能通过肺上皮细胞源外泌体递送miR-1249-5p到巨噬细胞中,并靶向巨噬细胞中SLC4A1调控NF-κB信号通路,抑制流感病毒的细胞级联损伤效应的作用机制。 展开更多
关键词 麻杏石甘汤 A型流感病毒 功能性外泌体 miR-1249-5p 肺泡上皮细胞 肺泡巨噬细胞
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仙茅多糖作为流感疫苗佐剂对小鼠巨噬细胞的免疫增强作用 被引量:8
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作者 蔡琨 卢芳国 +3 位作者 杨娟 杨翠萍 崔瑾 宣锦 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期1344-1347,共4页
目的:从体内外2个方面探讨仙茅多糖作为流感疫苗佐剂对巨噬细胞的抗原提呈能力和释放活性因子的影响。方法:在体外实验中,以小鼠巨噬细胞株RAW264.7为研究对象,用流式细胞仪检测不同浓度的仙茅多糖对细胞表面CD80、CD86和MHC-Ⅱ表达量... 目的:从体内外2个方面探讨仙茅多糖作为流感疫苗佐剂对巨噬细胞的抗原提呈能力和释放活性因子的影响。方法:在体外实验中,以小鼠巨噬细胞株RAW264.7为研究对象,用流式细胞仪检测不同浓度的仙茅多糖对细胞表面CD80、CD86和MHC-Ⅱ表达量的影响,用ELISA法检测细胞培养上清中TNF-α、IL-1、IL-6的水平;在体内实验中,以昆明种小鼠作为研究对象,仙茅多糖与流感疫苗同时注射对小鼠进行免疫,免疫3d后提取各组小鼠腹腔巨噬细胞,对其免疫效果进行评价。结果:在体外实验中,不同浓度的仙茅多糖刺激RAW264.7细胞后,细胞表面CD80、CD86和MHC-Ⅱ都有不同程度表达上调,同时使培养液中TNF-α、IL-1和IL-6含量上升,与阴性对照组比较,差异显著(P<0.05,P<0.01);在体内实验中,不同浓度的仙茅多糖可使腹腔巨噬细胞表面CD80、CD86和MHC-Ⅱ都有不同程度表达上调(P<0.05,P<0.01)。结论:仙茅多糖在体内外可以促进小鼠巨噬细胞的抗原提呈作用,能增强流感疫苗的免疫效应,有望成为具有潜在应用价值的流感疫苗佐剂。 展开更多
关键词 仙茅多糖 巨噬细胞 流感疫苗 抗原提呈 免疫增强 佐剂 细胞活性因子 体内外
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A型流感病毒对小鼠肺部菌群及趋化因子CCL5和CXCL10的影响及麻杏石甘汤干预作用研究 被引量:21
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作者 王平 赵澄 +5 位作者 卢芳国 吴涛 张香港 魏科 李玲 田维毅 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2020年第21期5523-5537,共15页
目的探索麻杏石甘汤(Maxing Shigan Decoction,MSD)通过影响小鼠肺部菌群及趋化因子CCL5和CXCL10表达而防治流感病毒感染的潜在机制。方法通过鼻腔接种法建立A型流感病毒感染小鼠模型,经ig给药或生理盐水3、7 d后,计算肺指数和肺指数抑... 目的探索麻杏石甘汤(Maxing Shigan Decoction,MSD)通过影响小鼠肺部菌群及趋化因子CCL5和CXCL10表达而防治流感病毒感染的潜在机制。方法通过鼻腔接种法建立A型流感病毒感染小鼠模型,经ig给药或生理盐水3、7 d后,计算肺指数和肺指数抑制率,HE染色检测肺组织病理变化,应用免疫组化、酶联免疫吸附试验(ELISA)、实时荧光定量PCR(RT-PCR)法检测肺组织中CCL5和CXCL10蛋白和mRNA表达变化,并取小鼠肺组织进行16S rRNA基因V3~V4可变区测序、物种注释及聚类,分析Alpha多样性和Beta多样性及组间差异物种,分析CCL5、CXCL10表达与肺部菌群变化的关系。结果给药3 d后,模型组肺指数明显高于对照组(P<0.01)和药物组(P<0.05、0.01),肺部炎性细胞浸润明显。麻杏石甘汤组肺部炎性细胞浸润明显减轻,肺指数抑制率与奥司他韦组相似,肺损伤的组织学定量评价指标(IQA)值较模型组明显降低(P<0.01)。模型组CCL5和CXCL10表达明显高于对照组(P<0.01),奥司他韦组和麻杏石甘汤组CCL5和CXCL10表达明显低于模型组(P<0.05、0.01)。16S rRNA基因测序结果显示,模型组拟杆菌属、埃希菌属、变形杆菌属相对丰度增加,粪球菌属相对丰度降低。奥司他韦和麻杏石甘汤能显著降低拟杆菌属、埃希菌属、变形杆菌属相对丰度,增加粪球菌属相对丰度;Alpha多样性分析结果显示各组ACE指数、Chao1指数、Shannon指数比较P>0.05,组间丰富度和多样性无差异。Beta多样性分析结果显示,给药3 d后,组间样品点无交集,组间肺菌群构成有差异。各组间有显著性差异物种。Spearman相关性分析显示,CCL5和CXCL10表达与埃希菌属、变形杆菌属、拟杆菌属丰度呈正相关,与粪球菌属丰度呈负相关。给药7 d后,各组间肺部菌群结构组成及CCL5、CXCL10表达无显著差异。结论麻杏石甘汤可能通过促进肺部有益菌生长改善肺部微生态环境及免疫微环境,对流感病毒引起的肺损伤有一定的保护作用。 展开更多
关键词 A型流感病毒 麻杏石甘汤 肺部菌群 趋化因子 CCL5 CXCL10 鼻腔接种法 Alpha多样性 Beta多样性 拟杆菌属 埃希菌属 变形杆菌属 粪球菌属 ACE指数 Chao1指数 Shannon指数 Spearman相关性分析
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麻杏石甘汤对流感病毒感染小鼠肠道菌群及趋化因子CCL5、CXCL10的影响 被引量:14
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作者 王平 赵澄 +9 位作者 卢芳国 吴涛 张香港 陈纯静 肖荣 宁毅 魏科 李玲 蔡琨 田维毅 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期160-175,共16页
目的探索麻杏石甘汤(Maxing Shigan Decoction)通过影响小鼠肠道菌群组成及趋化因子产生而防治流感病毒感染的潜在机制。方法通过鼻腔接种法建立A型流感病毒感染小鼠模型,经ig给药3 d和7 d后,观察小鼠体质量等一般情况;HE染色检测结肠... 目的探索麻杏石甘汤(Maxing Shigan Decoction)通过影响小鼠肠道菌群组成及趋化因子产生而防治流感病毒感染的潜在机制。方法通过鼻腔接种法建立A型流感病毒感染小鼠模型,经ig给药3 d和7 d后,观察小鼠体质量等一般情况;HE染色检测结肠组织病理变化;免疫组化检测结肠组织趋化因子CCL5、CXCL10的表达;酶联免疫法检测结肠组织中CCL5、CXCL10含量,并取小鼠肠内容物进行16SrRNA基因V3~V4可变区测序、物种注释及聚类,进行Alpha多样性和Beta多样性分析,线性判别式分析[linear discriminant analysis(LDA)effect size,LEfSe]筛选组间差异物种,冗余分析及Spearman等级相关系数分析肠道菌群与CCL5、CXCL10的关联性。结果给药3 d后,模型组小鼠体质量下降(P<0.01),肠黏膜固有层中炎性细胞明显浸润且高表达CCL5和CXCL10(P<0.01),结肠组织匀浆中CCL5和CXCL10含量增加(P<0.01);与模型组比较,各药物组小鼠体质量明显增加,炎性细胞浸润减少,CCL5、CXCL10阳性表达细胞减少,肠组织匀浆中CCL5、CXCL10含量降低,以奥司他韦组和麻杏石甘汤组差异显著(P<0.05、0.01)。菌群多样性分析和物种差异分析结果显示,给药3 d后,模型组小鼠肠道菌群组成与对照组及各药物组存在明显差异。模型组小鼠变形菌门、埃希菌属相对丰度较对照组明显增加(P<0.05),厚壁菌门、乳杆菌属、粪球菌属相对丰度明显降低(P<0.05、0.01);与模型组比较,各药物组变形菌门、埃希菌属相对丰度降低(P<0.05),奥司他韦组和麻杏石甘汤组厚壁菌门相对丰度显著增加(P<0.01),抗病毒颗粒组颤螺旋菌属相对丰度增加(P<0.05),麻杏石甘汤组乳杆菌属、粪球菌属相对丰度增加(P<0.05、0.01)。给药7 d后,模型组小鼠结肠组织病变减轻,趋化因子表达下降,变形菌门、埃希菌属相对丰度较给药3 d后明显降低(P<0.01);与模型组比较,各药物组疣微菌门相对丰度明显降低(P<0.05、0.01),拟杆菌门相对丰度明显升高(P<0.05)。关联性分析显示,小鼠结肠组织中CCL5、CXCL10含量与埃希菌属、克雷伯菌属、梭菌属、粪球菌属等相对丰度显著相关(P<0.05、0.01)。结论A型流感病毒感染可引起小鼠肠道菌群结构紊乱及免疫功能失衡,麻杏石甘汤通过调节肠道菌群结构并影响趋化因子的产生,对流感病毒引起的肠道免疫损伤有一定的保护作用。 展开更多
关键词 A型流感病毒 麻杏石甘汤 肠道菌群 趋化因子 CCL5 CXCL10
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麻杏石甘汤对流感病毒肺部感染模型肺组织TLR2/4-MyD88信号通路蛋白表达的影响 被引量:4
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作者 何谷良 吴涛 +7 位作者 卢芳国 赵澄 胡珏 张香港 陈纯静 魏科 李玲 宁毅 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期435-440,共6页
目的:从肺组织TLR2/4-MyD88信号通路蛋白表达水平探索麻杏石甘汤抗流感病毒效应机制。方法:经鼻腔接种建立流感病毒肺部感染模型,设正常对照组、模型对照组、奥司他韦组、抗病毒口服液组、麻杏石甘汤组。各治疗组经灌胃给药3、7 d,常规... 目的:从肺组织TLR2/4-MyD88信号通路蛋白表达水平探索麻杏石甘汤抗流感病毒效应机制。方法:经鼻腔接种建立流感病毒肺部感染模型,设正常对照组、模型对照组、奥司他韦组、抗病毒口服液组、麻杏石甘汤组。各治疗组经灌胃给药3、7 d,常规法检测肺指数、肺指数抑制率;HE染色法观察肺组织的病理变化;免疫组织化学法和免疫印迹法检测肺组织TLR2、TLR4、MyD88、NF-κB蛋白表达水平。结果:与正常对照组比较,模型对照组肺指数显著升高(P<0.05);与模型对照组比较,给药治疗3 d的麻杏石甘汤组肺指数显著降低(P<0.05)。与正常对照组比较,模型对照组小鼠肺组织充血水肿,大量炎症细胞浸润;与模型对照组比较,给药治疗3、7 d的麻杏石甘汤组小鼠肺组织病理损伤得到明显改善。免疫组化结果显示:给药3 d,与正常对照组比较,模型对照组肺组织TLR2、TLR4、NF-κB蛋白表达水平显著升高(P<0.05);与模型对照组比较,麻杏石甘汤组肺组织内TLR2、TLR4、NF-κB蛋白表达水平显著下降(P<0.05);给药7 d,与正常对照组比较,模型对照组肺组织内MyD88蛋白表达水平显著升高(P<0.05);与模型对照组比较,麻杏石甘汤组肺组织内MyD88蛋白表达水平显著下降(P<0.05)。免疫印迹法显示:给药3 d,与正常对照组比较,模型对照组肺组织内TLR2、TLR4、MyD88、NF-κB蛋白表达水平显著升高(P<0.05);与模型对照组比较,麻杏石甘汤组肺组织各蛋白表达水平显著降低(P<0.05);给药7 d,各组间差异无统计学意义。结论:麻杏石甘汤可能是通过调节TLR2/4-MyD88信号通路相关蛋白的表达水平而发挥抗流感病毒作用。 展开更多
关键词 麻杏石甘汤 流感病毒 TLR2/4-MyD88信号通路 肺组织 机制
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龟甲胶对胃溃疡模型小鼠治疗作用及机制研究 被引量:7
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作者 赵澄 吴涛 +6 位作者 熊涛 王平 张香港 陈纯静 王磊 卢芳国 何清湖 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第10期4957-4961,共5页
目的:探讨龟甲胶对胃溃疡模型小鼠的治疗作用及其机制。方法:以食用醋酸灌胃构建小鼠胃溃疡模型,实验设正常对照组、模型对照组、三九胃泰组、龟甲胶组,经灌胃给药或0.9%氯化钠溶液1周后,常规法检测体质量、脾/胸腺指数、乳糖酶活性、... 目的:探讨龟甲胶对胃溃疡模型小鼠的治疗作用及其机制。方法:以食用醋酸灌胃构建小鼠胃溃疡模型,实验设正常对照组、模型对照组、三九胃泰组、龟甲胶组,经灌胃给药或0.9%氯化钠溶液1周后,常规法检测体质量、脾/胸腺指数、乳糖酶活性、胃残留率、胃溃疡指数及胃溃疡抑制率,滴定法检测胃液酸度,HE染色法检测胃、小肠、结肠的病理变化,ELISA法检测血清白介素(IL)-1β、IL-6、IL-8和胃泌素的含量水平。结果:与正常对照组比较,模型对照组体质量、脾指数、胸腺指数显著下降(P<0.01),胃液酸度、胃溃疡指数、胃残留率、胃和小肠中乳糖酶活力、血清IL-1β、IL-8和胃泌素含量水平显著升高(P<0.05,P<0.01),胃组织黏膜充血水肿、黏膜上皮细胞丢失、炎症细胞浸润,小肠和结肠上皮结构紊乱,大量炎性细胞浸润。与模型对照组比较,龟甲胶组体质量、脾指数、胸腺指数显著升高(P<0.01),胃液酸度、胃溃疡指数、胃残留率、胃和小肠乳糖酶活力、血清IL-1β、IL-8和胃泌素含量水平显著降低(P<0.01,P<0.05),胃组织黏膜充血水肿减轻、炎性细胞浸润减少,小肠和结肠组织上皮结构完整,排列有序。结论:龟甲胶可通过降低胃液酸度,减少IL-1β、IL-8和胃泌素的分泌,降低溃疡指数,从而发挥对胃溃疡的治疗作用。 展开更多
关键词 龟甲胶 胃溃疡 胃泌素 炎症因子 溃疡指数 机制
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《免疫学基础与病原生物学》移动交互式数字教材在“抗疫”时期在线教学中的应用 被引量:4
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作者 李玲 卢芳国 +5 位作者 魏科 陈伶利 胡珏 宁毅 熊涛 高强 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第8期2597-2602,共6页
新型冠状病毒肺炎疫情暴发以来,全国各级各类学校延期开学,但停课不停教、停课不停学。各学校教师利用各种网络资源开展在线教学,也为深入挖掘"互联网+教育"教学新模式带来了契机。本文以《免疫学基础与病原生物学》移动交互... 新型冠状病毒肺炎疫情暴发以来,全国各级各类学校延期开学,但停课不停教、停课不停学。各学校教师利用各种网络资源开展在线教学,也为深入挖掘"互联网+教育"教学新模式带来了契机。本文以《免疫学基础与病原生物学》移动交互式数字教材(云教材)应用为例,介绍如何应用移动交互式数字教材创设合理的学习情境,从而实现交互式学习,提升线上学习教学效果。 展开更多
关键词 新型冠状病毒肺炎 免疫学基础与病原生物学 移动交互式数字教材 在线教学
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基于TLR7/8介导的IFN-α/β蛋白表达水平探讨麻黄先煎之麻杏石甘汤抗流感病毒的机制 被引量:33
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作者 张世鹰 何谷良 +8 位作者 卢芳国 李玲 张波 戴冰 魏科 陈山泉 宁毅 胡珏 吴涛 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期1188-1193,共6页
目的:基于TLR7/8介导的IFN-α/β蛋白表达水平探讨麻黄先煎之麻杏石甘汤抗流感病毒效应机制。方法:以TLR7/8激活剂(R848)、抑制剂(抗体TLR7和抗体TLR8)干预的小鼠巨噬细胞为对照,以酶联免疫吸附技术检测流感病毒干预小鼠巨噬细胞24、48h... 目的:基于TLR7/8介导的IFN-α/β蛋白表达水平探讨麻黄先煎之麻杏石甘汤抗流感病毒效应机制。方法:以TLR7/8激活剂(R848)、抑制剂(抗体TLR7和抗体TLR8)干预的小鼠巨噬细胞为对照,以酶联免疫吸附技术检测流感病毒干预小鼠巨噬细胞24、48h的IFN-α/β分泌水平。以流感病毒干预的小鼠巨噬细胞为对照,以酶联免疫吸附技术和Western Blot技术检测麻黄先煎之麻杏石甘汤含药血清干预24、48h的流感病毒感染的小鼠巨噬细胞IFN-α/β分泌水平和蛋白表达水平。结果:与正常大鼠血清组及胎牛血清组比较,TLR7/8激活剂(R848)与流感病毒干预24、48h的RAW264.7细胞IFN-α和IFN-β分泌水平和蛋白表达水平显著升高(P<0.05);与病毒干预组比较,四药同煎及麻黄先煎20、25、30min之麻杏石甘汤含药血清作用24、48h后,流感病毒感染后的巨噬细胞IFN-α/β的分泌水平和蛋白表达水平显著降低(P<0.05);与四药同煎组比较,在含药血清作用48h的时间点,麻黄先煎25min之麻杏石甘汤组IFN-α分泌水平显著降低(P<0.05)。结论:流感病毒感染对TLR7/8介导的IFN-α/β蛋白分泌水平有明显的上调作用,麻杏石甘汤能够下调流感病毒感染的巨噬细胞IFN-α/β分泌水平和蛋白表达水平,在作用48h时间点,麻黄先煎25min之麻杏石甘汤含药血清对IFN-α分泌水平的调节作用优于四药同煎。 展开更多
关键词 流感病毒 Toll样受体 IFN-Α IFN-Β 麻杏石甘汤 煎煮 先煎
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Pathological Relationship between Intestinal Flora and Osteoarthritis and Intervention Mechanism of Chinese Medicine 被引量:11
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作者 WU Yong-rong KUANG Gao-yan +3 位作者 lu fang-guo WANG Heng-xin lu Min ZHOU Qing 《Chinese Journal of Integrative Medicine》 SCIE CAS CSCD 2019年第9期716-720,共5页
Chinese medicine(CM) has a good clinical effect on osteoarthritis(OA), but the mechanism is not very clear. Evidence-based medicine researches have shown that intestinal flora plays a role in the pathogenesis and succ... Chinese medicine(CM) has a good clinical effect on osteoarthritis(OA), but the mechanism is not very clear. Evidence-based medicine researches have shown that intestinal flora plays a role in the pathogenesis and succession of OA. Intestinal flora affects the efficacy of CM, and CM can affect the balance of intestinal flora. This paper focuses on the relationship between intestinal flora, intestinal microenvironment, brain-gut axis, metabolic immunity and OA, and preliminarily expound the significance of intestinal flora in the pathogenesis of OA and the mechanism of CM intervention. The above discussion will be of great significance in the prevention and treatment of OA by CM from the perspective of intestinal flora. 展开更多
关键词 OSTEOARTHRITIS INTESTINAL FLORA PATHOGENESIS treatment mechanism of Chinese MEDICINE
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基于网络药理学的中药来源灭螺药物相关靶点筛选 被引量:2
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作者 熊涛 郭锦璐 +3 位作者 卢芳国 刘佳豪 郑涛 李佳珊 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期588-597,共10页
目的基于网络药理学筛选中药来源潜在植物灭螺药相关靶点,并探索其灭螺机制。方法通过回顾性文献分析筛选具有灭螺活性的中药并对其灭螺效果进行综合梳理,基于网络药理学方法通过中药系统药理学数据库与分析平台、UniProt数据库和文献... 目的基于网络药理学筛选中药来源潜在植物灭螺药相关靶点,并探索其灭螺机制。方法通过回顾性文献分析筛选具有灭螺活性的中药并对其灭螺效果进行综合梳理,基于网络药理学方法通过中药系统药理学数据库与分析平台、UniProt数据库和文献挖掘获得各类中药活性成分及相应潜在靶点。采用Cytoscape 3.7.2构建药物-活性成分-相关靶点网络图,利用Metascape数据库对关键靶点进行京都基因和基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。结果文献分析中共筛选出27种中药来源灭螺药物,归为14类。网络药理学分析获得活性成分190种,药物-活性成分-相关靶点网络中贡献度较高的活性成分包括槲皮素、乙酸亚油醇、木犀草素、β-胡萝卜素、(24S)-乙基胆甾-5,22,25-反-3β-醇、原阿片碱、牛蒡子苷等;筛选出相应潜在靶点181个,KEGG通路富集分析发现这些靶点主要定位于神经活性配体-受体相互作用、脂肪细胞脂解调控、心肌细胞的肾上腺素能信号等16条通路。结论本研究初步展示了27种灭螺药物的多成分、多靶点、多通路作用机制,筛选的关键组分可望为后续灭螺药物分离、纯化及药理研究奠定基础,筛选的关键靶点和关键通路可望为中药源灭螺药机制阐明和绿色灭螺新药开发提供帮助。 展开更多
关键词 湖北钉螺 福寿螺 灭螺药物 中药 网络药理学
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