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牙釉质基因巢式PCR鉴定猪ICSI胚胎性别 被引量:3
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作者 孙俊丽 廖海洪 +3 位作者 张冰 孙如玉 卢克焕 卢晟盛 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2018年第10期2202-2207,共6页
【目的】建立可准确鉴定猪胚胎性别、可靠的巢式PCR反应体系及研究卵胞浆内单精子显微注射技术(Intracytoplasmic sperm injection,ICSI)对胚胎性别的影响。【方法】根据猪X染色体和Y染色体上牙釉质基因(Amelogenin gene,AMEL)第三内含... 【目的】建立可准确鉴定猪胚胎性别、可靠的巢式PCR反应体系及研究卵胞浆内单精子显微注射技术(Intracytoplasmic sperm injection,ICSI)对胚胎性别的影响。【方法】根据猪X染色体和Y染色体上牙釉质基因(Amelogenin gene,AMEL)第三内含子上9~10 bp的缺失设计了巢式PCR引物,并利用10个猪耳组织基因组DNA样品优化了PCR扩增条件,巢式PCR—荧光标记的半自动基因组扫描技术鉴定205个猪ICSI早期囊胚性别。【结果】特异性扩增了199个ICSI样品,6个ICSI胚胎扩增失败。经PCR产物片段扫描,只在178~179 bp处有峰的,判定为雌性胚胎,在169~171和178~179 bp 2处有峰则判定为雄性胚胎。共确定雄性胚胎71个,雌性胚胎128个,其中公母比例1∶1.8。【结论】基于牙釉质基因的巢式PCR方法可用于猪胚胎性别鉴定。性别比例偏离在一定程度上说明在ICSI囊胚中存在部分孤雌胚胎。 展开更多
关键词 牙釉质基因 猪ICSI胚胎 巢式PCR 性别鉴定
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UV-B胁迫下Ca^(2+)对颠茄生理特性与次生代谢产物的调控研究 被引量:10
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作者 卢克欢 刘兴 +2 位作者 杨怡 廖志华 吴能表 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第10期1527-1538,共12页
有害中波紫外线(Ultraviolet B, UV-B; 280~320 nm)辐射影响植物的生长和发育, Ca^(2+)是植物生长发育所必须的大量元素之一,外源Ca^(2+)不但可以提高植物抗胁迫能力,还对次生代谢具有调控作用。以颠茄(AtropabelladonnaL.)实生苗为材料... 有害中波紫外线(Ultraviolet B, UV-B; 280~320 nm)辐射影响植物的生长和发育, Ca^(2+)是植物生长发育所必须的大量元素之一,外源Ca^(2+)不但可以提高植物抗胁迫能力,还对次生代谢具有调控作用。以颠茄(AtropabelladonnaL.)实生苗为材料,在UV-B辐射(10μW cm^(–2))背景下,研究不同浓度外源Ca^(2+)、不同处理时间对颠茄生理特性、氮代谢、次生代谢产物含量以及托品烷类生物碱代谢途径中3个关键酶基因表达量的影响。结果表明,随着UV-B辐射时间的延长(4~12 d),对颠茄的光合作用、氮代谢以及生物碱的积累产生抑制作用,加剧了膜脂氧化程度;经外源Ca^(2+)处理,叶片初始荧光(Fo)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量呈下降趋势,叶片最大光化学效率(F_v/F_m)、光合色素(总叶绿素、类胡萝卜素)含量、抗氧化酶(SOD、POD、CAT)活性均呈上升趋势,说明Ca^(2+)有利于缓解UV-B辐射的抑制,加强对UV-B胁迫的抗性;在Ca^(2+)处理下,叶片中硝态氮含量显著降低,游离氨基酸、可溶性蛋白含量和氮代谢关键酶(NR、GS、GDH)的活性显著提高,叶片中莨菪碱含量和东莨菪碱含量显著提高;qRT-PCR分析显示,在外源Ca^(2+)的诱导下,托品烷类生物碱合成途径中3个关键酶基因(PMT、TR I、H6H)表达量均有不同程度上调趋势。本研究结果可为田间种植提供理论参考。 展开更多
关键词 UV-B胁迫 颠茄 生理特性 氮代谢 托品烷类生物碱
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罗汉果甜苷V对持续光照小鼠脂肪积累的缓解作用 被引量:1
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作者 刘嘉昊 王金兴 +6 位作者 胡俊杰 冯明 蒋慧敏 李孟琪 卢克焕 杨小淦 梁兴伟 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第9期2624-2633,共10页
【目的】探究罗汉果甜苷V(MV)缓解持续光照导致小鼠脂肪积累的作用,为罗汉果在畜禽健康养殖中的应用提供参考依据。【方法】以15周龄雄性C57BL/6小鼠为研究对象,随机分为对照组(12 h光照∶12 h黑暗)、持续光照组(24 h光照)及持续光照添... 【目的】探究罗汉果甜苷V(MV)缓解持续光照导致小鼠脂肪积累的作用,为罗汉果在畜禽健康养殖中的应用提供参考依据。【方法】以15周龄雄性C57BL/6小鼠为研究对象,随机分为对照组(12 h光照∶12 h黑暗)、持续光照组(24 h光照)及持续光照添加MV处理组(每日灌胃100 mg/kg的MV),试验周期为5周。试验期间监测小鼠体质量和采食量,并检测其体脂率和能量代谢水平;试验结束后处死小鼠,采集腹股沟白色脂肪(iWAT)和附睾白色脂肪(e WAT)进行称重,通过苏木精—伊红(H-E)染色观察脂肪细胞形态学特征,并以实时荧光定量PCR检测脂肪组织中脂肪代谢及能量代谢相关基因的表达情况。【结果】在整个试验过程中,各处理组小鼠的体质量与采食量均无显著差异(P>0.05),但持续光照能导致小鼠体脂率极显著升高(P<0.01,下同),而氧气消耗量、二氧化碳排出量及产热量等基础代谢参数均极显著降低,iWAT和eWAT的百分比及细胞直径均极显著增大;iWAT和eWAT中的脂肪合成相关基因(Fabp4、Pparg2和Zfp423)相对表达量极显著上调,脂肪分解相关基因Lpl相对表达量极显著下调,能量代谢基因(Sirt1和Ppargc1a)相对表达量显著(P<0.05)或极显著下调,炎症反应相关基因Nfkb1相对表达量极显著上调。经MV处理后能使持续光照小鼠上述变化指标均恢复至正常水平,即MV能有效改善持续光照导致的小鼠能量代谢紊乱、缓解脂肪累积,以及缓解脂肪代谢、能量代谢及炎症反应相关基因的异常表达。【结论】持续光照会在不改变能量摄入的情况下导致机体脂肪积累,影响机体的正常代谢和健康。MV通过调控Sirt1、Ppargc1a等重要代谢相关基因表达,改善机体代谢紊乱,并通过促进脂肪分解和抑制脂肪合成相关基因表达,有效缓解持续光照导致的小鼠脂肪积累。 展开更多
关键词 罗汉果甜苷V(MV) 持续光照 小鼠 脂肪积累 代谢紊乱
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外源性5-氨基乙酰丙酸对盐胁迫下颠茄生理特性及次生代谢产物含量的影响 被引量:9
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作者 卢克欢 郭双 +2 位作者 韦悦 张翠平 吴能表 《西南大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2018年第9期13-20,共8页
通过对颠茄幼苗生理特性及生物碱含量的研究,寻找提高颠茄在盐胁迫条件下的抗性能力以及提高生物碱含量的途径.采用100 mmol/L NaCl溶液和不同质量浓度5-氨基乙酰丙酸(5-ALA)溶液处理颠茄幼苗,对颠茄叶片的叶绿素含量、叶绿素荧光参数... 通过对颠茄幼苗生理特性及生物碱含量的研究,寻找提高颠茄在盐胁迫条件下的抗性能力以及提高生物碱含量的途径.采用100 mmol/L NaCl溶液和不同质量浓度5-氨基乙酰丙酸(5-ALA)溶液处理颠茄幼苗,对颠茄叶片的叶绿素含量、叶绿素荧光参数、可溶性蛋白含量、可溶性糖含量、游离脯氨酸含量、丙二醛(MDA)含量、抗氧化酶(SOD,POD)活性及莨菪碱、东莨菪碱含量进行测定.结果表明:叶面喷施5-ALA可显著(p>0.05)提高抗氧化酶活性及叶绿素含量、渗透调剂物质含量,降低盐胁迫对细胞质膜过氧化程度和PSⅡ的损伤程度,同时可提高盐胁迫下颠茄中东莨菪碱的产量,但是对莨菪碱产量的作用不明显.外源5-ALA可有效缓解盐胁迫对颠茄生长的抑制,提高其抗盐能力. 展开更多
关键词 颠茄 盐胁迫 生理特性 次生代谢
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诱导子对颠茄毛状根生长及托品烷类生物碱质量分数的影响 被引量:6
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作者 刘佳 卢克欢 +3 位作者 郭双 张翠平 韦悦 吴能表 《西南大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期75-80,共6页
目的:研究不同浓度茉莉酸甲酯(MJ)、硝酸银(AgNO_3)、水杨酸(SA)、酵母提取物(YE)4种诱导子对颠茄毛状根生长及托品烷类生物碱合成的影响.方法:将0.5g新鲜颠茄毛状根接种于B5液体培养基中,黑暗培养12d后,将原有培养基换成加有不同浓度... 目的:研究不同浓度茉莉酸甲酯(MJ)、硝酸银(AgNO_3)、水杨酸(SA)、酵母提取物(YE)4种诱导子对颠茄毛状根生长及托品烷类生物碱合成的影响.方法:将0.5g新鲜颠茄毛状根接种于B5液体培养基中,黑暗培养12d后,将原有培养基换成加有不同浓度诱导子的4种新培养基,同样条件下再培养2d,收集颠茄毛状根材料,测定其鲜质量与干质量及托品烷类生物碱的含量.结果:MJ抑制了毛状根生长与托品烷类生物碱的积累,而AgNO_3虽然抑制了颠茄毛状根的生长,但却显著提高了托品烷类生物碱的积累,托品烷类生物碱的产量在100μmol/L AgNO_3处理下达到26.191mg,是对照的219.9%.在SA处理下,较小程度地抑制了毛状根的生长,对东莨菪碱的积累有促进作用.在YE处理下,随试验浓度升高,对毛状根生长及托品烷类生物碱的积累的促进作用也逐渐增强.结论:AgNO_3是提高毛状根中托品烷类生物碱的最佳诱导子,而YE是对颠茄毛状根生长的最佳诱导子. 展开更多
关键词 颠茄 诱导子 托品烷类生物碱 毛状根
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Variations of Reproductive Hormones of Female Swamp Buffalo from Guangxi Region in Off Season for Estrus
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作者 ZHU Xiao-li XU Hui-yan +3 位作者 LIU Xiao-hua TAN Shi-jian lu ke-huan SHI De-shun 《Animal Husbandry and Feed Science》 CAS 2012年第1期13-15,共3页
[Objective] The aim of this paper is to find the change law of reproductive hormones of female swamp buffalo in off season for estrus and to investigate the relationship between various hormones. [ Method] The concent... [Objective] The aim of this paper is to find the change law of reproductive hormones of female swamp buffalo in off season for estrus and to investigate the relationship between various hormones. [ Method] The concentrations of follicle stimulating hormone (FSH), luteinizing hor- mone ( LH), inhibin ( INH), estradiol ( E2 ) and progesterone ( P4 ) were determined by the enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) in off season for estrue. The changes of follicles in the estrous cycle were examined using B-mode ultrasonography. [ Result] In off season for estrus of female swamp buffalo from Guangxi region, the blood concentration of E2 and P4 varied fluctuantly. The concentration of E2 had two peaks, respec- tively 3 d before ovulation and after 13 d post ovulation. The concentration of P4 increased slowly from the first day after ovulation, increased rapidly from 5 to 13 d, peaked on Day 16 and decreased to the baseline 3 d before ovulation. The concentrations of FSH, LH and INH roached a peak re- spectively after 10 d post ovulation, 2 d before ovulation, and after 4 d post ovulation. The changes of the hormones had correlations. The concen- trations of FSH, LH and INH had highly significant correlations with each other, while the concentration of INH had highly significant correlations with that of E2 or P4- The concentration of E2 also had a highly significant correlation with that of P4- [ Conclusionl The study can guide the breeding of swamp buffalo from Guanqxi reqion and also help to improve their roproduction performance. 展开更多
关键词 Swamp buffalo Off season for est us Reproductive hormone Enzyme-linked immunosorbent assay
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