日本脑炎病毒感染睾丸间质细胞对干扰素调节因子3相关信号通路的影响

旨在探究日本脑炎病毒(JEV)感染睾丸间质细胞后通过激活视黄酸诱导基因Ⅰ型(RIG-Ⅰ)和Toll样受体3(TLR3)等模式识别受体后引发的先天免疫机制。建立JEV感染睾丸间质细胞模型,利用荧光定量PCR和Western blot技术检测不同感染时段细胞的RIG-Ⅰ、TLR3和干扰素调节因子3(IRF3)的转录和蛋白表达、IRF3的磷酸化以及干扰素β(IFN-β)的转录情况。结果显示:JEV感染后细胞中RIG-Ⅰ和IRF3的mRNA和蛋白表达水平均有显著升高(P<0.05),TLR3蛋白表达水平极显著上调(P<0.01),IRF3磷酸化水平极显著上调(P<0.001),IFN-β转录水平显著升高(P<0.05)。结果表明:JEV感染可激活睾丸间质细胞的RIG-Ⅰ和TLR3受体,进而激活IRF3磷酸化,启动IFN-β的分泌,启动机体的先天性免疫抗病毒免反应。

猪伪狂犬病诊断方法与疫苗研究进展

猪伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus, PRV)可引起妊娠母猪繁殖障碍和新生仔猪神经症状,可感染人类并引起脑炎,使感染者出现严重的神经症状,直接危害人类健康,因此对该病的研究具有重大意义。近年该病在世界范围内广泛分布,对世界养猪业造成了巨大的经济损失,受到国内外学者的高度关注,对该病的研究也日益深入,在诊断方法及防控机制等方面取得了重要进展。论文就近年来猪伪狂犬病诊断方法及疫苗的发展进行综述,以期为在猪伪狂犬病诊断方法和疫苗选择上提供参考。

JEV感染对小鼠睾丸间质细胞信号通路、炎症因子及睾酮分泌影响的研究

为探究日本乙型脑炎病毒(JEV)感染睾丸间质细胞(LC)后对其信号通路、炎症反应和睾酮分泌水平的影响,本研究以MOI 1的JEV感染小鼠LC(TM3细胞)后不同时间采用荧光定量PCR(qPCR)检测TM3细胞中Toll样受体3(TLR3)、维甲酸诱导基因-Ⅰ(RIG-I)、NF-κB及干扰素调节因子3(IRF3)信号通路相关蛋白基因mRNA的转录水平并确定JEV的最佳感染时间。结果显示,与空白对照组相比,JEV感染后12 h各蛋白基因mRNA的转录水平均显著升高(P<0.05),随着JEV感染时间的延长各蛋白基因mRNA转录水平逐渐降低至与空白对照组无显著差异,因此选择12 h作为后续JEV感染细胞的最佳时间。将JEV感染TM3细胞12 h后,采用western blot检测TM3细胞中TLR3、RIG-I、其下游信号通路相关蛋白NF-κB、IRF3及NF-κB和IRF3的磷酸化水平;采用间接免疫荧光试验(IFA)检测TM3细胞中NF-κB和IRF3蛋白的入核;通过间接ELISA检测TM3细胞中睾酮的分泌水平。Western blot结果显示,JEV感染TM3细胞后12 h TLR3、RIG-I、NF-κB、IRF3蛋白的表达及NF-κB、IRF3的磷酸化水平均显著升高(P<0.05)。IFA结果显示,空白对照组细胞核形态完整,绿色荧光均弥散分布于细胞和细胞质之中,而JEV感染后12 h出现CPE的TM3细胞核溶解和破碎,有些细胞核变形,绿色荧光出现在细胞核中,且荧光信号明显增强。ELISA结果显示,JEV感染后12 h TM3细胞上清中IL-6、IFN-β分泌水平极显著升高(P<0.01),睾酮分泌水平显著下降(P<0.05)。利用TLR3和RIG-I siRNA转染TM3细胞,以干扰TLR3和RIG-I的表达,采用western blot检测这两个siRNA分别对TLR3和RIG-I的干扰效果;干扰TLR3和RIG-I表达后以MOI 1的JEV感染TM3细胞,12 h后经ELISA检测细胞上清中IL-6、IFN-β和睾酮的分泌水平。SiRNA干扰试验结果显示,与空白对照细胞及转染siNC的细胞相比,目的基因siRNA转染的TM3细胞中TLR3和RIG-I蛋白的表达水平均极显著降低(P<0.01);ELISA结果显示,与JEV感染的细胞相比,siRNA+JEV组细胞中IL-6和IFN-β的含量显著或者极显著降低(IL-6:P<0.05;IFN-β:P<0.01),睾酮分泌水平显著升高(P<0.05)。上述结果表明JEV感染TM3细胞后能够通过刺激TLR3、RIG-I的表达,激活NF-κB和IRF3信号通路,诱导NF-κB和IRF3的磷酸化并入核,刺激细胞炎症因子和干扰素的分泌并降低睾酮的分泌水平。本研究为深入探究JEV感染LC后引起雄性动物生殖障碍的机制奠定了基础。

PRRSV受体蛋白CD163及其表达影响因素的研究进展

猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的一种以母猪出现繁殖障碍及仔猪出现严重呼吸道症状的急性传染病,给养殖业带来了严重的经济损失。众多科研人员通过对PRRSV受体的研究逐步了解到该病毒的受体种类和作用机制,在受体蛋白CD169、硫酸乙酰肝素、波形蛋白、DC-SIGN(CD209)、CD151、CD163和NMHC II-A(或MYH9)中,PRRSV主要是通过CD163受体入侵感染,而这过程中又有很多因素增强或减弱CD163的表达,从而增强或抑制PRRSV的感染。本文通过对PPPSV受体蛋白CD163的功能、CD163结构域与PRRSV感染之间的关系进行总结,进一步了解PRRSV的作用机制,以及通过对影响CD163表达因素的研究进行综述,以期为PRRSV受体蛋白CD163的后续研究提供一些思路及参考。

猪繁殖与呼吸综合征病毒结构蛋白和非结构蛋白研究进展

猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)主要引起以母猪流产、产死胎、弱胎、木乃伊胎以及仔猪呼吸困难、败血症为特征的猪繁殖与呼吸综合征(PRRS),该病传播快、传染性强,是规模化养猪场常见的接触性传染病之一。PRRSV基因组编码GP2a、E、GP3、GP4、GP5、GP5a、M、N等8种结构蛋白和NSP1α、NSP1β、NSP2-NSP8、NSP9-NSP12等至少13种非结构蛋白。论文从三个角度对PRRSV结构蛋白和非结构蛋白进行综述,包括PRRSV感染宿主后结构蛋白和非结构蛋白发挥的作用、它们对宿主信号通路的影响和基于两类蛋白的检测方法,以期为进一步研究PRRSV的致病机制以及防治猪繁殖与呼吸综合征病毒病奠定理论基础。

电子转移途径中芳香族氨基酸的引入提高了细胞色素P450s的催化性能

细胞色素P450s是用于生物合成的多功能催化剂.在P450催化循环中,需要两个电子来还原血红素铁,并通过电子转移途径(eTPs)激活随后的还原,该步骤是反应的限速步骤.本文重新设计了巨大芽孢杆菌P450 BM3的e TPs,大幅提高了其催化性能.通过在P450 BM3的e TP中引入芳香族氨基酸,“最佳”变体P2H02(A399Y/Q403F)的催化效率比P450 BM3野生型催化效率提高了12.9倍(kcat/KM从65.8 L mol^(-1)s^(-1)提高到913.5 L mol^(-1)s^(-1)).分子动力学模拟和电子传递分析表明,在辅因子FMN和血红素之间引入的芳香族氨基酸可以显著提高电子转移速率和酶催化性能.同时,在电子传递途径中引入酪氨酸可以保护P450的催化中心,使其避免被氧化性中间产物所破坏,从而提高其催化效率.此外,引入芳香族氨基酸的策略被证明对其他P450(如CYP116B3)同样有效,改造后的酶表现出显著提高的催化效率.综上,本文策略有望拓展到其他带有长程电子传递链的氧化还原酶上,成为改造的通用策略.

中风醒脑液治疗出血性脑卒中的回顾性分析

目的观察中风醒脑液对出血性脑卒中患者预后的影响。方法回顾性分析成都中医药大学附属医院2008年10月至2017年10月的247例(最终纳入192例)出血性脑卒中患者,以服用中风醒脑液>14 d为暴露因素,分为中药组和对照组。收集患者的一般资料、既往史、病程、入院时血压、出血部位、血肿体积、美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分、GCS评分、合并症等影响患者死亡率的相关因素,记录其生存时间,采用Kaplan-Meier法构建生存曲线,比较两组累积病死率的差异;利用COX回归控制混杂偏倚,分析中风醒脑液对出血性脑卒中患者预后的影响。结果1)生存曲线显示,中药组第15个月、第77个月累积病死率分别为8.5%(12/141)、31.9%(45/141),对照组第15个月、第77个月累积病死率为31.4%(16/51)、70.6%(36/51),Log-rank检验结果发现,两组累积病死率差异有统计学意义(χ^(2)=26.047,P<0.001)。2)调整了年龄、入院时血压、出血部位、血肿体积、合并症、NIHSS评分、格拉斯哥昏迷量表(GCS)评分后,中风醒脑液对两组生存时间影响的差异具有统计学意义(HR=0.392,P<0.001),中药组死亡风险是对照组的0.392倍(95%CI 0.243-0.630)。结论中风醒脑液能有效降低患者累积病死率,延长生存时间。

高速公路服务区特色化发展规划研究——以云南瑞孟高速公路服务区为例

服务区是为高速公路配套建设的服务设施,国外服务区的发展历程较长,其主要特点是建设规模和标准较为自由,与周边的自然环境协调,与临近的城镇关系密切,具有明显的个性和特点。随着我国高速公路的迅速发展,与之配套的高速沿线服务区也大量出现。我国对服务区的用地规模、建设标准、建设内容等要求较为刚性,再加上服务区作为高速公路的沿线配套服务设施,一直处于被忽视的状态,所以在高速公路快速发展的前中期,全国各地的服务区呈现标准化、格式化的设计方式,造成服务区布局千篇一律、建筑毫无特色、功能服务单一。

农产品现代物流园规划设计研究——以鄂州市梁子湖农产品物流园规划为例

随着国家物流体系的不断完善,各大小城市都建设了各种不同类型的物流园区,同时也出现了部分或功能闲置或难以为继的物流园,部分农产品物流园也位列其中。一方面是高质量农产品销售无门或是价格低廉,另一方面却是客户买不到质优价廉的农产品。现在的物流园一般只具备了冷链物流的单一功能,如果能够依托物流园,将农产品的生产、加工、储存、物流同展示推广结合起来,将大力助推区域农产品产业的发展和乡村的产业振兴。

使用土工格栅和土工织物层提高路基强度

粘土是一种细粒土,在相对含水量下具有可塑性。在实际工程中,粘土会随着含水率的变化呈现出膨胀或收缩的特征,粘土的CBR值较低。非织造土工织物和土工格栅层是较常用的土工合成材料,本研究中通过引入土工合成材料来实现路基的稳定。本文评价了粘土试件的抗剪强度、CBR值等工程特性和粒度分布等指标特性。实验结果表明,样品的CBR试验值为3.54%且当土工格栅放置在顶部和中部时,CBR值分别提高了4%和5.56%,当土工格栅与土工织物作为组合层放置在一起,能进一步提高土工格栅的性能,顶部和中部组合层CBR试验结果分别为6.31%和6.9%。

后张法预应力混凝土桥梁摩阻损失计算研究

针对于预应力混凝土桥梁的摩阻损失计算问题,本文基于库伦摩擦定律和赫兹接触理论提出了非均匀接触压力下的摩阻损失计算方法,然后分析了不同张拉力、弯曲角度和摩擦系数下的本文推荐公式和规范计算公式的差距,最后通过两个实际案例验证了本文推荐公式的可靠性。研究结果表明:本文推荐的方法与实测值更为接近,传统规范中的最大误差为31%,而本文推荐公式的最大误差为15%。

基于柔性多状态开关的有源配电网双层优化方法

大量间歇性分布式电源的接入,给配电网带来了新的挑战。柔性多状态开关(Soft Open Point, SOP)是一种新型的电力电子装置,具有强大的功率调控和潮流优化能力。文中提出了一种基于SOP的有源配电网双层优化方法。考虑SOP运行控制的约束条件,建立了多端口SOP等效模型。以年综合费用最小为目标建立SOP上层规划模型,以多时段配电网电压偏差最小、网损最低为目标建立基于最优潮流的下层优化模型,并采用改进的遗传粒子群混合优化算法对双层优化模型进行求解。在IEEE 33节点算例上,对比分析了规划前后三端口SOP的优化能力。结果表明,SOP能有效解决配电网电压越限问题,同时降低系统损耗,并且合理的SOP规划对配电网运行优化效果更为显著。

ABO模式片区综合开发项目探析——以湔江美谷项目为例

片区综合开发是对某一区域进行整体改造、建设、运营为一体的综合开发行为,涉及土地一二级开发、基础配套建设、公共设施建设等内容。根据实施主体不同,可分为政府直接投资、政企合作开发、市场化投资。一、城市开发特点随着城乡建设进程加快和地方财政收紧及地方发展需求提升,目前城市开发呈现以下特点。

原发性心内膜弹力纤维增生症病儿65例临床分析

目的探讨儿童心内膜弹力纤维增生症(EFE)的临床特点及预后。方法选取2006年1月—2016年12月广西医科大学第一附属医院确诊的EFE病儿65例,分析其临床特点并密切随访其预后。结果病儿多因呼吸道感染、心功能不全就诊;心电图以左心室增大、左心室高电压、ST-T段改变为主;胸片示心胸比(C/T)增大;心脏彩超检查示左心室射血分数(LVEF)、左心室短轴缩短率(LVFS)、每搏指数(SI)及心脏指数(CI)下降,左心室舒张末期内径(LVDD)增大,左心室心内膜增厚。接受洋地黄、肾上腺皮质激素、扩血管药物等1～3年治疗后,病儿LVEF、LVFS、SI及CI增大,LVDD缩小,左心室心内膜厚度减小,差异有显著性(P<0.05)。65例病儿中52例(80.0%)临床好转,7例(10.7%)病情反复发作,6例(9.2%)死亡,均为诊断后6个月内死亡;生存曲线示EFE病儿1、5年生存率均为88.8%。结论 EFE常见于婴幼儿期病儿,以心内膜增厚、心脏增大为主要特点,易出现呼吸道感染和心力衰竭,起病后前6个月内死亡率高;采用洋地黄、肾上腺皮质激素、扩血管药物等综合治疗可取得良好疗效。

某低品位铜铅锌多金属硫化矿选矿工艺研究

某低品位铜铅锌多金属硫化矿的原矿品位分别为Cu 0.47%、Pb 1.236%和Zn 0.891%。矿石中铜铅锌有用矿物的嵌布粒度较细且共生关系较复杂。试验着重探讨了磨矿细度、浮选捕收剂和调整剂的优化,在解决矿物有效解离的前提下,提高铜铅锌浮选分离的选择性。当原矿磨矿细度为-0.074mm占80%时,采用乙硫氮作捕收剂,石灰、硫酸锌和亚硫酸钠作调整剂,粗选获得的铜铅混合粗精矿再磨至-0.043mm占81.31%后,经两次精选获得铜铅混合精矿。铜铅混合精矿采用活性炭脱药,亚硫酸钠和CMC组合抑铅,Z200浮选铜,实现了铜铅分离。铜铅混合浮选尾矿,采用硫酸铜活化,丁基黄药作捕收剂,浮选获得锌精矿。最终浮选指标为:铜精矿的铜品位27.26%,铜回收率80.62%;铅精矿的铅品位59.35%,铅回收率85.20%;锌精矿的锌品位41.14%,锌回收率为82.74%。为该低品位铜铅锌多金属硫化矿资源的开发利用提供了可行的技术方案。

中西医结合方案对慢性阻塞性肺疾病D组稳定期的临床疗效研究

目的评价中西医结合方案治疗慢性阻塞性肺疾病(COPD)D组稳定期患者的临床疗效。方法选择2016年12月至2018年12月在成都中医药大学附属医院咳喘专病门诊或急诊科门诊就诊的180例阳虚血瘀、痰浊蕴肺型COPD D组稳定期患者作为研究对象。按照随机数字表法以1:1比例分为常规西医治疗组和中西医结合治疗组,每组各90例。常规西医治疗组给予西医内科治疗;中西医结合治疗组在西医内科治疗基础上给予三拗汤合瓜萎薤白半夏汤合桔梗汤加味白附片、生晒参、丹参。两组均连续治疗6个月。比较两组患者治疗前后中医证候量化积分、肺功能指标[用力肺活量占预计值的百分比(FVC%)、第1秒用力呼气容积占预计值的百分比(FEV1%)]以及圣·乔治呼吸问卷(SCRQ)评分。结果①中医证候量化积分:治疗前,两组间各维度中医证候量化积分以及总积分比较差异均无统计学意义。治疗6个月后,中西医结合治疗组喘息、咳嗽、咳痰、畏寒肢冷、舌象症状积分以及中医证候量化总积分均较治疗前明显降低,且明显低于同期常规西医治疗组[喘息症状积分(分):5.56±2.12比6.93±1.54,咳嗽症状积分(分):6.00±1.43比6.84±1.33,咳痰症状积分(分):4.87±2.34比6.01±1.86,畏寒肢冷症状积分(分):5.53±1.59比8.25±1.38,舌象积分(分):4.58±1.78比7.23±1.58,中医证候量化总积分(分):41.69±3.56比50.66±4.45.均P<0.05]。②肺功能指标:治疗前、两组间FVC%和FEV1%比较差异均无统计学意义。治疗6个月后,两组FVC%均较治疗前明显降低,FEV1%均较治疗前明显升高,且中西医结合治疗组FEV1%明显高于常规西医治疗组(%:55.66±7.12比51.23±9.61.P<0.05)。③SCRQ评分:治疗前、两组间SCRQ评分比较差异无统计学意义。治疗6个月后,两组SCRQ评分均较治疗前明显降低,且中西医结合治疗组SCRQ评分明显低于常规西医治疗组(分:42.64±4.98比52.67±5.25.P<0.05)。结论该中西医结合治疗方案能够改善COPD D组稳定期患者的临床症状,肺功能和生活质量。

混合捕收剂浮选锂辉石的应用及作用机理

通过浮选试验,研究十二烷基磺酸钠、十二烷基硫酸钠、油酸、731、环烷酸皂,以及油酸与十二胺的混合捕收剂对锂辉石、长石和石英单矿物浮选行为及锂辉石实际矿石浮选指标的影响。借助Zeta电位、红外光谱分析、吸附量测试及量子化学计算,探讨混合捕收剂的作用机理。结果表明:油酸与十二胺的混合捕收剂,兼有捕收性和选择性好的特点,在碱性条件下能实现锂辉石与长石和石英的浮选分离。混合捕收剂在锂辉石表面的吸附量大于长石和石英。混合捕收剂中油酸在矿物表面以化学吸附为主,十二胺则以物理吸附为主。油酸离子分别与十二胺离子(或分子)和油酸分子以缔合形态存在,油酸的头基COO^-与锂辉石表面的Al原子发生化学作用。

母亲还原叶酸载体基因多态性与子代先天性心脏病关联的病例对照研究

目的探讨母亲还原叶酸载体(reduced folate carrier,RFC)基因多态性与子代先天性心脏病(congenital heart disease,CHD)的关系。方法采用基于医院的病例对照研究,以2017年11月至2020年3月于湖南省儿童医院心胸外科就诊的683例CHD婴儿的母亲为病例组,以同期在该院就诊并排除任何畸形的740例婴儿的母亲为对照组。使用调查问卷收集研究对象的暴露资料,并采集产妇5 mL静脉血用于基因多态性检测。采用多因素logistic回归分析RFC基因多态性及其单倍型与CHD的关联,并采用广义多因子降维法分析基因-基因间交互作用。结果多因素logistic回归显示,在控制混杂因素后,母亲RFC基因2个位点rs2236484 (AG vs AA:OR=1.91,95%CI:1.45~2.51;GG vs AA:OR=1.96,95%CI:1.40~2.75)和rs2330183 (CT vs CC:OR=1.39,95%CI:1.06~1.83)的多态性与子代CHD风险存在关联。母亲携带单倍型G-G (OR=1.21,95%CI:1.03~1.41)和T-G (OR=1.25,95%CI:1.07~1.46)显著增加子代CHD的风险。交互作用分析显示,RFC基因各位点在CHD发生中存在交互作用(P<0.05)。结论母亲RFC基因多态性及各位点间的交互作用与子代CHD的发生相关。[中国当代儿科杂志,2021,23 (6):547-554]

母亲糖尿病及UCP2基因多态性与子代先天性心脏病关联的病例对照研究

目的探讨母亲糖尿病、解偶联蛋白2基因(UCP2)多态性及两者的交互作用与子代先天性心脏病(CHD)的关系。方法采用以医院为基础的病例对照研究,选择2018年3月至2019年8月在湖南省儿童医院确诊的464例单纯CHD患儿的母亲为病例组,选择同期住院、无先天畸形的504例患儿的母亲为对照组。通过问卷调查,收集相关暴露信息,同时采集母亲静脉血5 mL,用于UCP2基因多态性检测。采用多因素logistic回归分析探讨母亲糖尿病、UCP2基因多态性及两者交互作用与子代CHD的关联性。结果多因素logistic回归分析显示,在控制混杂因素后,患有妊娠期糖尿病(OR=2.96,95%CI:1.57~5.59)、有妊娠期糖尿病史(OR=3.16,95%CI:1.59~6.28)和妊娠前患有糖尿病(OR=4.52,95%CI:2.41~8.50)均显著增加子代CHD的风险(P<0.05)。母亲UCP2基因两个位点rs659366(T/C vs C/C:OR=1.49,95%CI:1.02~2.16;T/T vs C/C:OR=2.77,95%CI:1.67~4.62)和rs660339(A/A vs G/G:OR=2.19,95%CI:1.34~3.58)的多态性与子代CHD的风险存在关联(P<0.05)。交互作用分析显示,UCP2基因两个位点(rs659366和rs660339)的多态性与母亲糖尿病在子代CHD发生中存在交互作用(P<0.05)。结论母亲糖尿病、UCP2基因多态性及其交互作用与子代CHD发病相关。

粉煤灰碱熔融-水热法合成A型沸石及吸附性能研究

为利用粉煤灰中的铝、硅资源制备高性能吸附材料,本研究以贵州某地粉煤灰为原料,采用“碱熔融-水热合成法”合成A型沸石,并考察了合成沸石对溶液中Cu2+的吸附性能。研究运用单因素法考察不同碱灰比、焙烧时间、晶化温度及晶化时间对沸石合成效果的影响,采用扫描电镜(SEM)、X射线衍射仪(XRD)对合成沸石表面形貌和晶体特征进行表征。在此基础上,考察了粉煤灰合成沸石对模拟料液中Cu2+的吸附效果。结果表明:当粉煤灰原灰中铝硅比约为1∶1,在碱灰比为1.3∶1、焙烧温度650℃、焙烧时间60min、晶化温度100℃、晶化时间8h条件下,合成了晶型较为理想的A型沸石产品,合成沸石对Cu2+吸附效果较好,对溶液中Cu2+的去除率大于95%。