离子色谱在中草药成分分析中的应用

离子色谱是用于分离分析不同基质样品中离子性物质的一种新型高效液相色谱技术。自1975年发展至今,已被广泛应用于环境、能源、食品、医药等多个领域,具有操作简单、分析快速、灵敏度和选择性高,且能同时分离测定多种组分等优点。近年来,随着离子色谱技术自身迭代发展,可测定分析的样品种类已包括离子、糖类、氨基酸、有机酸(碱)等,同时离子色谱法也越来越成为针对中草药复杂组分中单个有效成分分析与鉴定的重要手段。本文介绍了离子色谱技术的不同类型、原理及研究进展,整理了近几十年离子色谱在中草药糖苷类、氨基酸、蛋白质、无机盐以及有机酸、生物碱类和黄酮类等复杂成分中的应用情况;检索文献发现,离子交换色谱、电导检测法为离子色谱中最常用的技术类型和检测方式,且目前离子色谱在生物碱类成分分析中的应用展现出较传统分析方法更好的优势,但在无机阴离子的形态分析和黄酮类、苯丙素类、甾体类等主要活性物质中的直接应用研究报道较少。最后,综述了离子色谱(联用)新技术及其在中草药中的最新进展,并对该色谱方法未来在复杂组分分离分析方面的应用进行了探讨和展望,为离子色谱技术分析中草药复杂化学成分的进一步发展提供理论参考。

传统特色藏药藏荆芥(萨都那保)的研究进展

藏荆芥作为民族特色明显、应用历史悠久的西藏地区独有药材,含萜类、酯类、酮类等多种成分,传统应用于癫痫抽搐、神昏惊厥等症,现代研究表明其具有抗炎、镇痛、心脑血管保护、肾保护等广泛药理活性,开发潜力显著。然而,目前藏荆芥的研究开发受限于地理位置、药材资源等多种因素。本文查阅、分析并归纳藏荆芥相关文献和专著,对藏荆芥的药材资源、化学成分、药理活性及质量控制等相关研究进行总结和综述,并对后续研究方向进行展望,旨在为藏荆芥的进一步研究开发提供参考,积极促进民族医药发展。

甘青青兰根际土壤理化性质及微生物群落结构特征分析

为研究甘青青兰根际土壤理化性质与根际土壤细菌和真菌群落结构组成特征,以西藏自治区工布江达县(GB)、卡诺区(KR)和洛隆县(LL)的甘青青兰根际土壤微生物为研究对象,采用IlluminaMiSeq高通量测序技术对根际土壤细菌和真菌群落结构组成进行分析,同时测定根际土壤的理化性质,并与根际土壤核心微生物菌群进行相关性分析。结果表明,不同地区甘青青兰根际土壤理化性质差异显著。甘青青兰根际土壤共获得3900个细菌OTUs和1990个真菌OTUs,不同地区间土壤微生物多样性存在明显差异。在门水平,GB、KR和LL样品的优势细菌门均为放线菌门(Actinobacteria),GB样品的优势真菌门是担子菌门(Basidiomycota),KR和LL样品的优势真菌门是子囊菌门(Ascomycota);在属水平,不同地区甘青青兰根际土壤优势微生物菌群存在明显差异。主成分分析显示,不同地区甘青青兰根际土壤细菌和真菌群落结构组成差异较大。核心微生物菌群分析表明,甘青青兰根际土壤核心细菌菌群有257个属;核心真菌菌群有102个属。相关性分析表明,核心微生物菌群的改变与根际土壤理化因子间存在不同程度的相关性,且土壤全钾、全磷、全氮、速效钾和速效氮含量是影响甘青青兰根际土壤微生物群落结构组成的重要因子。综上所述,不同地区甘青青兰根际土壤微生物群落结构组成存在显著差异,且根际土壤微生物群落结构的变化与土壤理化因子密切相关,为甘青青兰人工种植及筛选有益微生物菌群提供了理论依据。

Resource Characteristics and Sustainable Utilization Countermeasures of Polygonatum cirrhifolium , a Rare and Endangered Tibetan Medicinal Plant of Tibet Plateau

Polygonatum cirrhifolium is a rare and endangered Tibetan medicinal plant. In this paper,resource status of P. cirrhifolium from 13 counties of Tibet Plateau was investigated by combining field investigation with laboratory analysis,and sustainable utilization countermeasures were analyzed. Results showed that( 1) distribution area sequence of P. cirrhifolium in each county was Gongbo'gvamda County > Chayu County > Lang County > Milin County > Maizhokunggar County > Zuogong County > Mangkang County > Jiali County > Dingqing County > Duilongdeqing County > Baqing County = Suo County = Nimu County. Its total distribution area was 458 723. 81 hm2,and it was not distributed in Baqing County,Nimu County and Suo County.( 2) Average dry weight per plant of P. cirrhifolium medicinal part in each county had the bellow sequence: Duilongdeqing County > Gongbo'gvamda County > Maizhokunggar County > Zuogong County > Dingqing County > Lang County > Mangkang County > Milin County > Jiali County > Chayu County > Baqing County = Nimu County = Suo County,and it reached 46. 48 g/plant in Duilongdeqing County.(3) Biomass of P. cirrhifolium medicinal part in each county had the bellow sequence: Duilongdeqing County > Gongbo'gvamda County > Maizhokunggar County > Lang County > Dingqing County > Zuogong County > Jiali County > Mangkang County > Milin County >Chayu County > Nimu County = Suo County = Baqing County,and it reached 300. 52 kg/hm2 in Duilongdeqing County.(4) Reserve amount sequence of P. cirrhifolium in each county was Gongbo'gvamda County > Lang County > Maizhokunggar County > Chayu County > Zuogong County > Dingqing County > Milin County > Jiali County > Mangkang County > Duilongdeqing County > Baqing County = Nimu County = Suo County,and total reserve amount was 42 293. 96 t.(5) At medicinal function aspect,P. cirrhifolium is sweet,and has the effects of keeping fit,nourishing vitality,regenerating teeth and delaying senility.(6) For resource status of P. cirrhifolium,it is suggested establishing resource protection region and constructing germplasm resource bank; establishing plantation park and perfecting cultivation and planting techniques; deeply processing and extending industry chain of Tibetan medicine; updating concept and rationally developing and using.

甘青青兰再生体系的建立

甘青青兰是传统的藏药材,具有止咳化痰,和胃疏肝,清热利水等重要的药用价值。由于野生资源被大量挖掘破坏,目前甘青青兰野生遗传多样性受到严重威胁。其再生体系的建立对于甘青青兰野生资源保护和可持续利用具有重要意义。获得无菌苗是建立植物再生体系的基础,本研究首先以75%乙醇和不同浓度的次氯酸钠作为消毒剂依次对种子进行消毒处理,后置于MS固体培养基上萌发;研究结果表明,75%乙醇处理1 min后,用5%次氯酸钠处理10 min对种子的消毒及萌发综合效果最佳,萌发率达68%。甘青青兰种子萌发15 d后,子叶完全展开;取子叶作为外植体,通过调整激素配比,探究了甘青青兰植株再生的最佳体系。研究结果表明:甘青青兰愈伤诱导最佳培养基为MS+2 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA;不定芽诱导最佳培养基为MS+2 mg/L 6-BA+1 mg/L IAA+2 mg/L ZT。本研究建立的植株再生体系为后续进行甘青青兰野生资源保护和遗传育种提供了理论基础。

喜马拉雅紫茉莉MYB家族的生物信息学及表达分析

旨在筛选高山植物喜马拉雅紫茉莉调控类黄酮等次生代谢产物合成的MYB转录因子(MhMYB)基因家族。基于喜马拉雅紫茉莉愈伤组织低温转录组测序数据库,利用PlantTFDB 3.0和BLASTP等软件对MhMYB序列进行筛选与鉴定,使用Web Logo 3.0、MEGA 7.0和Mev等生物信息学软件对MhMYB转录因子进行结构域、系统进化及低温诱导表达水平分析。研究筛选出34个喜马拉雅紫茉莉MhMYB家族成员,分别为1R-MYB(2个)、R2R3-MYB(30个)和3R-MYB(2个)3类转录因子;亚细胞定位预测大多数定位于细胞核中;进化分析显示,MhMYB家族成员可分为15个亚类,基于拟南芥AtMYB家族成员的生物学功能,预测MhMYB的S2、S7、S20亚家族成员可能参与调控类黄酮等次生代谢产物合成;转录组数据分析显示,低温可诱导MhMYB6、MhMYB15、MhMYB62基因表达水平增加;共表达分析发现,MhMYB6、MhMYB15、MhMYB62对类黄酮合成途径基因起到一定调控作用。初步研究表明,MhMYB6、MhMYB15、MhMYB62可参与调控低温诱导喜马拉雅紫茉莉类黄酮的累积。

西藏红景天属一新变种——嘉黎红景天

全国第四次中药资源普查于西藏自治区嘉黎县、芒康县调查中,在海拔4000~5000 m灌木丛的石灰岩上发现了一种红景天属植物,该种在形态上与矮生红景天[Rhodiola humilis(HK.f.et Thoms.)S.H.Fu]较近,但花序顶端伞房状、花茎约7~13枝,基生叶先端锐尖,萼片长三角形,叶片和萼片先端具深粉红色浅囊等独有的特征,与后者不同。分子生物学证据表明,与矮生红景天(R.humilis)和异鳞红景天[Rhodiola smithii(Hamet)S.H.Fu]近缘。基于形态学与分子生物学证据,特将它描述为矮生红景天(R.humilis)新变种,命名为嘉黎红景天[Rhodiola humilis(HK.f.et Thoms.)S.H.Fu var.jialiensis H.Wang,X.Z.Lan&H.P.Deng]。

西藏大花黄牡丹籽油的提取及品质评价

采用超声波辅助正己烷提取法对西藏大花黄牡丹籽油脂进行提取工艺正交设计优化,对其主要理化指标进行测定,采用气相色谱-质谱联用仪对其脂肪酸组成进行分析.结果表明,西藏大花黄牡丹籽去壳样品含油量为(39.51±1.04)%,带壳样品含油量为(28.26±1.22)%;油脂提取最优工艺为处理温度60℃、超声提取时间50 min、超声功率160W、样品粒度100目、液料比12 mL/g,在此条件下,油脂提取率为(38.24±0.63)%.大花黄牡丹籽油的碘价(153.234±2.963)gI/100 g,酸价(1.521±0.062)mgKOH/g,皂化价(186.398±3.531)mgKOH/g,过氧化值(1.406±0.069)mmol/kg,折光指数(1.470±0.013)nD 20℃,处于LS/T 3242-2014优质水平.籽油中VE以γ-生育酚为主,总含量550.27 mg/kg,β-谷甾醇4.94μg/mL,岩藻甾醇4.33μg/mL,角鲨烯153.67 g/mL.共检测出20种脂肪酸组分,主要为油酸、亚麻酸、亚油酸、棕榈酸,其中大花黄牡丹籽油中含不饱和脂肪酸6种,占其脂肪酸总量的87.44%,其中含3种单不饱和脂肪酸,占41.40%,多不和脂肪酸为3种,占46.04%,亚麻酸占总脂肪酸的29.90%;饱和脂肪酸占其总量的12.56%.

大花红景天CBF家族生物信息学分析

CBF(CRT/DRE-binding factor)是低温响应转录因子,可增强抗寒基因的表达,从而提高植物抗寒性。为探究大花红景天CBF家族转录因子的结构与功能,本研究利用生物信息学手段从转录组数据库中筛选出7条RcCBF基因,并系统地分析了该基因家族各蛋白的理化性质、导肽、信号肽、亚细胞定位、跨膜结构、磷酸化与糖基化、系统进化、多重比对等。分析发现7个RcCBF为亲水的酸性蛋白,无跨膜结构,定位于细胞核或细胞质,包含2个CBF家族基因保守元件。该研究可为今后进一步解析RcCBF基因功能提供参考。

喜马拉雅紫茉莉再生体系的建立

喜马拉雅紫茉莉是传统藏药材,具有补益脾肾、温阳利水的功效,广泛用于治疗肾炎水肿和淋病等,其再生体系的建立对于喜马拉雅紫茉莉的野生资源保护和遗传育种具有重要意义。本研究首先以75%乙醇和5%次氯酸钠对种子进行脱毒处理,然后置于MS固体培养基上萌发;10 d后取无菌苗的子叶作为外植体,以6-BA和NAA为诱导激素,采用正交试验对喜马拉雅紫茉莉再生体系进行探索。研究结果表明:不定芽诱导激素为2 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA;生根诱导激素为0.5 mg/L NAA。本研究建立的喜马拉雅紫茉莉种子脱毒及植株再生体系为后续开展喜马拉雅紫茉莉的野生资源保护和遗传育种奠定了一定基础。

光核桃仁的脉冲真空脱苦工艺

为了高效快速脱除光核桃仁中的苦味。本文以0.25%氯化钠+柠檬酸+亚硫酸钠(1:1:0.4)为脱苦溶剂,在料液比1:5、真空度65kPa、保持微沸腾状态下进行脉冲真空处理4次,更换脱苦溶剂,再重复脉冲真空处理4次。以清水洗去脱苦溶剂,烘干后获得脱苦光核桃仁。该方法可以去除野桃仁中95.77±0.116%的苦杏仁苷,并明显缩短了脱苦时间。该工艺高效快捷,明显缩短脱苦时间。

铃铛子AlPMT基因的克隆及表达分析

本研究意在为进一步研究铃铛子中AlPMT基因的生物学功能奠定基础。选用茄科已发表的PMT基因序列进行多重序列比对,并以此结果进行简并引物设计,经PCR扩增及测序后得到铃铛子中AlPMT基因的全长核苷酸序列。AlPMT基因全长为1296 bp,共编码有339个氨基酸,预测AlPMT蛋白分子量为37.2 kD,等电点为5.73。系统进化分析显示AlPMT蛋白与颠茄、三分三的PMT蛋白有较高的亲缘关系。转录模式分析表明AlPMT基因在铃铛子的根、茎、叶中均有表达,但是在根中表达量较高,同时证明该研究克隆的AlPMT基因与铃铛子中托品烷类生物碱的合成密切相关。

川西合耳菊中1个新的艾里莫芬烷倍半萜

目的研究川西合耳菊Synotis solidaginea的化学成分。方法采用硅胶、聚酰胺、反相C_(18)柱色谱及制备高效液相色谱等技术进行分离纯化;根据波谱数据和文献对比进行化合物结构鉴定。结果从川西合耳菊的醋酸乙酯萃取部位共分离得到18个化合物,分别鉴定为(2R,4S,5R,8R,10S)-2-angeloyloxy-8,10-dihydroxy-eremophil-7(11)-en-8,12-olide(1)、(1R,4S,5S,6S,8R,10S)-1,10-epoxy-6,8-dihydroxy-eremophil-7(11)-en-8,12-olide(2)、(4S,5R,8S,10S)-8,10-dihydroxy-eremophil-7(11)-en-8,12-olide(3)、(4S,5R,8R,10S)-10-hydroxy-eremophil-7(11)-en-8,12-olide(4)、橐吾内酯(5)、4,5-O-二咖啡酰奎宁酸甲酯(6)、异绿原酸C(7)、3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸甲酯(8)、异绿原酸A(9)、1,4-O-二咖啡酰奎宁酸甲酯(10)、绿原酸(11)、咖啡酰苹果酸(12)、咖啡酸甲酯(13)、反式咖啡酸(14)、山柰酚-3-O-(6''-O-乙酰基)-β-D-吡喃葡萄糖苷(15)、紫云英苷(16)、2-苯乙基-β-D-吡喃葡萄糖苷(17)、桦褐孔菌二糖(18)。结论化合物1为新的艾里莫芬烷倍半萜类化合物,命名为川西合耳菊内酯A;化合物2、4、5、10、12、13、15、17、18为首次从合耳菊属中分离得到。

鸟氨酸脱羧酶抑制剂对天仙子生长和托品烷生物碱生物合成的影响

天仙子(Hyoscyamus niger)是重要的托品烷生物碱(tropane alkaloids,TAs)药源植物,鸟氨酸脱羧酶(ornithine decarboxylase,ODC)作为腐胺生物合成的关键酶在植物的生长发育及次生代谢中发挥着重要作用。但是ODC是否参与天仙子TAs的生物合成,目前尚不清楚。本研究利用2.5 mmol·L-1的ODC特异性抑制剂二氟甲基鸟氨酸(difluoromethylornithine,DFMO)处理3周龄天仙子植株,处理2周后对实验组和对照组植株的多胺、TAs和生物量分别进行了测定。测定结果表明,DFMO能够显著抑制天仙子生长和多胺及TAs的生物合成。本研究表明ODC在天仙子生长发育及TAs生物合成中发挥着重要的作用。