HER-2靶向硼脂质体的细胞靶向与细胞内分布研究

目的分析新制备的HER2靶向硼脂质体在细胞靶向、滞留及细胞内分布等方面的特性,探讨该脂质体作为靶向给药系统用于硼中子俘获治疗研究的可能性。方法分别从靶向剂Trastuzumab、脂质体和装载的WSA3个方面观察SKBR3细胞对125ITrastuzumabWSA3H脂质体的摄取与滞留。Trastuzumab标记了125I用伽玛计数器检测;脂质体标记了3H用液闪计数器检测;WSA用感应耦合等离子体质谱仪检测。激光共聚焦显微镜观察WSA在细胞内的分布。结果最初8h细胞对125ITrastuzumab的摄取量快速增加,24h后细胞内125I量反而有所下降。细胞对3H脂质体的摄取随培养时间而增加,直到48h也没有达到平台期。培养4、8及24h,细胞含硼量分别达到55、78及132×10-6。细胞摄取125ITrastuzumabWSA3H脂质体后,在普通培养液中培养24和48h,分别有90%、67%的WSA滞留在细胞内。激光共聚焦显微镜下显示大部分WSA位于细胞浆。结论细胞摄取量满意,WSA在细胞内滞留时间长,说明125ITrastuzumabWSA3H脂质体是一个很好的运载工具,有希望应用于硼中子俘获治疗研究。

HER-2靶向硼脂质体的制备与影响因素研究

目的制备具有良好靶向性的硼脂质体,为硼中子俘获治疗的研究与应用建立一个有效的靶向给药途径。方法采用新型的主动载药方法pH梯度法制备硼脂质体,分析不同药脂比例对包封率的影响,优化Trastuzumab连接到DSPEPEGNHS分子微团的时间因素,采用微团转移法将TrastuzumabPEGDSPE掺入预先制备的硼脂质体,比较不同时间和温度对掺入量的影响,测试脂质体的稳定性、温度对Trastuzumab与受体结合能力的影响以及硼脂质体的受体靶向特异性。结果制备的硼脂质体大小均匀,直径约为100nm,圆形小囊状,药物包封率高。Trastuzumab与DSPEPEGNHS室温下孵育1h可达到足够高的连接率。60℃的水浴中作用4h,90%的TrastuzumabPEGDSPE掺入了脂质体脂膜。脂质体稳定,37℃保存2周仍有95%的抗体与脂质体相连。实验所用温度对Trastuzumab与HER2结合的能力影响不大。制备的硼脂质体与HER2受体的结合能被浓度不断增高的Trastuzumab所置换。结论本法制备的硼脂质体大小均匀,外观圆整,药物包封率高,有良好稳定性。实验过程对抗体特性无明显影响,硼脂质体具备与HER2受体特异性结合的能力。