Objectif Rechercher les mecanismes moleculaires par lesquels des calpaines extracellulaires affectent l'adherence et la mobilite des cellules epitheliales HK-2 derivees du tubule proximal humain. Mdthodes Western blo...Objectif Rechercher les mecanismes moleculaires par lesquels des calpaines extracellulaires affectent l'adherence et la mobilite des cellules epitheliales HK-2 derivees du tubule proximal humain. Mdthodes Western blot pour detecter le clivage des chaines α des integrines; dosage radioimraunologique pour mesurer V AMP cyclique intraceUulaire; fluorescence-activated cell sorting (FACS) pour tester l'apoptose cellulaire. La morpholo- gie des ceUules HK-2 a ete observee et photographiee. Rdsultats ( 1 ) L ' exposition des ceUules HK-2 a la calpaine μ n'a pas entratne de clivage des chaines α3 et αV des integrines; (2)V exposition des cellules HK-2 -2 la calpaine μ entrafnait une augmentation progressive de V accumulation intraceUulaire d' AMP cyclique( P 〈 O. 05) qui etait associee une resistance ceUulaire a Vapoptose( P 〈 O. 05 ) ; (3)Vaddition d'un inhibiteur pharmacologique de la protdine kinase A ( PKA ) prevenait totalement les modifications d' adherence et de mobilite cellulaires induites par calpaine μ. Conclusion Les calpaines externalieses peuvent modifier V adherence et la mobilite ceUulaires via un mecanisme qui implique V accumulation d' AMP cyclique et 1' activation de la PKA. Par ces mecanismes, les calpaYnes externalisees pourraient jouer un role dans Vinduction de la reparation au cours de l'insuffucance renale aigue.展开更多
文摘Objectif Rechercher les mecanismes moleculaires par lesquels des calpaines extracellulaires affectent l'adherence et la mobilite des cellules epitheliales HK-2 derivees du tubule proximal humain. Mdthodes Western blot pour detecter le clivage des chaines α des integrines; dosage radioimraunologique pour mesurer V AMP cyclique intraceUulaire; fluorescence-activated cell sorting (FACS) pour tester l'apoptose cellulaire. La morpholo- gie des ceUules HK-2 a ete observee et photographiee. Rdsultats ( 1 ) L ' exposition des ceUules HK-2 a la calpaine μ n'a pas entratne de clivage des chaines α3 et αV des integrines; (2)V exposition des cellules HK-2 -2 la calpaine μ entrafnait une augmentation progressive de V accumulation intraceUulaire d' AMP cyclique( P 〈 O. 05) qui etait associee une resistance ceUulaire a Vapoptose( P 〈 O. 05 ) ; (3)Vaddition d'un inhibiteur pharmacologique de la protdine kinase A ( PKA ) prevenait totalement les modifications d' adherence et de mobilite cellulaires induites par calpaine μ. Conclusion Les calpaines externalieses peuvent modifier V adherence et la mobilite ceUulaires via un mecanisme qui implique V accumulation d' AMP cyclique et 1' activation de la PKA. Par ces mecanismes, les calpaYnes externalisees pourraient jouer un role dans Vinduction de la reparation au cours de l'insuffucance renale aigue.