罗格列酮与全反式维甲酸联合对骨髓瘤细胞增殖抑制作用及其机制探讨

目的探讨罗格列酮（RGZ）与全反式维甲酸（ATRA）在体内外对骨髓瘤细胞生长的影响及其作用途径。方法用RG2和ATRA单独或联合处理多发性骨髓瘤细胞系U266和RPMI8226细胞，采用^1H—TdR掺入法检测细胞增殖变化；Annexin—V和PI双染后采用流式细胞术检测细胞凋亡；用半定量RT-PCR方法检测凋亡抑制基因FLIP、XIAP及survivin mRNA表达变化；采用荧光CaspACE试剂盒检测caspase-3活性变化；采用裸鼠体内成瘤试验观察骨髓瘤细胞在动物体内生长情况。结果RGZ对骨髓瘤细胞具有增殖抑制作用，且呈剂量依赖关系（U266组r=0．991，P〈0．01；RPMI8226组r=0．961，P〈0．01）；与RGZ单用组比较，ATRA与RGZ联合对骨髓瘤细胞的增殖抑制作用更明显（U266组P〈0．001；RPMI8226组P〈0．01）；10μmol／L的RGZ处理组U266细胞凋亡率为（9．8±1．7）％，RPMI8226细胞凋亡率为（10．7±3．3）％，且诱导凋亡作用呈时间、剂量依赖性，ATRA与RGZ联合应用时，凋亡细胞的比例较相应的RGZ单独处理组显著升高（P值均〈0．01）；RGZ能抑制FLIP、XIAP及survivin mRNA的表达，ATRA能协同RGZ进一步抑制FLIP、XIAP及survivin mRNA的表达；经RGZ处理的骨髓瘤细胞caspase-3活性显著增加，RGZ与ATRA联合处理后caspase-3活性较RGZ处理组显著增加（P〈0．01）；RGZ可明显抑制骨髓瘤细胞在裸鼠体内的生长（P〈0．001），并且ATRA与RGZ联合能增强RGZ在裸鼠体内对骨髓瘤细胞生长的抑制作用（P〈0．01）。结论RGZ能通过抑制FLIP、XIAP及survivin的表达、促进caspase-3的活化从而诱导细胞凋亡，抑制细胞增殖。ATRA能增强RGZ对骨髓瘤细胞的上述作用，两者联合具有协同效应。