目的对无血清悬浮HEK293细胞培养表达狂犬病毒(rabies virus,RV)包膜糖蛋白(glycoprotien,G)的人腺病毒5型(adenovirus type 5,Ad5)重组病毒(Ad5-RVG)的条件进行优化。方法以Ad5-RVG感染无血清悬浮培养的HEK293细胞,通过检测病毒收获液...目的对无血清悬浮HEK293细胞培养表达狂犬病毒(rabies virus,RV)包膜糖蛋白(glycoprotien,G)的人腺病毒5型(adenovirus type 5,Ad5)重组病毒(Ad5-RVG)的条件进行优化。方法以Ad5-RVG感染无血清悬浮培养的HEK293细胞,通过检测病毒收获液的感染活性粒子和总病毒粒子,比较不同补加新鲜培养基比例、感染复数、感染细胞密度、病毒培养时间及病毒培养温度等培养条件下的病毒产量,以确定重组病毒的最佳培养条件。结果Ad5-RVG在无血清悬浮HEK293细胞上的最佳培养条件为:在1.5×106 ml﹣1的细胞密度下按感染复数10感染Ad5-RVG,并在病毒感染时补加≥50%293SFMⅡ新鲜培养基,于(36±1)℃、120 r/min培养44~56 h后收获病毒液。结论确定了Ad5-RVG在无血清悬浮HEK293细胞上的最佳培养条件,为Ad5-RVG的大规模培养提供了重要的研究基础和数据参考。展开更多