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一种快速检测非洲猪瘟病毒I177L基因缺失毒株的荧光定量PCR方法
被引量:
1
1
作者
邱英武
常昊
+11 位作者
彭杰
易和友
王秋梅
郭彦辰
吴倩雯
曹雪珍
林丽苗
李薇
周庆丰
张桂红
李群辉
龚浪
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第6期2521-2527,共7页
本研究旨在建立一种特异、灵敏、快速的ASFV-G-ΔI177L实时荧光定量PCR(FQ-PCR)检测方法。针对ASFV I117L基因的保守区域设计特异性引物/探针对,通过优化反应条件和反应程序,从而提高检测方法的灵敏性,并验证检测方法的重复性和特异性。...
本研究旨在建立一种特异、灵敏、快速的ASFV-G-ΔI177L实时荧光定量PCR(FQ-PCR)检测方法。针对ASFV I117L基因的保守区域设计特异性引物/探针对,通过优化反应条件和反应程序,从而提高检测方法的灵敏性,并验证检测方法的重复性和特异性。对170份临床样品进行了检测,并与OIE推荐的检测方法进行对比。结果表明,基于ASFV I117L基因所设计的特异性引物/探针对,能扩增2.2×10^(1)~2.2×10^(10)copies·μL^(-1)的pMD18-I177L标准质粒,建立的标准曲线R 2可达0.9957,最低检测模板浓度为2.2×10^(1)copies·μL^(-1);该方法扩增反应采用一步法,耗时35 min,批内、批间变异系数均<1.8%;针对ASFV I177L基因特异性扩增,但对其他5种常见猪病毒核酸样品及无酶水未见阳性扩增;用该方法对170份临床样品进行检测,本方法和OIE推荐的检测方法具有良好的一致性。本研究成功建立了一种特异、灵敏、快速ASFV-G-ΔI177L检测方法,为临床非洲猪瘟病毒的监测诊断提供了良好的技术支撑。
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关键词
ASF
ASFV
TaqMan
FQ-PCR
分子诊断
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职称材料
遗传性球形红细胞增多症患者外周血红细胞形态的扫描电镜观察
被引量:
1
2
作者
WanMeiling
liqunhui
ZhangDongsheng
《临床血液学杂志》
1999年第5期194-197,共4页
目的 :为探讨遗传性球形红细胞增多症异形红细胞的形态分类、发生演变、诊断和鉴别 ,本文运用扫描电镜技术对遗传性球形红细胞增多症患者外周血红细胞进行研究。方法 :7例遗传性球形红细胞增多症患者及 2例家系成员的静脉血置于扫描电...
目的 :为探讨遗传性球形红细胞增多症异形红细胞的形态分类、发生演变、诊断和鉴别 ,本文运用扫描电镜技术对遗传性球形红细胞增多症患者外周血红细胞进行研究。方法 :7例遗传性球形红细胞增多症患者及 2例家系成员的静脉血置于扫描电镜下观察。结果 :在观察红细胞从盘形到口形 ,最终至球形的过程中 ,作者对各型红细胞直径和中央凹陷直径及细胞厚度的变化作了测量 ,并结合细胞表面形态和测量结果将病变红细胞分成 5个亚型 ,即 :盘口型 -碗口型 -球口型 -口球型 -典型球形 ,其他少量出现的异常红细胞 (棘状和靶状红细胞 )则归于畸变类。结论 :上述分型对于判断异形红细胞类型和诊断本病很有帮助。
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关键词
遗传性
球形
红细胞增多症
扫描电镜
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职称材料
题名
一种快速检测非洲猪瘟病毒I177L基因缺失毒株的荧光定量PCR方法
被引量:
1
1
作者
邱英武
常昊
彭杰
易和友
王秋梅
郭彦辰
吴倩雯
曹雪珍
林丽苗
李薇
周庆丰
张桂红
李群辉
龚浪
机构
华南农业大学兽医学院非洲猪瘟防控技术研究中心
广东省畜禽健康养殖与环境控制企业重点实验室
国家非洲猪瘟区域实验室(广州)
广东省动物源性人兽共患病预防与控制重点实验室
岭南现代农业科学与技术广东省实验室茂名分中心
出处
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第6期2521-2527,共7页
基金
广州市重点领域研发计划(202206010036)
广州市基础与应用基础研究项目(202201010490)
+1 种基金
茂名实验室科研启动项目(2021TDQD002)
财政部和农业农村部:国家现代农业产业技术体系资助(CARS-35)
文摘
本研究旨在建立一种特异、灵敏、快速的ASFV-G-ΔI177L实时荧光定量PCR(FQ-PCR)检测方法。针对ASFV I117L基因的保守区域设计特异性引物/探针对,通过优化反应条件和反应程序,从而提高检测方法的灵敏性,并验证检测方法的重复性和特异性。对170份临床样品进行了检测,并与OIE推荐的检测方法进行对比。结果表明,基于ASFV I117L基因所设计的特异性引物/探针对,能扩增2.2×10^(1)~2.2×10^(10)copies·μL^(-1)的pMD18-I177L标准质粒,建立的标准曲线R 2可达0.9957,最低检测模板浓度为2.2×10^(1)copies·μL^(-1);该方法扩增反应采用一步法,耗时35 min,批内、批间变异系数均<1.8%;针对ASFV I177L基因特异性扩增,但对其他5种常见猪病毒核酸样品及无酶水未见阳性扩增;用该方法对170份临床样品进行检测,本方法和OIE推荐的检测方法具有良好的一致性。本研究成功建立了一种特异、灵敏、快速ASFV-G-ΔI177L检测方法,为临床非洲猪瘟病毒的监测诊断提供了良好的技术支撑。
关键词
ASF
ASFV
TaqMan
FQ-PCR
分子诊断
Keywords
ASF
ASFV
TaqMan FQ-PCR
molecular diagnosis
分类号
S852.659.1 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
遗传性球形红细胞增多症患者外周血红细胞形态的扫描电镜观察
被引量:
1
2
作者
WanMeiling
liqunhui
ZhangDongsheng
机构
Lab. of Electron Microscopy
出处
《临床血液学杂志》
1999年第5期194-197,共4页
文摘
目的 :为探讨遗传性球形红细胞增多症异形红细胞的形态分类、发生演变、诊断和鉴别 ,本文运用扫描电镜技术对遗传性球形红细胞增多症患者外周血红细胞进行研究。方法 :7例遗传性球形红细胞增多症患者及 2例家系成员的静脉血置于扫描电镜下观察。结果 :在观察红细胞从盘形到口形 ,最终至球形的过程中 ,作者对各型红细胞直径和中央凹陷直径及细胞厚度的变化作了测量 ,并结合细胞表面形态和测量结果将病变红细胞分成 5个亚型 ,即 :盘口型 -碗口型 -球口型 -口球型 -典型球形 ,其他少量出现的异常红细胞 (棘状和靶状红细胞 )则归于畸变类。结论 :上述分型对于判断异形红细胞类型和诊断本病很有帮助。
关键词
遗传性
球形
红细胞增多症
扫描电镜
Keywords
Hereditary spherocytosis Scanning electron microscope
分类号
R555.104 [医药卫生—血液循环系统疾病]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
一种快速检测非洲猪瘟病毒I177L基因缺失毒株的荧光定量PCR方法
邱英武
常昊
彭杰
易和友
王秋梅
郭彦辰
吴倩雯
曹雪珍
林丽苗
李薇
周庆丰
张桂红
李群辉
龚浪
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023
1
下载PDF
职称材料
2
遗传性球形红细胞增多症患者外周血红细胞形态的扫描电镜观察
WanMeiling
liqunhui
ZhangDongsheng
《临床血液学杂志》
1999
1
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职称材料
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