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基于PI3K/Akt/p53信号通路探讨白花蛇舌草乙酸乙酯萃取物诱导急性髓系白血病细胞凋亡的作用
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作者 陈智 林圣云 +4 位作者 熊昊 王卓 付强 杨李 裘玫 《现代中西医结合杂志》 CAS 2024年第3期329-334,共6页
目的通过评估白花蛇舌草乙酸乙酯萃取物(EAEHDW)对磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/p53信号通路传导调节作用,探讨其抑制急性髓系白血病M2型(AML-M2)细胞株Kasumi-1增殖及诱导凋亡的机制。方法利用乙酸乙酯从白花蛇舌草中萃取制... 目的通过评估白花蛇舌草乙酸乙酯萃取物(EAEHDW)对磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/p53信号通路传导调节作用,探讨其抑制急性髓系白血病M2型(AML-M2)细胞株Kasumi-1增殖及诱导凋亡的机制。方法利用乙酸乙酯从白花蛇舌草中萃取制备得到EAEHDW,高效液相色谱串联质谱装置检测样品纯度。设置空白组,将浓度分别为0.02 mg/mL、0.04 mg/mL、0.06 mg/mL、0.08 mg/mL、0.10 mg/mL的EAEHDW加入对数生长期的Kasumi-1细胞株,采用MTT法检测不同浓度EAEHDW作用不同时间后Kasumi-1细胞存活率,采用Annexin V/PI流式细胞术检测不同浓度EAEHDW作用24 h后Kasumi-1细胞凋亡情况,采用Western blot法检测不同浓度EAEHDW(0.02 mg/mL、0.04 mg/mL、0.06 mg/mL)作用24 h后Kasumi-1细胞中含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase)家族蛋白及PI3K/Akt/p53信号传导通路蛋白表达情况。结果不同浓度的EAEHDW干预后,细胞存活率较空白组明显降低,细胞凋亡率较空白组明显升高,且细胞存活率随着作用时间的延长和药物浓度的增加而下降越明显,细胞凋亡率随着药物浓度的增加而升高越明显,差异均有统计学意义(P均<0.05);不同浓度的EAEHDW作用于Kasumi-1细胞后,细胞中多聚ADP核糖聚合酶(PARP)、Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9、细胞色素C(Cyto-C)、p53蛋白相对表达量均明显升高(P均<0.05),Akt、磷酸化Akt(p-Akt)、鼠双微染色体2(MDM2)、磷酸化MDM2(p-MDM2)蛋白相对表达量均明显降低(P均<0.05)。结论EAEHDW可明显抑制髓系白血病Kasumi-1细胞增殖并诱导其凋亡,其机制可能与影响Caspase家族蛋白表达和抑制PI3K/Akt/p53信号通路导致p53激活有关。 展开更多
关键词 白花蛇舌草 急性髓系白血病 Kasumi-1细胞株 凋亡 PI3K/Akt/p53信号通路
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抗白延年汤1号方联合预激化疗方案治疗中高危骨髓增生异常综合征临床研究 被引量:2
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作者 王博 肖韵悦 +5 位作者 沈英英 张蕴 林圣云 武利强 周郁鸿 王珺 《新中医》 CAS 2020年第10期60-64,共5页
目的:观察抗白延年汤1号方联合预激化疗方案治疗中高危骨髓增生异常综合征的血液学与中医证候疗效以及安全性。方法:将中高危骨髓增生异常综合征患者38例随机分对照组18例和联合组20例。对照组采用单纯预激化疗方案(地西他宾+CAG或HAG)... 目的:观察抗白延年汤1号方联合预激化疗方案治疗中高危骨髓增生异常综合征的血液学与中医证候疗效以及安全性。方法:将中高危骨髓增生异常综合征患者38例随机分对照组18例和联合组20例。对照组采用单纯预激化疗方案(地西他宾+CAG或HAG);联合组采用抗白延年汤1号方联合预激化疗方案。观察2组血液学指标变化、中医证候积分变化,并评估临床疗效。结果:2组治疗前外周血象比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后,2组各访问时点比较,差异无统计学意义(P>0.05)。2组治疗前原始细胞百分率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后,2组各访问时点原始细胞百分率与治疗前比较,差异有统计学意义(P<0.05)。联合组治疗后8周、12周外周血原始细胞百分率与对照组比较下降(P<0.05);联合组治疗后8周、24周骨髓原始细胞百分率与对照组比较下降(P<0.05)。治疗前,2组病例中医证候积分比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后各访问时点,2组病例中医证候积分比较,差异有统计学意义(P<0.05)。联合组治疗后各访问时点,中医证候改善情况优于对照组(P<0.05)。2组疗效比较,经Mann-Whitney U检验,差异无统计学意义(P>0.05)。对照组、联合组死亡或转白率分别占22.22%、20.00%,2组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。对照组、联合组无疾病进展生存率分别占77.77%、80.00%,2组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。2组病例总生存天数与无疾病进展生存天数比较,差异无统计学意义(P>0.05)。2组安全性观察指标比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:抗白延年汤1号方联合预激化疗方案能够改善中高危骨髓增生异常综合征患者临床证候,下调外周血、骨髓原始细胞百分率,可进行扩大病例的深入研究。 展开更多
关键词 骨髓增生异常综合征 中高危 抗白延年汤1号方 预激化疗 原始细胞
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Efficacy and advantages of modified Traditional Chinese Medicine treatments based on"kidney reinforcing"for chronic aplastic ane-mia:a randomized controlled clinical trial 被引量:10
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作者 Wu Dijiong Shen Yiping +13 位作者 Ye Baodong Fang Bingmu lin shengyun Chen Zhilu Jiang Huifang Feng Changwei He Lüyuan Gao Yanting Liu Yonglin Liu Yonghua Zhu Jiajia Wu Liqiang Shao Keding Zhou Yuhong 《Journal of Traditional Chinese Medicine》 SCIE CAS CSCD 2016年第4期434-443,共10页
OBJECTIVE:To compare the efficacy of modified treatments based on "kidney reinforcing" in the management of chronic aplastic anemia(CAA),and explore their advantages and specialties.METHODS:One hundred and e... OBJECTIVE:To compare the efficacy of modified treatments based on "kidney reinforcing" in the management of chronic aplastic anemia(CAA),and explore their advantages and specialties.METHODS:One hundred and eleven patients with CAA were randomly divided into three groups:kidney reinforcing alone(KA),"kidney reinforcing and Qi tonifying"(KQ),and "kidney reinforcing and blood circulation invigorating"(KC).Normal and positive control groups were also formed.All patients were treated for 6 months(two courses).Hemograms,Traditional Chinese Medicine(TCM) syndrome scores,and therapeutic effects were assessed,and changes in T-lymphocyte subsets,regulatory T cells and cytokines were detected.RESULTS:The KQ and KC groups had lower TCM syndrome scores than the positive control group after 6 months(P < 0.05).The KQ group had a higher overall efficacy than the positive control group after 3 months(P < 0.05),while platelet counts increased in the KC group after 6 months(P < 0.05).CD3+ T-lymphocyte ratios decreased only in the KQ group,while CD3 + CD4 + CD8-Tlymphocytes increased only in the KC group after 6 months(P <0.05).Levels of interferon-γ,tumor necrosis fac-tor-α,interleukin(IL)-2 and IL-6 decreased and levels of IL-4 and IL-10 increased in all treated groups after 6 months.Levels of IL-6 in the KQ and KC groups were lower than those in the positive control group(P < 0.05).CONCLUSION:Treatments based on kidney reinforcing have a rebalancing effect on cytotoxic and T helper cells,and regulate expression of interferon-γ,IL-2,IL-6 and IL-4.KQ may be more effective in treating CAA,and KC may have an advantage in platelet recovery. 展开更多
关键词 Anemia aplastic Reinforcing Qi strengthening kidney Reinforcing kidney nourish ing blood Randomized controlled trial
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环磷酰胺联合泼尼松治疗环孢菌素难治/复发的大颗粒淋巴细胞白血病相关纯红细胞再生障碍 被引量:2
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作者 杨冠群 刘晓庆 +6 位作者 杨慧 龙启强 林圣云 杨岩 贾晋松 何广胜 李建勇 《临床血液学杂志》 CAS 2023年第1期39-43,共5页
目的:评估环磷酰胺联合泼尼松(CP)方案治疗环孢菌素(CsA)难治/复发的大颗粒淋巴细胞白血病(LGLL)相关纯红细胞再生障碍(PRCA)的疗效及耐受性。方法:回顾性分析登记于中国东部贫血协作组(CECGA)数据库的21例CsA治疗无效或复发的LGLL相关P... 目的:评估环磷酰胺联合泼尼松(CP)方案治疗环孢菌素(CsA)难治/复发的大颗粒淋巴细胞白血病(LGLL)相关纯红细胞再生障碍(PRCA)的疗效及耐受性。方法:回顾性分析登记于中国东部贫血协作组(CECGA)数据库的21例CsA治疗无效或复发的LGLL相关PRCA患者临床资料及接受CP方案治疗结果,评估疗效及耐受性。结果:CsA难治/复发患者共21例,其中难治性16例、复发性5例,经CP方案治疗后,15例达完全缓解(CR),3例达部分缓解(PR),3例治疗无效,治疗总有效率为85.7%(18/21),CR率为71.4%(15/21),中位达PR时间为2.2(0.5~6.6)个月,中位达CR时间为2.3(1.3~6.8)个月,中位疗效维持时间17.0(5.0~32.0)个月。8例STAT3突变阳性患者中7例达CR。13例(61.9%)患者在CP方案治疗期间出现不良反应,主要为粒细胞减少和肝功能异常,2例患者因4级粒细胞减少停药。随访期内,无治疗相关死亡事件。3例(14.3%)患者因药物减停出现复发。中位随访20.0(4.0~34.0)个月,15例仍有效,中位无复发生存时间为16.0(3.0~32.0)个月。结论:对于CsA难治/复发的LGLL相关PRCA患者,CP方案疗效确切,且对STAT3突变阳性患者也效果良好。CP方案主要不良反应为骨髓毒性。 展开更多
关键词 大颗粒淋巴细胞白血病 纯红细胞再生障碍 环孢菌素 难治 复发 环磷酰胺
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抗人T细胞猪免疫球蛋白联合艾曲泊帕治疗初发重型再生障碍性贫血疗效分析 被引量:3
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作者 宫跃敏 马永超 +10 位作者 陈小玉 李瑞鑫 李悦 张雅文 师锦宁 龙启强 杨岩 贾晋松 林圣云 何广胜 李建勇 《临床血液学杂志》 2023年第7期482-487,共6页
目的:研究抗人T细胞猪免疫球蛋白(anti-human T lymphocyte porcine immunoglobulin,p-ATG),环孢素A(Cyclosporin A,CsA)组成的强化免疫抑制治疗(intensive immunosuppressive therapy,IST)联合艾曲泊帕在重型再生障碍性贫血(severe apl... 目的:研究抗人T细胞猪免疫球蛋白(anti-human T lymphocyte porcine immunoglobulin,p-ATG),环孢素A(Cyclosporin A,CsA)组成的强化免疫抑制治疗(intensive immunosuppressive therapy,IST)联合艾曲泊帕在重型再生障碍性贫血(severe aplastic anemia,SAA)患者的疗效及影响因素。方法:前瞻性登记纳入2020年4月—2022年8月25例初发SAA患者,接受p-ATG为基础的IST联合艾曲泊帕治疗。主要终点是6个月完全反应(complete response,CR)率和总体反应率(overall response rate,ORR)。次要终点是生存率、复发率及克隆演变风险。结果:治疗后6个月CR率和ORR分别为19.05%、71.43%。中位获得反应时间为3.00(0.10~11.80)个月,中位获得CR时间为14.40(0.90~20.00)个月,多因素分析显示疾病严重程度对获得反应时间有显著影响。中位随访时间11.30(0.70~26.40)个月,总生存率96.00%,中位无事件生存期为12.70(1.40~18.90)个月。1例于治疗后10个月出现克隆性造血。≥3级不良反应:感染8例,1例死亡;肝肾功能损害1例和牙周病2例。结论:p-ATG为基础的IST联合艾曲泊帕治疗SAA可获得较为满意的血液学反应率和反应速度,耐受性和安全性良好。 展开更多
关键词 重型再生障碍性贫血 抗人T细胞免疫球蛋白 艾曲泊帕
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白花蛇舌草乙醇提取物体外诱导人AML-M2白血病细胞凋亡机制研究 被引量:6
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作者 陈智 林圣云 +4 位作者 李建新 李晖 熊昊 聂应明 裘玫 《中国现代应用药学》 CAS CSCD 北大核心 2020年第17期2067-2072,共6页
目的观察白花蛇舌草乙醇提取物(ethanol extract of Hedyotis diffusa Willd.,EEHDW)对AML-M2白血病Kasumi-1细胞增殖和凋亡的影响机制。方法采用MTT比色法、Hoechest荧光染色检测测定EEHDW作用后Kasumi-1细胞增殖和凋亡的情况,Western ... 目的观察白花蛇舌草乙醇提取物(ethanol extract of Hedyotis diffusa Willd.,EEHDW)对AML-M2白血病Kasumi-1细胞增殖和凋亡的影响机制。方法采用MTT比色法、Hoechest荧光染色检测测定EEHDW作用后Kasumi-1细胞增殖和凋亡的情况,Western blotting法检测Kasumi-1细胞中Bcl-2、Bax、caspase-3、caspase-9、Cyto-C、P65、p-P65、IkBα、p-IkBα、IKKα/β、C-myc以及AML1-ETO的蛋白水平。结果 EEHDW抑制急性髓系白血病Kasumi-1细胞增殖,并具有时间和浓度依赖性。0.04,0.06,0.08mg·mL?1的EEHDW能诱导细胞凋亡(P<0.05或P<0.01)。EEHDW可以显著上调Cyto-C、cleaved PARP、cleaved caspase-3、cleaved caspase-9以及Bax的表达水平,而降低Bcl-2、C-myc和AML1-ETO蛋白的表达,同时EEHDW能够浓度依赖性地增加p-P65、p-IkBα的蛋白表达。结论 EEHDW诱导Kasumi-1细胞凋亡一方面是通过调节Bax/Bcl-2的表达影响线粒体途径,另外一方面还与激活NF-кB信号通路有关,在这个过程中同时抑制原癌基因C-myc和AML1-ETO融合基因的表达。 展开更多
关键词 白花蛇舌草乙醇提取物 KASUMI-1细胞 凋亡 NF-KB信号通路
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UPLC-MS/MS法测定干血斑中环孢素的含量 被引量:1
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作者 蔡田恬 杜益 +5 位作者 颜星星 施政 林圣云 程秋琴 陶保华 邢嘉琪 《中国临床药学杂志》 CAS 2020年第6期428-431,共4页
目的建立并且验证1种基于液相色谱串联质谱法检测干血斑中环孢素含量的方法。方法干血斑样本加入同位素内标后经甲醇水溶液提取,离心后取上清液经C18色谱柱液相分离,在正离子模式和多反应监测模式下采集质谱信号。结果环孢素在50~1000μ... 目的建立并且验证1种基于液相色谱串联质谱法检测干血斑中环孢素含量的方法。方法干血斑样本加入同位素内标后经甲醇水溶液提取,离心后取上清液经C18色谱柱液相分离,在正离子模式和多反应监测模式下采集质谱信号。结果环孢素在50~1000μg·L-1内线性良好,R2>0.9951,方法的定量下限<50μg·L-1。在加标质量浓度分别为150、500、750μg·L-1时,方法的精密度分别为5.9%、5.5%和4.5%,回收率分别为(102.4±6.0)%、(98.4±5.4)%和(100.2±4.5)%。结论本方法操作简单、准确度高、灵敏度高和重复性好,适用于干血斑中环孢素含量的定量检测。本方法与静脉血检测结果相比有较好的一致性,具有很好的临床应用前景。 展开更多
关键词 超高效液相色谱-串联质谱 环孢素 定量干血斑技术
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艾曲泊帕联合强化免疫抑制疗法治疗成人重型再生障碍性贫血疗效的预测因素 被引量:3
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作者 李瑞鑫 金媛媛 +7 位作者 杨岩 林圣云 贾晋松 孟凡凯 张东华 龙启强 何广胜 李建勇 《临床血液学杂志》 CAS 2022年第5期333-337,共5页
目的:评价艾曲泊帕联合兔抗人胸腺细胞免疫球蛋白(ATG)和环孢素(CsA)强化免疫抑制疗法(IST)治疗中国成人重型再生障碍性贫血(SAA)的疗效及其预测因素。方法:收集61例成人SAA患者接受艾曲泊帕联合IST治疗的临床资料,评估相关影响因素。结... 目的:评价艾曲泊帕联合兔抗人胸腺细胞免疫球蛋白(ATG)和环孢素(CsA)强化免疫抑制疗法(IST)治疗中国成人重型再生障碍性贫血(SAA)的疗效及其预测因素。方法:收集61例成人SAA患者接受艾曲泊帕联合IST治疗的临床资料,评估相关影响因素。结果:IST治疗后3、6和12个月,累计总有效率分别为67%、79%和85%,累计完全缓解率分别为21%、22%和32%。治疗前网织红细胞百分比(AUC=0.784,95%CI 0.631~0.937,P=0.006)、红细胞分布宽度变异系数(AUC=0.737,95%CI 0.527~0.947,P=0.022)、淋巴细胞绝对计数(AUC=0.733,95%CI 0.563~0.903,P=0.025)或治疗前感染(AUC=0.705,95%CI 0.519~0.891,P=0.048)能预测艾曲泊帕联合IST治疗的疗效。结论:IST前淋巴细胞绝对计数、网织红细胞百分比、红细胞分布宽度变异系数或治疗前感染能预测成人SAA患者对艾曲泊帕联合IST治疗的疗效。 展开更多
关键词 重型再生障碍性贫血 艾曲泊帕 强化免疫抑制疗法 疗效
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