高效液相色谱法分离和分析喷妥司汀及其异构体

利用高效液相色谱方法在普通Polar-RP柱上成功分离pentostatin的4个异构体。通过考察色谱柱、流动相、温度等对分离度的影响，得到最佳分离条件为：室温下以Phenomenex Synergi Polar-RP色谱柱，采用磷酸氢二钠水溶液（50mmol，pH8．8）．甲醇（97：3，WV）为流动相；282nm检测；流速为1．0mL／min。结果表明，4个异构体之间均达到基线分离，且保留时间和峰面积的RSD均控制在0．6％以内。pentostatin在0．1—1．0g/L、其异构体在0．5-1．5mg／L范围内的线性相关系数（R）均大于0．99。在此实验基础上，建立分离纯化Pentostatin的制备色谱条件，以制备色谱法得到的产品纯度达到99．8％，收率达到理论产率的80．2％。