抗鸭坦布苏病毒感染的中草药筛选及其作用效果的初步研究

为筛选抗鸭坦布苏病毒(DTMUV)的中草药并探究其抗病毒作用效果,本研究通过检测12种中草药对DTMUV感染鸭胚成纤维细胞细胞(DEF)形态学与病毒抑制率的影响,以及对DTMUV病毒滴度与病毒载量的影响,筛选在DEF中抗DTMUV效果较明显的中草药;采用鸭胚接种法测定筛选出的3种药物(板蓝根、醋五味子、酒黄芩)对DTMUV感染鸭胚死亡率的影响;并选择效果最好的酒黄芩验证其对DTMUV感染雏鸭死亡率、临床症状、体重及组织(心脏、脾脏)中病毒载量的影响。结果显示:鱼腥草、淫羊藿、金银花、板蓝根、绵马贯众、黄芪、酒黄芩、茵陈、甘草、连翘、醋五味子、白芍水提物在最佳作用浓度时均能减轻DTMUV感染DEF的CPE,并对DTMUV具有不同的抑制率,其中酒黄芩效果最佳;淫羊藿、白芍、板蓝根、黄芪、酒黄芩、茵陈、甘草、醋五味子、连翘能显著降低DEF中DTMUV的病毒滴度(P<0.05);板蓝根、醋五味子、酒黄芩能显著降低DEF中DTMUV的病毒载量(P<0.05);板蓝根、酒黄芩能起到治疗效果,且显著降低鸭胚死亡率(P<0.05),而酒黄芩、醋五味子还能预防病毒感染,且显著降低鸭胚死亡率(P<0.05);酒黄芩能够减轻病鸭临床症状,显著提高病鸭体重(P<0.05),显著降低病鸭死亡率及组织中病毒载量(P<0.05)。综上结果证明板蓝根、酒黄芩、醋五味子在细胞和鸭胚内具有一定抗DTMUV的作用,其中酒黄芩效果最佳,且酒黄芩对DTMUV感染的雏鸭具有治疗作用,可以成为抗DTMUV的潜在药物。

鸭坦布苏病毒自然感染病例的诊断与病理学观察

为探究鸭坦布苏病毒(DTMUV)在贵州省鸭群的流行,对疑似DTMUV感染肉种鸭进行剖检,观察发病鸭内脏器官病变。取病鸭内脏组织进行RT-PCR检测确诊为DTMUV感染,将病料处理后接种BHK-21细胞,进行RT-PCR鉴定和透射电镜观察,确定分离到DTMUV,并将病料组织制作病理切片。结果显示,接种BHK-21出现明显CPE,电镜观察见病毒颗粒。将分离毒株的E基因经PCR扩增后测序,分析E基因氨基酸序列的同源性,发现所分离毒株与中国北京鸭源参考株同源性最高达99.39%,而与我国早期分离参考株(FX2010)同源性较低,将病料制作切片并进行HE染色,可见脑组织非化脓性脑炎,脾脏淋巴细胞减少,肝细胞变性坏死。本研究成功在贵州省分离到一株DTMUV,对其遗传进化进行分析,为探究贵州省养鸭地区DTMUV的感染和致病提供参考。

微乳液法一步制备NaYF_4∶Yb^(3+),Ho^(3+)@Au

稀土氟化物纳米材料及其贵金属复合物具有独特的光、电、磁性质,在生物标记、光学储存、显示、防伪等领域有着广泛的应用,已成为材料科学领域的研究热点之一。采用微乳液法制备了NaYF_4∶Yb^(3+),Ho^(3+)和NaYF_4∶Yb^(3+),Ho^(3+)@Au复合材料,XRD测试表明NaYF_4∶Yb^(3+),Ho^(3+)的结晶情况良好,无杂质峰,为立方相,NaYF_4∶Yb^(3+),Ho^(3+)@Au产物的衍射峰中同时含有NaYF_4与Au两种晶相;SEM图像显示两种纳米粒子均为形貌、尺寸较为均一的球形粒晶为58nm左右;上转换光谱中显示Ho^(3+)在484,682和767nm处具有很高的发光强度,分别对应于~5S_2→~5I_8,~5F_5→~5I_8,~5S_2→~5I_7跃迁。

深圳市园林树池构造设计研究

树池承担着保护植物的功能,设计巧妙的树池还具有塑造园林景观特色、彰显环境氛围的重要作用。近年来深圳城市园林树池的建设存在诸如设计同质化严重、土壤环境恶劣、空间狭窄等问题。通过分析休憩型树池、艺术型树池、生态型树池等优秀树池类型及案例,从前期实地调研、土壤改良、树种选择等方面提出建议,并提出引根技术、隔根技术及组合式种植模块应用的树池构造设计新技术及新工艺。

H6N6亚型禽流感病毒感染鸭免疫器官中3种细胞因子的表达变化

为探讨鸭感染H6N6亚型禽流感病毒(AIV)后对免疫器官中细胞因子IL-2、IL-10和IFN-α转录水平的影响,建立荧光定量PCR方法对胸腺、脾脏、法氏囊中的IL-2、IL-10和IFN-α3种细胞因子检测,研究非免疫鸭感染H6N6亚型AIV后1、3、5 d各细胞因子在免疫器官中的变化。结果显示,建立的荧光定量PCR方法标准曲线相关系数R~2为0.996~1.000,扩增效率为92.2%~93.6%,相关性较好,熔解曲线整齐单一,变异系数均小于9%,可用于后续试验;鸭在感染H6N6亚型AIV后的一定时间内免疫器官中的IL-2、IL-10和IFN-α呈现不同程度的转录水平变化,以及不同的细胞因子在不同组织之间的转录水平差异较大,其中IL-2在法氏囊中的转录水平比在胸腺和脾脏中变化明显较大;而IFN-α在胸腺和脾脏中的转录水平高于法氏囊;IL-10在免疫器官中转录水平较低。还发现H6N6亚型AIV感染鸭后免疫器官中的IL-2、IL-10、IFN-α转录水平在一定时间内为先上升后下降趋势,并且在感染后5 d降到最低。表明感染H6N6亚型AIV对鸭免疫器官中IL-2、IL-10和IFN-α转录水平有一定的影响。

基于功能化磁珠快速提取植物病毒RNA方法的建立与优化

植物病毒病是制约作物生产的主要病害之一。及时明确其病毒病原和发展规律是有效控制其大规模传播的前提。而现有植物病毒病检测技术存在周期长、步骤繁琐、检测环境严苛等缺点。本研究以烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)为模型,基于碱基互补配对原则设计针对TMV的功能化磁珠(CMBs-ACPTMV)进行RNA提取,并对功能化磁珠的制备条件、提取反应条件以及灵敏性和稳定性等性能进行优化分析。结果表明,当添加4μmol捕获探针(ACPTMV)、0.08 mg羧基磁珠(CMBs)时,所制备的CMBs-ACPTMV吸附RNA的能力最好;当提取时间为3 min时,CMBs-ACPTMV提取RNA的效果最好,而改变CMBs-ACPTMV的提取温度时其提取能力无明显变化;性能评价分析发现,CMBs-ACPTMV的灵敏度可达2.5 ng/μL,且检测稳定性较好。与常规RNA提取技术相比,CMBs-ACPTMV在检测时间和样品消耗量上具有突出优势。本研究所建立的功能化磁珠提取法快速、安全和简便,只需简易设备便可实现植物病毒RNA的快速提取,具有广阔的应用前景。

吸引野生鸟类、蝶类的乡土食源植物虾子花(Woodfordia fruticosa)生态景观营造实践

在南方利用优良的鸟类、蝶类食源植物虾子花(Woodfordia fruticosa)可在3~5年内构建有效吸引野生鸟类如红耳鹎(Pycnonotus jocosus)、白头鹎(Pycnonotus sinensis)、叉尾太阳鸟(Aethopyga christinae)、暗绿绣眼鸟(Zosterops japonicus)、朱背啄花鸟(Dicaeum cruentatum)、红胸啄花鸟(Dicaeum ignipectus)、橙腹叶鹎(Chloropsis hardwickii)和北红尾鸲(Phoenicurus auroreus)等,蝶类如巴黎翠凤蝶(Papilio paris)、玉斑凤蝶(Papilio helenus)、玉带凤蝶(Papilio polytes)、青凤蝶(Graphium sarpedon)及报喜斑粉蝶(Delias pasithoe)等的生态景观。进一步对虾子花的栽培管护技术、整体景观构建等提出建议。

中国近海棱梭群体形态学和耳石形态学研究

为研究棱梭不同地理群体间的形态差异,使用多元统计分析方法对采集自金门、厦门、虎门、湛江、北海和防城港6个地点邻近海域的棱梭群体样本的形态和矢耳石形态两方面进行比较研究。对棱梭样本的形态研究结合传统形态学和地标形态学开展,对矢耳石的形态研究则将传统耳石形态分析法和椭圆傅里叶分析法相结合,形态和耳石形态数据的分析结果相似。主成分分析结果表明从28个棱梭形态量度指标提取的前8个主成分累积贡献率为65.868%,从85个耳石形态指标提取的前23个主成分的累积贡献率为79.290%,根据临界值85.000%可以推断这6个棱梭群体间形态和耳石形态上的差异不能够单独依靠少数指标来判断;聚类分析的结果总体显示出群体间差异与地理距离等因素相关联的分布规律;在判别分析中形态学量度指标的综合判别正确率为75.9%,而耳石形态学指标的综合判别正确率略低,为69.3%;对棱梭形态量度指标的单因子方差分析显示湛江棱梭群体与其他群体在形态上存在显著差异的量度指标较少。栖息地环境、饵料组成和海流等可能是导致形态学差异和耳石形态差异形成的主要因素。另一方面,理化因子的相似性和群体间的交流会减弱群体间形态和耳石形态的差异。

广藿香加入陈皮后提取工艺及测定条件的优化研究

建立高效液相色谱法(HPLC),设计正交试验确定广藿香-陈皮混合药材中水溶性成分的最佳提取方案以及确定测定其水溶性成分的最佳HPLC色谱条件。采用蒸馏水为提取溶剂,加热回流提取广藿香中的水溶性成分效果最佳;正交实验结果显示,每次提取时间为30min,广藿香-陈皮药材配料比为1∶1,蒸馏水每次用量为50mL。色谱条件优化结果显示,采用乙腈-0.1%磷酸为流动相,254nm为检测波长进行梯度洗脱效果最佳。

基于HPLC法研究广藿香中加入陈皮后水溶性成分的变化规律

采用加热回流法提取广藿香药材的水溶性成分,建立高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography,HPLC),测定广藿香药材中加入陈皮药材后其水溶性物质(香草酸、原儿茶酸)含量的变化。使用超快速液相色谱法对广藿香化学成分中的水溶性物质的线性关系进行了考察,分别测定了两种提取液中香草酸和原儿茶酸的含量。对广藿香-陈皮混合药材进行提取得到的原儿茶酸的含量比配伍前调高了7倍,香草酸的含量提高了2倍,加入陈皮后广藿香的两种水溶性成分的含量均有所增长。实验的重复性也较好,可对加入陈皮后的广藿香水溶性成分提取效率变化的进一步研究提供参考。

大黄素对四氯化碳诱导肝纤维化大鼠的干预作用

目的探讨大黄素对四氯化碳诱导肝纤维化大鼠的干预作用。方法将50只SD大鼠随机分为正常组、模型组和大黄素低、中、高剂量组,每组10只。正常组给予常规饲养,大黄素各剂量组及模型组给予40%四氯化碳-橄榄油溶液腹腔注射8周以建立肝纤维化大鼠模型。于造模第5周起,大黄素低、中、高剂量组分别给予15 mg/kg、30 mg/kg、60 mg/kg的大黄素灌胃,模型组及正常组给予生理盐水灌胃,共4周。实验结束后,测定各组大鼠血清ALT、AST、白蛋白、透明质酸、层粘连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、Ⅳ型胶原水平;并检测肝组织结缔组织生长因子(CTGF)、金属蛋白酶组织抑制因子1(TIMP-1)、基质金属蛋白酶9(MMP)-9 mRNA的表达;肝组织经苏木精-伊红染色、Masson染色后观察病理学改变。结果模型组大鼠肝小叶结构破坏严重,可见不同程度纤维增生及大量胶原纤维增生;与模型组比较,各大黄素干预组大鼠肝细胞破坏、纤维增生性改变减轻。与正常组相比,模型组血清ALT、AST、透明质酸、LN、PCⅢ、Ⅳ型胶原水平以及肝组织CTGF、TIMP-1 mRNA表达水平升高,血清白蛋白以及肝组织MMP-9 mRNA表达水平降低(均P<0.05);与模型组大鼠相比,各大黄素干预组血清ALT、AST、透明质酸、LN、PCⅢ、Ⅳ型胶原水平以及肝组织CTGF、TIMP-1 mRNA表达水平降低,血清白蛋白以及肝组织MMP-9 mRNA表达水平升高(均P<0.05)。结论大黄素对四氯化碳诱导的肝纤维化大鼠有良好的治疗作用,其机制可能与抑制CTGF、TIMP-1的合成及促进MMP-9的表达有关。

芳香植物在深圳公园中的应用探析

为进一步挖掘深圳公园绿地景观生态功能的新内涵,探索公园绿地的"香化"途径,对深圳22个公园的芳香植物种类、应用频度、配置方式、应用需求等现状进行调查分析,并对芳香植物苗木生产供应情况进行摸底。结果表明,目前深圳公园应用的芳香植物约105种,存在芳香氛围弱、缺乏特色、功能性不明显等应用问题,但市民对公园应用芳香植物的需求强烈, 苗木市场中常规芳香植物苗木生产供应稳定,新优芳香植物品种苗源欠缺。并根据结果提出了统一规划、重点示范、创新应用、保证供应的解决策略。

Complete Genome Sequencing and Analysis of Rehmannia Mosaic Virus Isolate from Shanxi Province

Using double-stranded RNA(dsRNA)technology and sequence-independent amplification(SIA),the molecular identification on infected Rehmannia glutinosa in the field with mosaic symptoms was performed and the whole-genome of the Rehmannia mosaic virus(ReMV)Shanxi isolate(ReMV-SX)was sequenced.Sequencing analysis showed that the virus that infected Rehmannia glutinosa was Rehmannia mosaic virus(ReMV).The full-length of the obtained ReMV-SX sequence(GenBank accession no.JX575184)was 6395 nt,containing four open reading frames(ORFs).The sequence homology analysis of the complete nucleotide sequence showed that ReMV-SX was 93.8%-97.0%homologous to ReMV in Tobamovirus subgroup Ⅰ,while only 49.8%-58.9%homologous to the isolates in subgroups Ⅱ and Ⅲ of the same genus.Phylogenetic analysis showed that ReMV-SX and ReMV-Henan formed a separate branch and had the closest genetic relationship.The results laid the foundation for ongoing researches in the taxonomic status and evolution of ReMV and for further investigating the pathogenic mechanism of ReMV infecting Rehmannia glutinosa.

间歇经口插管管饲技术在吞咽障碍患者中的应用

目的探究间歇经口插管管饲技术在吞咽障碍患者中的应用效果。方法本次研究纳入的对象共有84例,均为我院收治的吞咽障碍患;选取时间段为2019年1月至2019年12月;将患者随机分为42例对照组、42例研究组,对照组采用留置胃管鼻饲技术干预,研究组采用间歇经口插管管饲技术干预,对比两组患者干预前后的吞咽障碍程度评分、血清白蛋白水平及并发症发生率。结果干预前,两组患者吞咽障碍程度评分、血清白蛋白水平对比均无显著差异(P>0.05),护理后,研究组患者血清白蛋白水平显著高于对照组;与对照组相比,研究组患者吞咽障碍程度评分、并发症发生率均更低,两组对比具有统计学意义(P<0.05)。结论对吞咽障碍患者采用间歇经口插管管饲技术干预,不仅能有效降低患者吞咽障碍程度和改善其机体营养状况,还能降低其并发症发生率。

鸭源H6N6亚型AIV荧光定量PCR方法的建立及应用

[目的]为检测鸭感染H6N6亚型AIV后排毒及在组织器官病毒分布情况。[方法]通过建立H6N6亚型AIV荧光定量PCR检测方法,以H6N6亚型AIV M基因保守序列设计特异性引物,将分离到的H6N6亚型AIV病毒反转录为cDNA,进行pMD18-T-M基因克隆质粒构建,以其为标准品建立荧光定量PCR标准曲线,并进行敏感性和重复性试验,利用所建立的方法检测鸭感染H6N6亚型AIV后排毒及在组织器官病毒分布情况。[结果]该方法灵敏度高,最低检测到1.0×10^(1) copies/μL,从而可以得出拷贝数与Ct值之间的线性关系曲线表达式:Ct=-3.408×lg Copynumber+33.773(R^(2)=0.998),线性范围为1.0×10^(7)~1.0×10^(1)拷贝/μL,熔解峰的熔解温度在83℃左右。[结论]表明建立的鸭源H6N6亚型AIV荧光定量PCR检测方法,特异性强,重复性好,为后续实验研究提供了技术和数据支撑。

基于机器视觉的无接触快速尺寸测量方法

本文基于机器视觉技术提出了一种非接触式的零件尺寸快速测量方法。该方法同时可以做到以较快的速度和较低的成本对零件进行测量。经过大量实验测试,本文算法测量精度在±0.002mm以内,可以适用于大多数需要快速高精度测量工件的场合。