激活素A调节人卵巢颗粒细胞Smad2和CYP19A表达的研究

目的 探讨激活素A通过Smad2和CYP19A表达促进颗粒细胞增殖的作用途径。方法2017年3~8月,在宁夏医科大学总医院生殖医学中心就诊的患者中,选取体外受精-胚胎移植(IVFET)或卵胞质内单精子注射(ICSI)两种助孕方式治疗的15例患者为研究对象。取分离纯化的卵巢颗粒细胞,经原代培养48h后分组:激活素A组添加50μg/ml的激活素A,Bimagrumab组添加5μM选择性ActRⅡ抑制剂Bimagrumab,混合组同时添加50μg/ml的激活素A与20μM的Bimagrumab,再继续培养24h。采用Western印迹法检测蛋白表达水平,逆转录及实时PCR检测mRNA表达水平,细胞免疫荧光化学检测蛋白定位。采用单因素方差分析、t检验进行统计学分析。结果 激活素A组中ActRⅡ、p-Smad2/Smad2蛋白表达水平均高于空白对照组,Bimagrumab组中ActRⅡ和p-Smad2/Smad2蛋白表达水平低于空白对照组,差异有统计学意义(P<0.05),提示Bimagrumab对ActRⅡ有抑制效果,激活素A对ActRⅡ有促进效果。混合组中CYP19A1蛋白表达低于空白对照组,激活素A组中CYP19A1蛋白表达水平高于空白对照组;差异有统计学意义(P<0.05)。激活素A组中Smad2和CYP19A1mRNA表达水平高于空白对照组,混合组中Smad2和CYP19A1mRNA表达水平低于空白对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。细胞免疫化学染色显示,Smad2和CYP19A1存在于卵巢颗粒细胞中,Smad2阳性染色定位于细胞胞浆,CYP19A1阳性染色定位于细胞胞浆和细胞膜。结论 颗粒细胞分泌因子激活素A激活ActRⅡ信号通路,增加p-Smad2/Smad2和CYP19A1的表达水平,进一步促进颗粒细胞增殖和分化。

柴油机风冷中冷器的优化设计与匹配研究

针对重型柴油机用风冷式中冷器冷却能力不足,发动机进气温度偏高的问题,利用Pro/E软件建立中冷器内部波纹翅片的的三维模型,基于CFD仿真方法分析了翅片的结构参数对工作性能的敏感性,得到了不同厚度下的翅片换热效率和冷却空气的沿程阻力。仿真结果表明:波纹角的敏感性最强,换热效率在流道厚度为25mm处达到最大值。为了验证优化后的中冷器对发动机进气的冷却性能,在重型柴油机上进行试验测试,试验结果表明中冷器的冷却效果得到明显改善,内部空气的压降满足国标要求。

MC模拟环境级X/γ测量仪能量补偿

基于MC模拟方法,对基于Nal(Tl)闪烁体的环境级X/γ测量仪,进行了能量补偿结构设计和制作,进而对能量补偿层的能量补偿性能进行了实验验证。模拟计算与实验结果的对比表明:经过能量补偿后,测量仪的能量响应性能符合标准要求。

低位高抽巷瓦斯抽排设计与施工

基于高瓦斯工作面底板预抽巷工程量大、投资成本高、工作面衔接紧张等问题,以阳煤集团寺家庄矿15118工作面回风巷瓦斯治理为例,介绍了低位高抽巷的层位布置及巷内钻孔设计与抽排施工工艺。通过抽排效果对比分析,得出可在与工作面回风巷水平距离3~5 m、巷道层间距5~7 m位置随层施工低位高抽巷,巷内采用普通钻孔与造穴孔相结合的钻孔工艺,瓦斯抽放效果显著。单孔抽排量1372.66 m^3/d,与同等条件下底抽巷相比,瓦斯抽采浓度由58%提高至67%;造穴钻孔单孔抽采浓度为61.5%,相对常规钻孔组提高了8.6%。低位高抽巷瓦斯抽排设计与施工优化了瓦斯抽排巷布局,有效解决了工作面回采期间回风流及上隅角瓦斯浓度超限问题。

Benefits of Pasture Construction for Comprehensive Agricultural Development in Duolun Agro-pasturage Ecotone of Inner Mongolia

The agro-pasturage ecotone in northern China is not only an important green ecosystem barrier but also an important economic belt. However, the extensive operation manner and harsh natural surroundings lead to the grassland degradation, low agricultural productivity and people living in poverty. In our study, the result has shown that the aboveground biomass and economic benefits of improved grassland, artificial perennial grassland and silage farmland have been increased greatly. Therefore, the development and construction of high-yield silage farmland and artificial perennial grassland in agro-pasturage ecotone not only increase the economic benefits but also protect the ecological environment.

重型柴油机机油冷却模块传热性能研究

针对重型柴油机机油冷却模块散热效率较低影响发动机工作性能的问题,基于板翅式散热器换热机理,采用遗传算法和数值仿真技术对某款柴油机用水冷机油冷却器进行了参数优化和性能仿真预测,得到了冷却器温度场分布的可视化结果。对机油冷却器进行了台架试验测试,表明机油冷却模块的换热效果得到明显改善,能够满足发动机润滑系统的温度要求。

犬N1ICD基因的克隆与真核表达

本研究利用RT-PCR扩增比格犬Notch1基因的胞内域（notch1 Intracellular domain of Notch,N1ICD）,将其克隆到真核表达载体中,在293T细胞中表达,进一步鉴定其分子生物学特征。结果,首次克隆获得犬N1ICD基因,序列长度为2 469 bp,编码822个氨基酸,蛋白质分子质量为87.3 ku。序列分析结果显示,核酸序列与大鼠、马、牛、黑猩猩、绵羊、小鼠、猕猴、人的相似性分别为83.0%、87.9%、86.8%、86.4%、87.4%、83.2%、86.5%、86.3%,进化上与马的关系最近;氨基酸序列与大鼠、马、牛、黑猩猩、绵羊、小鼠、猕猴、人的相似性分别为87.8%、91.5%、89.9%、88.5%、90.9%、87.8%、89.2%、88.7%,进化上同样与马的关系最近。预测的二级结构可能存在63个α-螺旋、65个β-折叠、48个无规则卷曲。本试验成功构建了p3×FLAG-CMV10-N1ICD真核表达载体,为进一步研究犬N1ICD与犬乳腺肿瘤之间的作用奠定了基础。

逍遥散对慢性应激大鼠Gabra4基因表达的影响

目的通过中药复方逍遥散干预慢性应激损伤模型大鼠,对大鼠海马组织Gabra4基因表达进行检测,验证前期全基因组表达谱芯片实验结果的同时进一步丰富逍遥散的功效内涵。方法将雄性Wistar大鼠30只随机分为空白对照组、慢性应激模型组和逍遥散治疗组3个组,每组10只。采用多相慢性应激大鼠模型造模方法对空白对照组外的两组实验大鼠进行造模,其中逍遥散治疗组每天在进行应激原刺激后给予逍遥散水煎剂2 ml(含2g生药/mL)灌胃,连续造模21天。采用RT-PCR及免疫组织化学染色法测定各组大鼠海马组织中Gabra4基因mRNA及其蛋白表达情况。结果慢性应激大鼠海马组织中Gabra4基因的mRNA及其相应蛋白表达较空白对照组显著上调(均为P≤0.01),逍遥散治疗能够明显降低该基因在海马组织中的表达(与慢性应激模型组比较P≤0.01)。结论 Gabra4基因表达的显著改变可能与慢性应激引起抑郁和/或焦虑的症状有关,同时也是慢性应激引起海马区神经突触可塑性变化以及学习记忆功能损伤的可能靶点之一。逍遥散可能通过下调Gabra4基因表达参与调节慢性应激对大鼠海马组织的造成的损伤,从而发挥疏肝解郁的作用。

二甲双胍改善多囊卵巢综合征并激活雌性生殖干细胞

多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)是生育年龄妇女常见的一种复杂的内分泌及代谢异常所致的疾病,是女性不孕的重要因素。二甲双胍是临床应用最广泛的经典口服降糖药物,近年来被应用于PCOS治疗,但其作用机制尚不明确。本研究通过建立小鼠PCOS模型,论证二甲双胍对PCOS的改善作用及其机制。4~5周龄雌性C57BL/6J小鼠连续21天给予来曲唑(每天灌胃1 mg/kg)联合高脂饮食,建立PCOS模型。成模后灌胃给予二甲双胍(每天200 mg/kg),1个月后取材,期间检测体重并进行糖耐量试验。取材后行苏木素-伊红(H&E)染色检测卵巢病理改变;ELISA法测定血清中抗缪勒氏管激素(anti-Mullerian hormone,AMH)、卵泡刺激素(follicle-stimulating hormone,FSH)、黄体生成素(luteinizing hormone,LH)、雌二醇(E_(2))、睾酮等激素水平;免疫组织化学及免疫荧光染色法检测雌性生殖干细胞(female germline stem cells,FGSCs)标志物DDX4/MVH及PCNA表达及定位;Western blot检测小鼠卵巢中DDX4/MVH、PCNA、cyclin D2以及AMPK/mTOR通路蛋白。结果显示,PCOS小鼠在接受二甲双胍治疗后,体重逐渐恢复正常,糖耐量试验显示糖耐量明显改善,血清E 2水平升高,AMH、LH、睾酮水平及LH/FSH比值下降,卵巢多囊病变减轻,闭锁卵泡减少,且具有增殖性的FGSCs数目明显增多,卵巢组织PCNA、cyclin D2等增殖相关蛋白增加,p-mTOR、p-AMPK等蛋白明显上调。以上结果提示,二甲双胍在改善PCOS高雄激素血症、糖耐量异常及卵巢多囊病变的同时,还可以促进FGSCs增殖并激活其功能,其作用可能与AMPK、mTOR磷酸化有关。这些发现为二甲双胍治疗PCOS以及改善卵泡发育提供了新的科学依据和方向。

温中补肾方对多囊卵巢综合征改善作用及对雌性生殖干细胞增殖的影响

目的:探究温中补肾方对多囊卵巢综合征(PCOS)的改善作用及机制。方法:4~6周龄C57BL/6J雌性小鼠,连续灌胃来曲唑联合高脂饲料喂养,建立PCOS模型。成模后给予不同剂量的温中补肾方,期间测体质量及糖耐量试验(OGTT)等。取材后ELISA检测睾酮(T)等激素水平;HE染色检测卵巢形态改变;免疫组化法检测MVH、AMH蛋白表达;免疫荧光法共染雌性生殖干细胞(FGSCs)标志物;Western Blot法检测卵巢组织中MVH、PCNA、p-mTOR、p-AMPK等蛋白。结果:与PCOS模型组比较,温中补肾方干预后,PCOS小鼠体质量、OGTT及T等水平显著改善(P<0.05,P<0.01),卵巢多囊病变减轻,具有增殖性的FGSCs数目显著增多(P<0.05),p-mTOR、p-AMPK显著上调(P<0.01,P<0.05)。结论:温中补肾方不仅可以改善PCOS糖脂代谢异常及卵巢多囊病变,还可以激活FGSCs增殖并激活其功能,其作用可能与AMPK、mTOR磷酸化有关。