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基于TaqMan-MGB探针的虾肝肠胞虫荧光定量PCR检测方法 被引量:5
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作者 马来 童桂香 +5 位作者 韦信贤 曾德乾 熊建华 王瑞 黄光华 江林源 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2020年第6期1319-1326,共8页
【目的】基于TaqMan-MGB探针建立虾肝肠胞虫(EHP)荧光定量PCR检测方法,为EHP的快速定量检测及实时监测提供技术手段。【方法】以EHP的SSU rDNA基因为检测靶基因,在其保守区设计特异性的扩增引物和TaqMan-MGB探针,将PCR扩增目标片段克隆... 【目的】基于TaqMan-MGB探针建立虾肝肠胞虫(EHP)荧光定量PCR检测方法,为EHP的快速定量检测及实时监测提供技术手段。【方法】以EHP的SSU rDNA基因为检测靶基因,在其保守区设计特异性的扩增引物和TaqMan-MGB探针,将PCR扩增目标片段克隆至pMD18-T载体构建重组质粒pMD18-T-SSU^EHP(标准品),以标准品DNA为模板优化反应体系,建立检测EHP的TaqMan-MGB探针荧光定量PCR;以10倍梯度稀释的标准品DNA为模板构建扩增标准曲线,并进行特异性、敏感性、重复性及临床应用试验。【结果】制备的重组质粒pMD18-T-SSU^EHP DNA稳定性好,可满足作为标准品和阳性对照的要求;标准品(pMD18-T-SSU^EHP)起始模板范围为2.0×10^1~2.0×10^9拷贝/反应时,建立的标准曲线线性关系良好,对应的线性回归方程为y=-3.232×lg(x)+39.51。基于TaqMan-MGB探针建立的EHP荧光定量PCR对标准品的检测灵敏度可达20拷贝/反应,对临床虾样品EHP的检测灵敏度约10拷贝/mg,较农业农村部推荐的套式PCR约提高10倍;对虾类其他常见病原均无扩增反应,其组内和组间变异系数分别为0.26%~0.72%和0.56%~0.92%,整个检测过程可在1 h内完成。采用建立的TaqMan-MGB探针荧光定量PCR与套式PCR同时对276份临床虾样品进行检测比较,发现两种方法的符合率为96.7%,检测低拷贝数虾样品时前者具有更高的灵敏度;2018和2019年广西虾样品的EHP阳性检出率分别为16.2%和30.6%。【结论】基于TaqMan-MGB探针建立的EHP荧光定量PCR检测方法具有特异性强、灵敏度高、重复性好、定量范围宽及简单快速等优点,适用于虾类样品的EHP定量检测,可为EHP实时监测及EHPD快速诊断提供一种新的技术手段。 展开更多
关键词 虾肝肠胞虫 SSU rDNA基因 TAQMAN-MGB探针 荧光定量PCR
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改良弹力绷带绑法对脑卒中偏瘫患者下肢运动功能的影响
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作者 张丽瑾 马赉 金建平 《上海医药》 CAS 2021年第8期59-62,共4页
目的 :观察改良弹力绷带绑法对脑卒中偏瘫患者下肢运动功能的影响。方法 :选取2017-2019年接康复治疗的120例脑卒中偏瘫患者分为对照组及观察组,各60例。对照组患者接受常规步态训练,1次/d,40 min/次。观察组患者在接受常规步态训练的... 目的 :观察改良弹力绷带绑法对脑卒中偏瘫患者下肢运动功能的影响。方法 :选取2017-2019年接康复治疗的120例脑卒中偏瘫患者分为对照组及观察组,各60例。对照组患者接受常规步态训练,1次/d,40 min/次。观察组患者在接受常规步态训练的同时佩戴改良弹力绷带绑法,疗程为60 d。比较两组患者的FMA评分、MAS评分、步速和步行距离。结果 :治疗后两组MAS评分较治疗前降低,FMA评分、步速、步行距离均高于治疗前,且观察组疗效明显优于对照组,差异均有统计学意义(P <0.01)。结论 :采用改良弹力绷带绑法能有效改善脑卒中偏瘫患者下肢运动功能。 展开更多
关键词 脑卒中 偏瘫 改良弹力绷带绑法 下肢运动功能
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Identification of Species in Genus Platycephalus from Seas of China 被引量:1
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作者 CHEN Zhi SONG Na +3 位作者 ZOU Jianwei QIN Yan ma lai GAO Tianxiang 《Journal of Ocean University of China》 SCIE CAS CSCD 2020年第2期417-427,共11页
Platycephalus in Chinese sea area has a high commercial value.However,there were mis-identifications in previous records.In this study,we fully distinguished and diagnosed all five species,Platycephalus indicus,P.cult... Platycephalus in Chinese sea area has a high commercial value.However,there were mis-identifications in previous records.In this study,we fully distinguished and diagnosed all five species,Platycephalus indicus,P.cultellatus,Platycephalus sp.,Platycephalus sp.1 and Platycephalus sp.2.The results revealed that P.cultellatus was overlooked by previous ichthyologists.Platycephalus sp.1 was misidentified as P.indicus in reality,and Platycephalus sp.2 only existed in the seas of Japan.Furthermore,morphological,especially phylogenetic analysis indicated that Platycephalus sp.from South China Sea differs from all former known species,which might be a new species.We identified all Platycephalus species in China seas for the first time,which will contribute to local species identification,biodiversity conservation and sustainable exploitation of Platycephalus species. 展开更多
关键词 Platycephalus seas of China new species TAXONOMY PHYLOGENETICS
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