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以色列急性麻痹病毒(IAPV)的特性及入侵受体的研究进展
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作者 金红梅 袁春颖 +4 位作者 邹德馨 马鸣潇 侯春生 郭利桃 邓炎春 《环境昆虫学报》 CSCD 北大核心 2024年第4期830-836,共7页
以色列急性麻痹病毒(Israeli acute paralysis virus,IAPV)是一种严重危害蜜蜂健康的病毒,其感染特性主要表现为较强的传染性和致病性。IAPV能感染多种宿主,不仅能感染蜜蜂,还能感染熊蜂、无刺蜂、胡蜂和蚂蚁等昆虫以及狄斯瓦螨Varroa d... 以色列急性麻痹病毒(Israeli acute paralysis virus,IAPV)是一种严重危害蜜蜂健康的病毒,其感染特性主要表现为较强的传染性和致病性。IAPV能感染多种宿主,不仅能感染蜜蜂,还能感染熊蜂、无刺蜂、胡蜂和蚂蚁等昆虫以及狄斯瓦螨Varroa destructor。受体是决定其宿主范围和嗜性组织的重要因素,病毒入侵过程中关键的一步就是与受体蛋白结合,但迄今为止,国内外针对蜜蜂病毒的受体研究较为匮乏,尚无该病毒受体报道。NPC(NPC intracellular cholesterol transporter),一种细胞内转运胆固醇的蛋白,是多种昆虫病毒的胞内受体,在病毒感染中扮演着关键的角色。之前研究表明,该蛋白可能与蜜蜂病毒的感染过程有关。本文综述了IAPV的特性和可能的入侵受体,包括病毒分子结构特征、流行与传播、宿主范围以及感染机制,以期深入认识IAPV的发病机制。 展开更多
关键词 蜜蜂 IAPV 病毒受体 NPC蛋白
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PCV-2和PCV-3 Cap蛋白在昆虫细胞-杆状病毒系统中的表达和鉴定
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作者 董宇璠 金宏凯 +4 位作者 孙莉 费东亮 马跃宇 马鸣潇 李明 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2023年第6期55-59,共5页
为了实现猪圆环病毒2型(PCV-2)和3型(PCV-3)Cap蛋白在昆虫细胞-杆状病毒系统中表达,本试验利用刚性连接肽连接PCV-2和PCV-3 Cap基因,构建杆状病毒转移载体pFastBac-PCV-2-3-Cap,双酶切验证正确后,将其转化至大肠杆菌DH10Bac感受态细胞,... 为了实现猪圆环病毒2型(PCV-2)和3型(PCV-3)Cap蛋白在昆虫细胞-杆状病毒系统中表达,本试验利用刚性连接肽连接PCV-2和PCV-3 Cap基因,构建杆状病毒转移载体pFastBac-PCV-2-3-Cap,双酶切验证正确后,将其转化至大肠杆菌DH10Bac感受态细胞,经蓝白斑筛选和PCR鉴定,获得重组杆粒。将重组杆粒转染SF9细胞(昆虫卵巢细胞),盲传3代,获得重组病毒。将重组病毒接种SF9细胞96 h后,通过细胞免疫荧光检测、Western blot和电镜观察对其进行验证,并利用噬斑法检测其效价。结果显示:成功构建重组质粒pFastBac-PCV-2-3-Cap,获得了重组杆粒rAcBacmid-PCV-2-3-Cap,并制备出重组杆状病毒rvAc-PCV-2-3-Cap。重组病毒感染SF9细胞后,目的蛋白成功表达,并可以形成病毒样颗粒,病毒效价为3.41×10^(6) PFU/mL。本试验成功在昆虫细胞-杆状病毒系统中共表达了PCV-2-3-Cap,为防治PCV-2和PCV-3混合感染的二联疫苗研究提供了数据支持。 展开更多
关键词 PCV-2 PCV-3 重组质粒 杆状病毒 真核表达
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中华蜜蜂幼虫膜蛋白酵母双杂交文库的构建 被引量:2
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作者 孙莉 岳金金 +3 位作者 费东亮 李明 马鸣潇 宋铭忻 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期572-577,共6页
【目的】本研究旨在利用位点特异性重组技术(FullCoV)将中华蜜蜂 Apis cerana cerana 幼虫膜蛋白cDNA连接到pPR3-N载体上,构建中华蜜蜂幼虫膜蛋白酵母双杂交cDNA文库。【方法】提取2-3日龄中华蜜蜂工蜂幼虫总RNA;分离mRNA后,在反转录酶... 【目的】本研究旨在利用位点特异性重组技术(FullCoV)将中华蜜蜂 Apis cerana cerana 幼虫膜蛋白cDNA连接到pPR3-N载体上,构建中华蜜蜂幼虫膜蛋白酵母双杂交cDNA文库。【方法】提取2-3日龄中华蜜蜂工蜂幼虫总RNA;分离mRNA后,在反转录酶的作用下合成幼虫膜蛋白cDNA第1链,并合成双链cDNA。在双链cDNA的5′端加上带有重组序列的接头后,通过FullCoV技术与载体pPR3-N进行连接,然后将连接产物电转化到DH10B感受态细胞,构建中华蜜蜂幼虫膜蛋白酵母双杂交cDNA文库,并对该文库插入片段大小和文库滴度进行检测。【结果】通过FullCoV技术成功构建了中华蜜蜂幼虫膜蛋白酵母双杂交cDNA文库,经检测,中华蜜蜂幼虫膜蛋白酵母cDNA文库的总库容量为1.5×10^7 cfu,文库滴度为3×10^6 cfu/mL,重组率达到100%。【结论】本研究利用FullCoV技术成功构建了中华蜜蜂幼虫膜蛋白酵母cDNA文库,为进一步探究感染中华蜜蜂的病原微生物与宿主蛋白互作研究奠定了基础。 展开更多
关键词 中华蜜蜂 cDNA 文库 滴度 酵母双杂交 FullCoV技术 蛋白质相互作用
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基于QFD/TRIZ集成理论的便携式食用菌装袋机创新设计 被引量:3
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作者 展鑫 李稼鑫 +4 位作者 韩心雨 马明潇 徐海洋 王秀红 韩光平 《价值工程》 2020年第6期297-298,F0003,共3页
针对目前市场上的食用菌装袋机存在体积大、费用高、运输困难等问题,运用QFD/TRIZ集成理论,设计了一种便携式、自动化的食用菌装袋机,首先对目前食用菌装袋机进行用户需求的分析,确定了故障率、使用寿命、产品噪音、产品大小、价位合理... 针对目前市场上的食用菌装袋机存在体积大、费用高、运输困难等问题,运用QFD/TRIZ集成理论,设计了一种便携式、自动化的食用菌装袋机,首先对目前食用菌装袋机进行用户需求的分析,确定了故障率、使用寿命、产品噪音、产品大小、价位合理、生产浪费、运输便利、占用空间、操作简单、安全可靠十个重要功能指标。质量屋将用户需求转化为产品设计的技术参数,发现三对技术矛盾分别为承受载荷量与耐久性,承受载荷量越大,耐久性越短;承受载荷量与外观设计规划,承受载荷量越大,外观设计越难;承受载荷量与可拆卸性,承受载荷量越大,可拆卸性越小。然后运用TRIZ理论对食用菌装袋机进行了一种创新设计。食用菌装袋机具备性价比高、体积小的特点。 展开更多
关键词 QFD TRIZ 便携式装袋机 食用菌
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Molecular Design and Immunogenicity of a Multiple-epitope FMDV Antigen and DNA Vaccination 被引量:1
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作者 ma ming-xiao JIN Ning-yi +10 位作者 LIU Hui-juan ZHENG Mini YIN Ge-fen TIAN Ming-yao JIN Ming-lan LU Hui-jun SHEN Guo-shun ZHU Guang-ze JIN Hong-tao JIN Kuo-shi ZHANG Ying-jiu 《Chemical Research in Chinese Universities》 SCIE CAS CSCD 2008年第1期69-74,共6页
This article reports the design and construction of a multiple-epitope foot and mouth disease virus (FMDV) antigen, designated as OAAT. This recombinant antigen consists of the structural protein VP1 genes from sero... This article reports the design and construction of a multiple-epitope foot and mouth disease virus (FMDV) antigen, designated as OAAT. This recombinant antigen consists of the structural protein VP1 genes from serotypes A and O FMDV, five major VP1 immunodominant epitopes from two genotypes of Asial serotype, and three Th2 epitopes originating from the nonstructural protein, three ABC gene and structural protein VP4 gene. Expressions of target gene from these plasmids in HeLa cells were verified by Western-blot. BALB/c mice were immunized intramuscularly with the DNA vaccines thrice every two weeks. We found that pA could induce simultaneously specific antibodies against serotypes A, Asial, and O FMDV. Compared to those of the controls, the spots of FMDV-specific IFN-7 and cytotoxic activity from mice immunized with pA were significantly increased, pA provided full protection in 2/4 guinea pigs from challenge with FMDV O/NY00 and Asial/YNBS/58, respectively. The results show that although pA did not give full protection in 100% immunized guinea pigs from challenge with type O and Asial FMDV, respectively, OAAT may be potential immunogen against FMDV and pA may be potential DNA vaccines against FMDV. 展开更多
关键词 Multiple-epitope Foot and mouth disease virus DNA vaccine
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基于系统动力学的宏观调控政策对房地产价格影响研究 被引量:3
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作者 马明霄 何元斌 《特区经济》 2020年第3期89-94,共6页
本文主要分析上海、重庆和武汉三个城市,将其商品住宅价格系统分人口、供应、需求、GDP和土地价格五个子系统,通过绘制存量流量图和因果回路图分析住宅系统与影响因素之间的关系,并通过调控税率、贷款利率及土地价格增长率等指标来进行... 本文主要分析上海、重庆和武汉三个城市,将其商品住宅价格系统分人口、供应、需求、GDP和土地价格五个子系统,通过绘制存量流量图和因果回路图分析住宅系统与影响因素之间的关系,并通过调控税率、贷款利率及土地价格增长率等指标来进行单指标和多指标的政策性实验。结果表明:相同的调控政策应用于不同经济水平的城市效果不同;调整贷款利率对商品住宅价格影响较小,土地价格及税率对商品住宅价格影响更为显著。综合调控优于单一调控,政府部门可以同时进行综合调控稳定房价。 展开更多
关键词 商品住宅价格 系统动力学 仿真 政策实验
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小鼠肝炎病毒逆转录-重组酶聚合酶扩增检测方法的建立、验证及应用 被引量:3
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作者 闫雪 李明 +5 位作者 张旭 张振 王霄 马跃宇 马鸣潇 费东亮 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期729-733,共5页
目的建立小鼠肝炎病毒(mouse hepatitis virus,MHV)的逆转录-重组酶聚合酶扩增(reverse-trancription recombinase ploymerase amplification,RT-RPA)检测方法。方法以GenBank中登录的MHV-FJ株(FJ6647223)M基因保守区段(82~317 bp)为靶... 目的建立小鼠肝炎病毒(mouse hepatitis virus,MHV)的逆转录-重组酶聚合酶扩增(reverse-trancription recombinase ploymerase amplification,RT-RPA)检测方法。方法以GenBank中登录的MHV-FJ株(FJ6647223)M基因保守区段(82~317 bp)为靶基因,设计合成6对RPA扩增引物(M-MHV-1~6),筛选1对最适引物,同时优化反应温度(31、33、35、37、39、41℃)和时间(20、25、30、35 min),并验证该方法的特异性和敏感性。采用优化方法检测32份野生田鼠肝脏组织样本,并与RT-PCR法检测结果进行对比。结果筛选最适引物为M-MHV-2,最适反应温度和时间分别为37℃和30 min。该方法的检测下限为4.75×10;copies/μL,对鼠肺炎病毒(Pneumonia virus of mice,PVM)、仙台病毒(Sendai virus,SV)、汉坦病毒(Hantaan virus,HV)、鼠细小病毒(minute virus of mice,MVM)、呼肠弧病毒Ⅲ型(reovirus typeⅢ,ReoⅢ)无交叉反应。32份野生田鼠肝脏组织样本中,检测出阳性样本1份,检出率为3.13%(1/32),与RT-PCR检测结果一致。结论建立了MHV的RT-RPA检测方法,该方法的特异性及灵敏性良好,且具有反应迅速、操作简单等优点。本研究为MHV快速检测方法的进一步研发奠定了基础。 展开更多
关键词 小鼠肝炎病毒 重组酶聚合酶 优化 验证
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橘络药材质量标准研究 被引量:6
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作者 郝自新 汪玉萍 +3 位作者 马鸣晓 王和协 杨积慧 程世云 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期1061-1065,共5页
目的:完善橘络的质量标准,提高其质量控制水平。方法:依据《中华人民共和国药典》2015年版四部相关方法,对橘络药材的水分、总灰分和醇溶性浸出物进行测定。以硅胶G板为薄层板,以三氯甲烷-甲醇-水(3∶1∶0.1)为展开剂,以橙皮苷对照品为... 目的:完善橘络的质量标准,提高其质量控制水平。方法:依据《中华人民共和国药典》2015年版四部相关方法,对橘络药材的水分、总灰分和醇溶性浸出物进行测定。以硅胶G板为薄层板,以三氯甲烷-甲醇-水(3∶1∶0.1)为展开剂,以橙皮苷对照品为对照,喷以1%三氯化铝乙醇溶液,紫外光灯365 nm下检视,建立薄层色谱鉴别方法。采用HPLC法建立了橙皮苷的含量测定方法。采用C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈-0.2%磷酸溶液(20∶80),流速1.0 m L·min^(-1),检测波长283 nm,柱温30℃。结果:薄层色谱特征斑点清晰。橙皮苷点样量在0.246~2.46μg范围线性关系良好,线性回归方程为Y=1.925×106X-99.72(r=0.999 9,n=6),平均加样回收率为100.2%(RSD=0.90%,n=6);10批橘络的水分为12.1%~13.6%,总灰分为3.1%~4.7%,醇溶性浸出物为13.0%~24.6%,橙皮苷含量为6.71%~11.37%。建议规定橘络的水分限度≤16.0%,总灰分限度≤5.0%,醇溶性浸出物限度≥13.0%,以干燥品计,橙皮苷的含量≥6.0%。结论:建立的橘络质量控制方法可很好地控制其质量。 展开更多
关键词 橘络 橙皮苷 药材标准 薄层色谱鉴别 高效液相色谱 含量测定
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