NLRP3炎症小体和NF-κB信号通路参与化脓隐秘杆菌感染小鼠肝脏炎症反应的研究

为探究化脓隐秘杆菌(Trueperella pyogenes)在肝脏中诱导炎症小体活化的机制,本研究以2×106 cfu/只腹腔注射化脓隐秘杆菌的小鼠为感染模型,分别于感染后不同时间采集小鼠肝脏组织,分别提取肝细胞RNA和蛋白质,将RNA反转录成cDNA作为模板,利用荧光定量PCR检测小鼠肝脏组织中NLRP-3、ASC、IL-18、IL-1β和TNF-αm RNA的转录水平,同时通过western blot检测小鼠肝细胞中炎症小体信号通路蛋白NLRP-3、AIM2、ASC、Caspase-1、NLRP-1和细胞焦亡信号通路相关蛋白GSDMD-C、IL-18和IL-1β的表达。结果显示,与对照组相比,感染化脓隐秘杆菌后1 d、2 d和7 d的小鼠肝组织内炎症小体信号通路蛋白基因及促炎细胞因子基因的转录水平均显著升高(P<0.05);western blot检测感染后1 d、2 d、4 d和7 d的小鼠肝细胞蛋白,结果显示,与对照组相比,小鼠肝细胞内除NLRP-1的表达无差异外,其他炎症小体信号通路相关蛋白及促炎细胞因子表达量均显著或极显著升高(P<0.05,P<0.01)。上述结果证实化脓隐秘杆菌可诱导肝细胞中NLRP-3/ASC和AIM2/ASC炎症小体复合物的激活,继而促进Caspase-1的成熟与GSDMD的切割,引起肝细胞焦亡,导致大量促炎细胞因子释放。本研究进一步通过western blot检测化脓隐秘杆菌感染后1 d、2 d、4 d和7 d的小鼠肝细胞中NF-κB信号通路中p65和磷酸化p65蛋白(p-p65)的表达水平,结果显示,与对照组相比,p-p65蛋白的表达量显著升高(P<0.05),表明NF-κB信号通路被激活。同时,本研究也对化脓隐秘杆菌感染小鼠后1 d、2 d、4 d和7 d采集的肝脏组织进行病理学观察,结果显示,与对照组织相比,肝细胞均发生变性及坏死。本研究证实在化脓隐秘杆菌感染的小鼠肝细胞内炎症小体和NF-κB信号通路参与了感染期间的炎症反应,为化脓隐秘杆菌引起肝脏炎症反应发生的机制研究提供参考依据。

炎症在化脓隐秘杆菌引起的支气管上皮细胞损伤中起关键作用

化脓隐秘杆菌是一种革兰氏阳性、不运动、无孢子、短的棒状或球状的细菌,可单独、成对或成群出现。在世界范围内,化脓隐秘杆菌经常从家畜和野生动物的化脓性疾病如肺炎、心内膜炎、胸膜炎的炎性产物和器官脓肿物中分离到。它在家畜的二次感染和混合感染中也起重要的作用。关于化脓隐秘杆菌对小鼠、猪精密肺组织切片及猪支气管上皮细胞的致病性及致病机制的研究少有报道。

非洲猪瘟暴发前后我国猪繁殖与呼吸综合征病毒的流行变化

为了研究非洲猪瘟(ASF)暴发后我国猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的流行变化,本研究经PCR检测了2017年1月~2020年12月全国18个省、市和自治区1374份疑似PRRSV感染的病料样品,并对其中阳性病料样品的ORF5、nsp2基因测序并统计阳性样品的检出率,分析不同地区在ASF暴发前后PRRSV阳性检出率的变化趋势;分别利用GraphPad Prism 8.0及ORF5基因的进化树分析ASF暴发前后我国各亚型PPRSV及各地区PPRSV的流行变化趋势;根据nsp2基因推导氨基酸序列分析其缺失特征。ORF5基因和nsp2基因测序及统计分析结果显示,共检出PRRSV阳性病料样品779份(779/1374),其中ASF暴发前397份,ASF暴发后382份。ASF暴发后(2019年~2020年)我国各地PRRSV阳性检出率均有上升,华北地区PRRSV阳性检出率由60.47%上升至66.33%;东北地区由52.76%上升至53.27%;华东地区由60.93%上升至62.59%;中南地区由53.43%上升至57.50%。ASF暴发前后我国各亚型及各地区PPRSV流行变化趋势统计分析结果显示,ASF暴发后,NADC30-like PRRSV作为主要流行株,其检出率显著增长,从47.36%上升至65.97%;NADC34-like PRRSV的检出率也明显增长,从1.76%上升至5.50%;但HP-PRRSV、VR2332-like PRRSV和QYYZ-like PRRSV的检出率明显降低,分别从34.01%降至20.68%、6.80%降至3.40%、7.30%降至0.52%。可见ASF暴发后,我国大部分地区(华北、东北、华东、中南)NADC30-like PRRSV的流行趋势有所上升,但HP-PRRSV的流行趋势明显下降,并且随着ASF的流行,除中南地区外,我国各地NADC34-like PRRSV检出率明显上升。ORF5基因的遗传演化分析结果显示,ASF暴发前(2017年~2018年)检测到6种基因亚型的PRRSV(NADC30-like PRRSV、HP-PRRSV、NADC34-like PRRSV、VR2332-like PRRSV、QYYZ-like PRRSV、Type I PRRSV),而ASF暴发后还检测到CH-1a like PRRSV。Nsp2氨基酸缺失特征分析结果显示,ASF暴发前后我国各亚型PRRSV Nsp2氨基酸序列特征均未发生变化。以上结果表明,ASF疫情的暴发对我国PRRSV的流行造成了较大影响,国内大部分地区PRRSV的流行加重,病毒亚型也变得更加多元化,NADC30-like PRRSV作为主要流行株在国内大部分地区的流行趋势不断升高,HP-PRRSV检出率虽有降低但仍在流行,NADC34-like PRRSV作为潜在流行株,其检出率不断上升。本研究聚焦在ASF暴发前后国内PRRSV的流行变化,对了解我国PRRSV流行现状及对PRRS的防控具有重要的指导意义。

基于中国知网2011-2020年中文期刊木材学论文的文献计量分析

基于中国知网2011-2020年数据,采用文献计量学方法分析2889篇木材学(S781)类中文期刊论文的题目、作者、研究机构、关键词、发表年份、发表期刊、被引频次、下载频次、国家自然科学基金资助情况和高被引论文情况。结果表明:木材学类中文论文产出量较少,篇均被引频次4.25次,篇均下载频次127.83次,主要作者和机构呈现明显的集中性。呼吁科研机构和科技管理部门携手共同加强学科建设,促进木材学的繁荣和专业期刊的发展。

猪繁殖与呼吸综合征病毒在猪肺组织精细切片中感染特性的研究

为研究猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)在猪肺脏组织中的感染特性,本研究建立了高度分化的猪呼吸系统体外培养模型-猪肺组织精细切片(PCLS)。该培养体系包含肺脏组织中多种相关细胞并能够体现出肺脏组织的生理结构和生物学功能。本研究针对制备的猪PCLS进行生物学活性的鉴定,利用评估支气管上皮细胞纤毛摆动百分比的方法检测支气管上皮细胞纤毛活性,结果显示猪PCLS制备良好,在制备10 d以后仍保持95%以上的纤毛活性;利用活/死细胞染色法测定制备的猪PCLS体外培养后活细胞的比例,结果显示制备的猪PCLS在体外培养7 d后支气管上皮细胞和肺泡细胞仍为活细胞;利用间接免疫荧光试验测定猪PCLS中上皮细胞、杯状细胞和肺泡巨噬细胞(PAM)的完整性与分布情况,结果显示制备的猪PCLS上皮细胞和杯状细胞保存完整且猪PCLS中包含丰富的PAM。利用6株不同PRRSV分离株(HuN4、XD-15、WK-34、WK-38、LCL-75和DL-1510)以2.5×105TCID50/片的剂量感染猪PCLS,检测不同PRRSV分离株在猪PCLS中的感染特性,结果表明不同PRRSV分离株在该培养体系中表现出不同的增殖能力。本研究表明猪PCLS可用于PRRSV的体外感染试验。本研究为PRRSV的体外研究提供了新的模型与方法,同时也为其它猪呼吸道病原体提供了新的研究平台。

猪链球菌与猪流感病毒混合感染促进溶血素基因缺失型链球菌侵入呼吸道分子机制的研究

猪链球菌在世界范围内广泛存在,是危害养猪业发展的重要传染源之一,能够引起猪脑膜炎、关节炎、肺炎、心内膜炎、流产以及仔猪的突然死亡。溶血素(SLY)是猪链球菌分泌的唯一能够引起细胞毒性的可溶性蛋白,它能在宿主细胞膜上打孔引起细胞崩解。然而,不是所有的猪链球菌致病株均分泌SLY蛋白。