岭南刺络放血疗法在特应性皮炎中的应用

岭南刺络放血疗法是岭南针灸流派的重要组成部分,由陈全新教授结合多年临床经验所创,在治疗特应性皮炎方面有其独特的优势。其秉承“阴阳互济,通调和畅”的思想,将辨病、辨证、辨经络相合,以治血为主,补虚泻实,以快速旋转法进针,强调操作的无痛与无菌,在治疗特应性皮炎方面具有较好的指导借鉴意义。

特应性皮炎脾虚湿蕴证患者的皮损表现特征分析

目的通过数据挖掘及临床横断面研究结合的方式,探讨特应性皮炎脾虚湿蕴证患者的皮损表现特征。方法现代文献研究方面,检索建库以来至2021年10月31日特应性皮炎脾虚湿蕴证的相关文献,提取并规范皮损特征,对所纳入皮损表现进行频数分析及关联分析;门诊招募于广东省中医院皮肤科就诊的特应性皮炎患者,分为脾虚湿蕴和非脾虚湿蕴2组,填写人口学资料及《特应性皮炎脾虚湿蕴证中医皮损特征采集表》,采用SPSS 27.0软件对数据进行非参数检验和二元Logistic回归分析,比较2组患者的皮损表现差异。结果文献研究共纳入符合要求的文献288篇,其中丘疹、鳞屑、瘙痒、糜烂及渗出等是特应性皮炎脾虚湿蕴证最常见的皮损表现;关联分析提示丘疹、瘙痒、糜烂、渗出、干燥与脾虚湿蕴证的关联性较强。门诊横断面研究共纳入受试者152例,差异分析提示2组患者在粗糙、鳞屑与潮红方面差异有统计学意义(P<0.05),其他皮损表现差异均未见统计学意义(P>0.05);单因素回归结果提示粗糙、鳞屑与潮红会显著影响患者是否为脾虚湿蕴证(P<0.05),而多因素回归结果提示,仅潮红为非脾虚湿蕴证的显著影响因素(P<0.05)。结论特应性皮炎脾虚湿蕴证患者的皮损表现以干燥、鳞屑、肥厚等干性皮损为主,符合亚急性、慢性期皮损表现;临床脾虚湿蕴证患者较少出现渗出、水疱、糜烂等湿性皮损。

培土清心颗粒治疗特应性皮炎的蛋白质组学研究

目的采用血清蛋白质组学方法探讨培土清心颗粒(白术、连翘、白茅根、太子参等)治疗特应性皮炎的作用靶点。方法选择特应性皮炎患者5例,以培土清心颗粒治疗12周,并以健康志愿者5例作为对照。对特应性皮炎患者治疗后的临床核心评价指标包括病情严重程度评分(EASI、SCORAD)、瘙痒程度评分、患者自评(POEM)、生活质量指数等进行评估。采用数据非依赖采集质谱(DIA-MS)技术检测血清样本,并根据P<0.05、变化倍数(Fold Change)>1.2筛选出特应性皮炎患者与健康人群的血清差异蛋白,以及培土清心颗粒治疗前后特应性皮炎患者的血清差异蛋白。对差异蛋白进行GO功能富集分析和KEGG通路富集分析。结果(1)与治疗前比较,特应性皮炎患者治疗后的临床核心评价指标包括病情严重程度评分(EASI、SCORAD)、瘙痒程度评分、患者自评(POEM)、生活质量指数等均得到明显改善,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。(2)健康对照组及特应性皮炎组共分析出28个差异性蛋白,其中12个蛋白表达水平上升,16个蛋白表达水平下降,包括ALAD(δ-氨基乙酰丙酸脱水酶)、LTA4H(白三烯A-4水解酶)、CA1(碳酸酐酶1)、F11(凝血因子XI)、LCP1(淋巴细胞胞浆蛋白1)等。主要涉及PI3K-AKT信号通路、脂质与动脉粥样硬化、ECM-受体相互作用、血小板活化、NF-κB信号通路、中性粒细胞外陷阱形成等信号通路。(3)特应性皮炎患者经培土清心颗粒治疗前后共分析出12个差异蛋白,其中8个蛋白表达水平上升,4个蛋白表达水平下降,包括ALAD、FGA(纤维蛋白原α链)、IGHV3-64D及IGHV3-38等。主要涉及脂质与动脉粥样硬化、补体途径、金黄色葡萄球菌感染、NF-κB信号通路、流体剪切应力与动脉粥样硬化等信号通路。(4)ALAD、FGA、IGHV3-64D等3个蛋白靶点在特应性皮炎患者中的表达显著下调,而在培土清心颗粒治疗后显著上调。结论差异表达蛋白ALAD、FGA、IGHV3-64D可能是培土清心颗粒治疗特应性皮炎的作用靶点,为进一步实验验证奠定了基础。

特应性皮炎脾虚湿蕴病证结合动物模型的构建与评价

目的通过比较2,4-二硝基氯苯(2,4-Dinitrochlorobenzene,DNCB)诱导特应性皮炎(Atopic Dermatitis,AD)小鼠疾病模型、“外湿+饮食失节+番泻叶灌胃”复合因素诱导脾虚湿蕴证小鼠模型,以及两者病证结合模型,建立特应性皮炎脾虚湿蕴病证结合小鼠研究模型,探索该方法的可行性。方法采用“外湿+饮食失节+番泻叶灌胃”复合因素造模方法,探索构建小鼠(Balb/c)脾虚湿蕴证,进一步应用DNCB诱导Balb/c小鼠出现特应性皮炎样病变,建立脾虚湿蕴证特应性皮炎病证结合模型。观察各组小鼠一般情况及体质量,进行脾虚、湿证症状评分;通过比较各组皮损程度、EASI评分、经皮水分散失(TEWL)值、脾脏系数和胸腺系数评价小鼠特应性皮炎严重程度;测定小鼠肌酐、葡萄糖、总胆固醇、甘油三酯、胃泌素、淀粉酶水平。结果(1)在脾虚湿蕴证造模期间,与正常组比较,脾虚湿蕴证组、脾虚湿蕴型特应性皮炎组小鼠出现肥胖、精神萎靡、毛发污秽油腻、腹泻、肛周清洁度差等情况。在结合施加特应性皮炎模型后,与正常组比较,特应性皮炎组(P<0.001)、脾虚湿蕴证组(P<0.05)、脾虚湿蕴型特应性皮炎组(P<0.001)的体质量都有所降低。(2)与特应性皮炎组比较,脾虚湿蕴型特应性皮炎组的皮损程度更严重,EASI评分(P<0.05)、TEWL值(P>0.05)更高。(3)与正常组比较,特应性皮炎组的脾脏系数升高(P<0.001)、胸腺系数降低(P<0.001);与特应性皮炎组比较,脾虚湿蕴型特应性皮炎组脾脏系数(P>0.05)、胸腺系数都降低(P<0.05)。(4)血清生化指标结果显示,与正常组比较,脾虚湿蕴证组小鼠肌酐(P<0.01)、葡萄糖(P<0.001)、总胆固醇(P>0.05)、甘油三酯(P>0.05)、胃泌素(P<0.001)水平升高,淀粉酶水平降低(P<0.01);与特应性皮炎组比较,脾虚湿蕴型特应性皮炎组小鼠肌酐(P>0.05)、葡萄糖(P<0.05)、总胆固醇(P>0.05)、甘油三酯(P>0.05)、胃泌素(P<0.001)水平升高,淀粉酶水平降低(P>0.05)。结论“外湿+饮食失节+番泻叶灌胃”复合因素结合DNCB诱导特应性皮炎脾虚湿蕴病证结合小鼠模型既可表现出明显的脾虚湿蕴证中医指征,也可表现出特应性皮炎病样特征,可作为可靠的特应性皮炎脾虚湿蕴证中医病证结合动物模型,为后续脾虚湿蕴型特应性皮炎病理机制探讨、中药复方药效评价、药理机制探讨等方面研究提供参考。

特应性皮炎寒湿证病证结合小鼠模型的构建研究

目的构建特应性皮炎(atopic dermatitis,AD)寒湿证病证结合小鼠模型,并对模型进行宏观表征及微观指标评价。方法将Balb/c小鼠随机分为正常对照组、疾病模型组、寒湿证组、病证结合组,每组6只。其中正常对照组小鼠外涂基质液;疾病模型组小鼠外涂二硝基氯苯(dinitrochlorobenzene,DNCB),模拟特应性皮炎疾病模型;寒湿证组小鼠在外涂基质液基础上,采用人工气候箱模拟寒湿环境[温度(4±2)℃、相对湿度(90±5)%],并结合高脂饲料喂养模拟寒湿证;病证结合组小鼠在DNCB造模基础上,结合寒湿证证候模拟方法进行复合造模。采用经皮水分流失测量仪对动物经皮水分流失(transepidermal water loss,TEWL)进行测量和评估;对小鼠皮炎和寒湿证证候情况进行观察评价;对搔抓行为进行记录分析;HE染色观察小鼠背部皮肤组织病理改变,并对其表皮厚度和炎症细胞浸润情况进行分析;Western blot法检测皮肤中紧密连接蛋白1(Claudin-1)、瞬时受体电位香草酸3(transient receptor potential vanilloid 3,TRPV3)和TRPV4蛋白的表达水平;利用流式细胞术分析淋巴结辅助性T细胞17(helper T cells 17,Th17)/调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)比值。结果与疾病模型组比较,病证结合组小鼠的证候评分明显升高(P<0.001),TEWL值明显升高、背部皮肤表皮厚度明显增加(P<0.05),背部皮肤的Claudin-1、TRPV3蛋白表达量显著降低(P<0.01),而TRPV4蛋白表达显著升高(P<0.05)。结论采用DNCB进行特应性皮炎疾病造模,并结合寒湿环境及高脂饮食的寒湿证造模方式,能够成功构建特应性皮炎寒湿证病证结合小鼠模型。该研究为后续深入探索特应性皮炎寒湿证病证结合动物模型构建及中药复方对AD的药效学研究提供了较理想的动物模型。

培土清心法小儿推拿治疗婴幼儿特应性皮炎的理论与实践

从小儿推拿治疗特应性皮炎的中医辨证、主要选穴与配穴、手法要求、禁忌证、常用介质、注意事项、护理要点等方面介绍以培土清心法小儿推拿治疗2岁以下的婴幼儿特应性皮炎的经验。主穴以清心火、健脾土、运脾利湿、消食导滞为切入点,配穴根据常见伴随症状,辨证灵活,对症加减;操作手法轻快柔和、平稳着实,次数、疗程可根据病情、年龄调整;紫草油、甘草油为常选用的小儿推拿介质,温和不刺激;严格把握小儿推拿的禁忌证,选穴操作部位有皮疹不宜操作。临床应用取得了较好的疗效,并附验案以资验证。

基于三阶段DEA模型的流通企业经营效率评价

经济发展新常态背景下,经济发展质量被放在突出位置。流通企业作为连接生产与消费的重要中介因子,其经营效率的提高能够显著促进经济发展的质量。本文基于2010-2019年我国上市流通企业经营数据,借助三阶段DEA模型分析流通企业经营效率。研究结果表明:除物流业以外,我国流通业企业经营效率在过去十年并未有明显提升。而如果忽视环境因素的影响,则可能低估流通企业经营效率。因此应该进一步放权市场主体,营造更好的流通业发展环境,并基于大数据物流网技术提升流通业的综合经营效率。

基于关联规则算法和复杂系统熵聚类的中医药治疗特应性皮炎的证治规律研究

目的分析探讨当代中医对特应性皮炎(AD)的辨证治疗的经验。方法基于关联规则算法和复杂系统熵聚类,通过检索2017年1月1日～2018年3月1日发表于中国知网、万方、维普、中国生物医学文献数据库中中医药治疗AD的文献,建立包含辨证分型、内服及外用中药的数据库,利用中医传承辅助平台V2.5进行数据分析。结果内服中药四气分布主要为温、寒、平、凉,药物的五味分布主要为甘、苦、辛、淡,药物归经多集中于脾肺。内服中药以茯苓、甘草、生地、白鲜皮、当归等15味药频次居多,外用中药以黄柏、苦参、白鲜皮、马齿苋、地肤子等10味中药频数最高。结论 AD辨证分型多集中于脾虚证,兼夹有湿邪、血燥。中药内服方以"健脾益气祛湿,祛风养血润燥"为主要治法,外用方以"清热燥湿,解毒止痒"为则;处方用药多从脾论治,可为中医临床辨证用药提供参考。

基于网络药理学和蛋白模块探讨培土清心颗粒治疗特应性皮炎的作用机制

目的运用网络药理学和蛋白模块方法探讨培土清心颗粒治疗特应性皮炎(atopic dermatitis,AD)的作用机制。方法基于中药系统药理学数据库及分析平台(TCMSP)和BATMAN-TCM数据库获取培土清心颗粒化学成分及其对应靶点,通过GeneCards、OMIM、DisGeNET数据库筛选特应性皮炎疾病靶点。使用String数据库构建蛋白相互作用(PPI)网络;使用Cytoscape软件绘制培土清心颗粒潜在活性成分-靶点-疾病网络图,使用Network Analyzer工具对网络进行拓扑属性分析;以插件ClusterMaker对靶点进行模块化分解,并使用DAVID数据库进行基因百科全书(KEGG)通路富集分析。结果得到培土清心颗粒治疗特应性皮炎活性成分185个,靶点125个,重要活性成分包括檞皮素、木犀草素、山奈酚、汉黄芩素等;重要靶点包括PTGS2、CXCL8、IL-10、CCL2等;PPI网络模块化分析结果显示,125个靶点主要分为3个模块,KEGG通路富集方面,模块一内靶点KEGG通路主要与特应性皮炎免疫系统、炎症反应相关;模块二内靶点KEGG通路主要与细胞增殖、分化、凋亡相关;模块三内靶点KEGG通路与代谢密切相关。结论培土清心颗粒可能通过抗炎、调节免疫、调控细胞凋亡以及调节氨基酸代谢以达到治疗特应性皮炎的目的。

两种新型胶原膜引导骨组织再生的体内外性能研究

目的研究两种新型胶原膜(鱼胶原、猪胶原)对SD大鼠骨髓间充质干细胞(rat bone marrow mesenchymal stem cells,rBMSCs)成骨分化的影响,并观察其促进SD大鼠颅顶骨缺损修复的效果。方法利用扫描电镜(SEM)和接触角测量仪表征两种膜的表面形貌及水接触角。在两种膜上培养rBMSCs,并将细胞接种在空白孔板上作为空白对照组。第1、3、5、7天时以CCK-8法检测两种膜对rBMSCs增殖的影响,并通过激光共聚焦显微镜观察24 h时细胞的粘附与伸展。用碱性磷酸酶(ALP)染色和活性检测,茜素红染色和钙结节半定量测定及实时荧光定量PCR评估两种膜的体外成骨性能。体内实验中,在SD大鼠颅中缝两侧制备直径5 mm的骨缺损,在左侧骨缺损区植入鱼胶原膜或猪胶原膜,右侧骨缺损区作为空白对照组,3个月后采用micro-CT检测颅顶骨缺损区骨再生情况。结果SEM:鱼胶原膜表面致密,猪胶原膜呈疏松多孔的表面。接触角测量仪:猪胶原膜的亲水性强于鱼胶原膜(P<0.05)。CCK-8及激光共聚焦显微镜:细胞在两种膜及空白孔板上24 h时铺展良好,7 d内稳定增殖。体外成骨性能检测:猪胶原膜上rBMSCs在5 d时的ALP活性、14 d时细胞外基质矿化水平、7 d时细胞相关成骨基因Bmp2、Col1、Runx2的表达高于鱼胶原膜组和空白对照组(P<0.05)。体内成骨实验(3个月):猪胶原膜促进骨再生明显优于鱼胶原膜和空白对照组(P<0.05),鱼胶原膜组和空白对照组无明显差异。结论猪胶原膜体内外促进骨再生的效果明显优于鱼胶原膜组,具有作为引导骨组织再生膜材料的潜能。

应用石墨烯改良PLCL/Gel纳米纱支架材料的可行性分析

目的探索应用石墨烯(Gr)改良聚-L-丙交酯-己内酯/明胶(PLCL/Gel)纳米纱支架材料的可行性。方法采用自制的静电纺丝装置分别制备PLCL-Gel和Gr-PLCL-Gel水纺纳米纱支架材料。使用体视显微镜、扫描电子显微镜观察支架材料形态结构;通过拉伸试验观察该材料机械强度;采用CCK-8实验评价支架生物相容性,并将支架植入大鼠皮下,观察细胞浸润情况。结果拉伸试验显示,加入石墨烯可明显提高支架的力学性能。两组支架都无明显细胞毒性,在体内外实验中均表现出良好的生物相容性,体内实验表明石墨烯在一定程度上减轻了炎症反应。结论应用石墨烯改良PLCL/Gel纳米纱支架材料,可以获得具有合适力学性能、亲水性、生物相容性的纳米纱支架材料,在组织工程皮肤等方面具有应用潜能。

陈达灿教授治疗寻常型银屑病经验

系统总结了陈达灿教授治疗寻常型银屑病的学术思想和经验。通过临床跟诊学习及病案整理,从病因病机、辨证分型及用药对陈教授经验进行归纳和总结,最后辅以验案加以佐证。陈教授认为岭南地区银屑病的发病以热(血热、或兼风热)、瘀(血瘀)为主,常兼湿邪为患。临床分为血热证、血瘀证、脾虚湿蕴证,治以清热凉血、活血祛瘀、健脾祛湿化瘀,并且根据多年临床经验,形成自己独特的用药特点,常配伍解毒药物使用,在临床取得显著的疗效。

特应性皮炎与肠道及皮肤菌群相关性研究进展

特应性皮炎(AD)是一种较常见的慢性、复发性、炎症性皮肤病。好发于婴儿和儿童,随着工业化的逐渐发展,该病的发病率逐年升高。已有研究证实,AD患者与健康人群的肠道菌群构成存在差异,另一方面,AD的发病相关机制和疾病发展过程是皮肤正常微生物整体结构的改变或失调。肠道及皮肤有类似的信号转导和神经支配通路。因此,研究皮肤与肠道菌群的内在联系从而开辟新的治疗方式成为当下研究的热点。

陈达灿治疗神经性皮炎临证经验

神经性皮炎属于中医学“牛皮癣”“摄领疮”范畴,是一种以阵发性剧痒和皮肤苔藓样变为特征的慢性炎症性皮肤病,其病程长、易复发、难治愈。陈达灿教授基于多年临证经验认为本病在早期发作时与肝密切相关,治疗重在从肝论治,以清肝火、祛肝风、疏肝经、调肝血为主,慢性肥厚期多证属脾湿血瘀,治当健脾除湿、活血除瘀通络,施以“三术三藤”验方加减。具体选择药物方面,不仅善于针对病机精选药味,注重一药多用,充分发挥药物功效,还贵在随次症灵活加减,从而使全方达到药少力专之效。本文从病因病机、治疗思路和用药特色逐层解析其临证经验,并附验案以详细说明和佐证。

中医湿证动物模型的研究进展

湿,属六气之一。湿证是指具有湿之特性的各种不同证候。近年来,湿证是中医证候研究的热点和重点具有重要的科学研究价值,证候的构建是中医与现代医学的桥梁和纽带。构建能客观体现及反映湿证的动物模型是进一步开展临床和基础研究的立足点。目前,已有很多的中医湿证实验室研究报道,尤其在各种中医湿证动物模型的构建及相关指标的检测。现对中医湿证的理论源流、湿证动物模型分类及湿证模型检测指标及意义的研究进展进行探讨,为中医湿证动物模型的建立及优化研究提供参考及启示,以期为湿证动物模型的构建及湿证生物学机制研究提供思路。

特应性皮炎不同T细胞亚群平衡紊乱与中医证型关联及YAP对其调控作用的研究

目的研究辅助性T细胞(Th)1/Th2/Th17/调节性T细胞(Treg)比例在特应性皮炎(AD)不同中医证型之间的差异,并探索Yes相关蛋白(YAP)在不同T细胞亚群中的表达量与其平衡紊乱之间的关联。方法收集AD患者35例(其中心火脾虚证21例、脾虚蕴湿证9例、血虚风燥证5例)及健康对照者24例,分析其临床特征,流式细胞仪检测不同组Th1/Th2/Th17/Treg细胞比例,酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测细胞因子的表达,分离外周血单个核细胞(PBMC)并诱导分化为不同T细胞亚群后检测YAP mRNA的表达量。结果AD组及健康对照组在年龄、性别上比较差异无统计学意义,AD患者中心火脾虚组AD严重程度评分(SCORAD)高于脾虚湿蕴组和血虚风燥组(P<0.001),性别、年龄、病程、嗜酸性粒细胞计数、IgE差异无统计学意义;Th2及Th17比例在心火脾虚组升高(P<0.05),Treg在心火脾虚组降低(P<0.05)、在血虚风燥组升高(P<0.05),Th1/Th2及Th17/Treg比例在心火脾虚组均升高(P<0.05);Th1相关细胞因子干扰素(IFN)-γ在心火脾虚组降低(P<0.01),Th2相关细胞因子白细胞介素(IL)-4在心火脾虚组升高(P<0.001),Th17相关细胞因子IL-17A及IL-21在心火脾虚组升高(P<0.01),Treg相关细胞因子IL-10在心火脾虚组降低(P<0.001),其余IL-6、转化生长因子(TGF)-β及IL-2均无明显变化;健康对照组中YAP mRNA在Treg中明显升高,(P<0.05),而在AD组中YAP mRNA在Th17中表达升高,在Treg中相对降低,YAP mRNA在Th17中的表达在心火脾虚组明显升高(P<0.01),在Treg中的表达在心火脾虚组明显降低(P<0.05),在Th1及Th2中的表达差异无统计学意义。结论在AD中存在Th2/Th1、Th17/Treg平衡紊乱,且在心火脾虚证中Treg下降、Th2及Th17为主导的免疫反应更明显,YAP在Treg中的表达下调、Th17中的表达上调很可能是介导AD Th17/Treg平衡向Th17偏移的关键因素,且这一特征在心火脾虚证中更明显。

陈达灿教授治疗脂溢性皮炎经验

总结陈达灿教授治疗脂溢性皮炎的临证经验。在病因病机方面,陈达灿教授认为,阴虚和脾虚是本病发病和反复发作的根本原因,风湿热邪则为本病标实。临证治疗时,重在辨证补虚,以滋补肾阴、健运脾胃、疏风清热利湿为主要治则,标本兼治;治疗过程中始终重视顾护脾胃;用药上,善用动物类药和引经药,并对青蒿有独到的见解和使用,从而增强全方疗效。诊治特色明显,临床疗效显著。

培土清心方降低人肥大细胞HMC1.1突变株与HMC1.2突变株细胞增殖活性及对HMC1.1突变株相关信号通路的影响研究

目的观察培土清心方对人肥大细胞HMC1.1突变株与HMC1.2突变株细胞增殖活性及对HMC1.1突变株相关信号通路的影响,为中医药复方治疗特应性皮炎提供实验依据。方法(1)培土清心方实验组不同剂量(0.01 mg/mL、0.05 mg/mL、0.1 mg/mL、0.25 mg/mL、0.5 mg/mL、1.0 mg/mL)分别作用于HMC1.1及HMC1.2细胞,采用Cell Counting Kit-8检测培土清心方对HMC1.1及HMC1.2细胞增殖活性的影响。(2)采用Western blot方法检测培土清心方实验组不同剂量(0.25 mg/mL、0.5 mg/mL、1.0 mg/mL)对HMC1.1细胞C-kit/Stat信号通路的作用。结果(1)培土清心方0.25 mg/mL、0.5 mg/mL、1.0 mg/mL分别作用48小时均能显著抑制HMC1.1与HMC1.2细胞增殖活性(P<0.05),并且呈现一定的剂量依赖性。培土清心方0.25 mg/mL、0.5 mg/mL、1.0 mg/mL分别作用HMC1.1与HMC1.2细胞72小时也呈现剂量依赖性抑制细胞增殖活性作用。尤其是对HMC1.1细胞增殖抑制更为明显。(2)培土清心方对HMC1.1细胞作用8小时后,使Phospho-C-kit(Y703)蛋白表达具有下调趋势,以及一定量降低Phospho-C-kit(Y719)蛋白表达的作用。培土清心方对HMC1.1细胞作用8小时后,使Phospho-Stat1(Y701)/Stat1蛋白表达具有下调趋势,并且呈现出剂量依赖性。结论实验结果表明培土清心方对人肥大细胞HMC1.1增殖抑制的作用机制可能涉及C-kit/Stat信号通路,对肥大细胞的作用可能是培土清心方治疗特应性皮炎的潜在作用机制之一。

心火脾虚证型特应性皮炎患者汗液差异代谢物及相关通路分析

目的探究心火脾虚证型特应性皮炎(AD)患者汗液差异代谢物与相关通路。方法招募心火脾虚证型特应性皮炎患者与健康志愿者各22例。对所收集的汗液标本进行广泛靶向代谢组学检测,通过多元统计分析筛选出差异代谢物。利用京都基因与基因组百科全书(KEGG)数据库、人类代谢组数据库(HMDB)对差异代谢物进行相关通路与关联疾病分析。结果在两组汗液标本间,共筛选出115个差异代谢物。经KEGG数据库注释分析,共涉及15个通路。HMDB关联疾病分析结果提示与消化系统疾病关系密切,包括结直肠癌、嗜酸性食管炎、克罗恩病和溃疡性结肠炎。结论心火脾虚证型特应性皮炎患者与健康对照组间存在众多差异代谢物,可为共病临床早期预警提供线索。

丹参素对银屑病样细胞Yes相关蛋白表达及细胞增殖、凋亡的影响

目的研究丹参素对M5刺激的HaCaT细胞(银屑病样细胞模型)增殖、凋亡的影响及与Yes相关蛋白(YAP)的关系。方法采用M5(含10μg/L的IL-1α、IL-17、IL-22、TNF-α、Oncostatin M)作用于HaCaT细胞48 h,制作银屑病样细胞模型,同时分别加入0(对照组)、0.125、0.25、0.5 mmol/L丹参素刺激细胞,以未做处理的HaCaT细胞为空白对照组。实时定量PCR及Western印迹检测各组细胞YAP的表达;MTT法检测丹参素刺激细胞24、48、72 h时各组细胞的增殖活性;流式细胞仪检测丹参素对各组细胞周期及凋亡的影响,Western印迹检测各组细胞周期相关蛋白(cyclin A、cyclin B1、cyclin D、cyclin E)及凋亡相关蛋白(cleaved caspase-3、Bcl-2、BAX、p53、p21)的表达。多组间均数比较采用单因素方差分析,组间两两比较用LSD-t检验。结果空白对照组与0(对照组)、0.125、0.25、0.5 mmol/L丹参素组细胞YAP mRNA、蛋白的相对表达水平及培养24、48、72 h时的增殖活力差异均有统计学意义(P<0.001),0.125、0.25、0.5 mmol/L丹参素组YAP mRNA(1.76±0.04、1.54±0.05、1.33±0.05)、YAP蛋白的相对表达水平(1.78±0.06、1.49±0.32、1.27±0.04)及培养48 h时的细胞增殖活力(1.66±0.04、1.52±0.02、1.34±0.04)均低于对照组(mRNA:2.04±0.04,蛋白:2.10±0.06,活力:1.82±0.03,均P<0.05)。流式细胞仪检测显示,5组细胞G0/G1期、S期、G2/M期细胞比例及凋亡率差异均有统计学意义(P<0.001),0.125、0.25、0.5 mmol/L丹参素组细胞G0/G1期、G2/M期细胞比例高于对照组,S期细胞比例低于对照组(均P<0.05),0.25、0.5 mmol/L丹参素组细胞凋亡率高于对照组(均P<0.05)。Western印迹显示,5组的细胞周期相关蛋白及凋亡相关蛋白相对表达差异均有统计学意义。结论丹参素可能通过抑制YAP的表达而抑制银屑病样细胞的增殖与促进其凋亡。