Fanconis贫血病人造血干细胞DNA修复基因hHR21^(sp)表达研究

目的 :研究正常人外周血单核细胞在UV或γ辐射后hHR2 1sp基因的转录表达 ,进一步分析hHR2 1sp基因在fanconisanemia(FA)单核细胞和造血干细胞的转录表达水平及发病机制中的作用。方法 :对正常人外周血单核细胞在UV或γ辐射后不同时间提取细胞总RNA ,通过RT -PCR、southern杂交、以 β -actin为内参照放射影像对hHR2 1sp基因的转录表达水平进行检测 ,进一步检测FA病人外周血单核细胞和骨髓造血细胞hHR2 1sp基因的表达水平。结果 :正常外周血单核细胞在UV或γ -辐射后不同时间hHR2 1sp基因转录表达都有所变化。正常人外周血单核细胞与对照组比较在 80J/m2 UV辐射hHR2 1sp表达于 3h开始增加 ;在 6h表达水平最高 ,与正常对照有 2倍多差异 ,而在 9h表达有所降低 ;而γ -辐射 5Gy辐射 6h增加明显 ,在 9h后有所降低与正常对照有 2倍差异。检测发现FA病人单核细胞与正常人外周血单核细胞hHR2 1sp基因表达无明显差异 ;但FA病人造血干细胞与正常组骨髓细胞相比hHR2 1sp基因表达降低显著 ,有 1倍多差异。结论 :实验结果表明hHR2 1sp在FA病人造血干细胞表达缺陷 ,提示hHR2 1sp基因表达降低可影响FA病人造血干细胞和DNA双链断裂修复功能是FA发病机制之一。