氨氯地平抑制人血管平滑肌细胞增殖机制的研究

目的 观察氨氯地平对人血管平滑肌细胞 (VSMC)丝裂素活化蛋白激酶 (MAPK)活性的影响。方法 取人乳腺下动脉培养VSMC ,用bFGF刺激细胞增殖 ,观察氨氯地平对bFGF激活的MAPK活性的影响 ,用 p42 / p44磷酸化抗体蛋白免疫印迹法测定MAPK活性。结果 bFGF对MAPK有显著激活作用 ,激活峰值出现在 5～ 15min ,维持至 3h ;此活化作用被MAPK激酶的特异抑制剂PD980 5 9抑制 ;无论瞬时或持久的bFGF激活的MAPK活性均被氨氯地平抑制。

巨噬细胞集落刺激因子与血管平滑肌细胞增殖

目的一些以血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）增殖为特点的血管疾病，在病变部位常有巨噬细胞浸润。本研究巨噬细胞集落刺激因子（ＭＣＳＦ）在ＶＳＭＣ生长调节中的作用。方法实验采用培养大鼠主动脉ＶＳＭＣ，细胞增殖观察指标采用氚标胸腺嘧啶核苷掺入法，并用Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ技术测定原癌基因表达。结果（１）Ｌ９２９细胞上清液（富含ＭＣＳＦ）及重组ＭＣＳＦ以剂量依赖关系刺激氚标胸腺嘧啶核苷掺入；（２）ＶＳＭＣ在接受刺激后表达某些原癌基因，如ｃｆｏｓ、ｃｍｙｃ、ｅｒｇ１和ＪｕｎＢ；（３）凝血酶、ＰＤＧＦ、ｂＦＧＦ与ＭＣＳＦ在促增殖作用上具有协同作用。结论ＭＣＳＦ与其它生长因子协同作用，通过自分泌／旁分泌机制调控ＶＳＭＣ增殖。

巨噬细胞集落刺激因子对DEL细胞增殖作用的研究

目的 研究巨噬细胞集落刺激因子对动脉粥样硬化病变处伴随血管平滑肌细胞共同积聚的巨噬细胞的增殖作用及机制。方法 以能分化为巨噬细胞表型的DEL细胞为离体细胞实验模型 ,将富含巨噬细胞集落刺激因子的L92 9细胞条件培养液或重组的人巨噬细胞集落刺激因子加入体外培养的处于静止期的DEL细胞 ,以氚标胸腺嘧啶核苷或 5 溴 尿嘧啶核苷掺入法分别检测DEL细胞DNA的合成。另以Northernblot法检测DEL细胞c fmsmRNA等的表达。结果 1∶8、1∶4和 1∶2稀释的L92 9细胞条件培养液分别使DEL细胞DNA的合成显著增加了 12 0 %、332 %和 739% ,加入抗巨噬细胞集落刺激因子抗体则能明显抑制这种作用 ,且与凝血酶有协同作用 ;重组的人巨噬细胞集落刺激因子以剂量依赖方式促进DEL细胞增殖 ,并调节c fmsmRNA等的表达。结论 巨噬细胞集落刺激因子可能通过自分泌和旁分泌机制影响巨噬细胞及血管平滑肌细胞的增殖 ,从而在动脉粥样硬化血管损害的进展中发挥其重要作用。