鼠矿化组织中非胶原蛋白的提取和层析分离

目的 :提取小鼠矿化组织中的基质蛋白 ,用离子交换层析法分离非胶原蛋白 ,并进行初步分析。方法 :取新生小鼠的颅盖骨和成年鼠的股骨 ,用盐酸胍和EDTA提取基质蛋白 ,采用MonoQHR离子交换柱层析 ,4% - 16%SDS -PAGE梯度胶电泳 ,Stains-All染色结合银染鉴定蛋白质 ,抗骨唾蛋白 (bonesialoprotein ,BSP)抗体 ,抗骨桥素(osteopontin ,OPN)抗体进行免疫印迹。结果 :用MonoQHR离子交换柱能够有效地分离出矿化组织的非胶原蛋白 ,Stains-All硝酸银染色和免疫印迹显示出不同组份的蛋白质提取分析情况。结论 :对矿化组织中的非胶原蛋白的初步提取、分离可以采用MonoQHR离子交换柱层析 ,采用银染结合Stains -All染色。