小块神经组织整体孵育ABC法的探讨

本文介绍一种小块神经组织整体孵育的免疫细胞化学ABC法。组织块不切片而整体入一抗、二抗以及卵白素—生物素—过氧化物酶复合液中孵育,二氨基联苯胺—双氧水呈色,锇酸后固定,Epon包埋之后再行切片作光镜和电镜观察。依此程序以及改进的参数,对海兔侧神经节感觉神经元簇(平均直径1.0±0.2 mm)整体进行了5-羟色胺免疫组化反应。结果表明,侧神经节感觉神经元簇的浅、中、深层,光镜下均可见大量念珠状5-羟色胺免疫阳性反应纤维及其膨体。电镜下5-羟色胺免疫阳性反应物电子密度高,容易辨认。非免疫阳性反应的侧神经节感觉神经元的亚细胞结构亦清晰可见。此外,该法仍保持原法非特异性背底浅、免疫阳性反应物与背底对比明显以及保存时间长等特点。对于因组织小而不便先切片再进行免疫组化程序的,可试用此法。对1毫米左右厚的薄组织也可使用本法。